[发明专利]同步糖化发酵生产乳链菌肽和乳酸的方法及在饲料中应用

摘要

本发明公开一种同步糖化发酵生产乳链菌肽和乳酸的方法及在饲料中应用，以木质纤维素为原料，纤维素酶将木质纤维素水解成单糖，产乳链菌肽和乳酸的乳酸乳球菌Lactococcus lactis subsp.lactis，将单糖同步转化生产乳酸和乳链菌肽。利用木质纤维素，如秸秆、稻草或者木片等同时转化为高附加值的乳链菌肽和乳酸；并将生产的乳酸和乳链菌肽用于牛羊饲料添加剂中，能够青饲料中抑制细菌的繁殖，20日内不腐败；用于饲养牛羊后日增重比对照组提高10%，节省饲料10%，提高养殖利润，同时，牛羊的粪便排泄量减少，最高可减少5%，刺激气味减弱，从侧面反映了，饲料的利用率提高，并且具有很好的环保效应。

主权项

一种同步糖化发酵生产的混合物在制备反刍动物饲料添加剂中的用途；上述混合物的生产方法，包括以下步骤：1）用液体培养基培养乳酸乳球菌Lactococcus lactis subsp.lactis；将乳酸乳球菌Lactococcus lactis subsp.lactis接种到液体培养基中，37℃培养；液体培养基成分为：葡萄糖 10 g/L，酵母浸粉10 g/L， KH2PO4 10 g/L，NaCl 2 g/L，MgSO4•7H2O 0.2 g/L；121℃灭菌30 min；2）用木质纤维素总体积12～14倍的水对预处理后的木质纤维素进行清洗，要求最终水洗液中葡萄糖浓度小于0.1g/L，以降低葡萄糖对酶解反应的负反馈抑制，同时洗去有毒物质；3）将水洗处理后的木质纤维素加入2.5%~10%（v/w）柠檬酸缓冲液中，再加入1~5g/L NaCl、0.5~1g/L MgSO4·7H2O、1~20g/L KH2PO4、1%~4%酵母粉、2%~8%蛋白胨，10g/L~50 g/L CaCO3，补足去离子水到40g，实际纤维素添加量为总体系的1%～6%；将固液混合物pH值调到4.5~7.0后，加入反应器，高温高压灭菌；4）向步骤3中培养基中加入0.01%～0.06% Tween‑80，反应1.5小时后，再添加除菌纤维素酶5 FPU/g ~25 FPU/g纤维素、β‑葡糖苷酶0.1 IU /g~10 IU /g纤维素，木聚糖酶0.1 IU /g~10 IU /g纤维素，果胶酶0.1 IU /g~10 IU /g纤维素；50℃ 160rpm预水解3～10小时；5）预水解后向培养体系中添加培养12小时的乳酸乳球菌Lactococcus lactis subsp.lactis，添加量为总体系的3%～10%；37℃～50℃ 160rpm培养10～100小时；6）将步骤5发酵液用盐酸调pH2；离心，得到含乳酸和乳链菌肽的上清液。