[发明专利]一种组合微生物固态发酵法生产薯蓣皂素的方法

摘要

本发明提供了一种复合微生物固态发酵法生产薯蓣皂素的方法，将进行脱淀粉处理的黄姜原料粉碎，得到黄姜残渣；以黄姜残渣为唯一碳源配制发酵培养基；加入里氏木霉，绿色木霉和烟曲霉组合菌进行发酵；将发酵产物过滤后烘干，用有机溶剂提取并得到结晶；即得到薯蓣皂素。本发明提供的制备方法处理简单，污染少，并且可有效提高微生物发酵效率，产物的率高。

主权项

一种组合微生物固态发酵法生产薯蓣皂素的方法，其特征在于，所述方法采用里氏木霉，绿色木霉和烟曲霉组合发酵黄姜得到薯蓣皂素，具体步骤包括：a.菌种的驯化：首先采用低浓度的黄姜乙醇提取物分别对前述三种菌种进行驯化培养，循环驯化多次后取薯蓣皂素含量最高的霉菌孢子再次转接至高浓度的黄姜乙醇提取物驯化培养液中继续驯化，最后将菌种保存在50％的黄姜乙醇提取物中；b.黄姜的预处理：黄姜原料洗净后烘干、粉碎、过筛，然后进行脱淀粉处理，再次粉碎过筛后，得到黄姜残渣；c.菌种活化培养：从驯化后的菌种分别挑取孢子接种于活化培养基中，循环活化，活化后进行种子培养；d.组合发酵：首先接种步骤c中得到绿色木霉，发酵一段时间后接种步骤c中得到的里氏木霉，继续发酵一段时间后，接种步骤c中得到的烟曲霉发酵一段时间，得到发酵产物；e.产物处理：将发酵产物过滤后烘干，用有机溶剂提取，结晶干燥后得到产物；步骤d中组合发酵的发酵培养基为黄姜残渣25‑30％，Tween 80 1‑1.2％，蛋白胨2.5‑3％，K2HPO4 0.2‑0.3％，pH 5.5‑6；置于超声发生器中，25‑50KHz超声15min；超声后的培养基121℃灭菌30min；步骤d中组合发酵的发酵条件为：固体浅盘发酵室，相对湿度80‑90％，温度30‑35℃，通无菌风1‑1.5vvm；首先接种绿色木霉，搅拌均匀，发酵1天后接种里氏木霉，搅拌均匀，发酵1天后接种烟曲霉搅拌均匀发酵5天。