[发明专利]具有增加产率的支链淀粉酶变体有效
| 申请号： | 201410181518.X | 申请日： | 2007-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN103898080B | 公开（公告）日： | 2017-04-12 |
| 发明（设计）人： | G·英格兰德;M·孔克曼;B·S·米勒;C·弗勒门 | 申请（专利权）人： | 丹尼斯科美国公司 |
| 主分类号： | C12N9/44 | 分类号： | C12N9/44;C12N15/56;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/10;C12R1/07 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所11247 | 代理人： | 凌立,黄革生 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 暂无信息 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及酶促肽支链淀粉酶的新型变体，编码所述新型肽的基因序列，包括那些基因序列的表达载体以及表达新型支链淀粉酶变体的生物。本发明的新型支链淀粉酶变体通过使用密码子优化方法，选择性截短“野生型”分子以及通过置换所选择的氨基酸残基而被经验性地制造。而且，本发明涉及这些新型支链淀粉酶肽在纺织、发酵、食品和其它工业中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 具有 增加 淀粉酶 变体 | ||
【主权项】：
一种组合物，其包括分离的肽分子，所述分离的肽分子为SEQ ID NO:4，其中所述分离的肽分子具有支链淀粉酶活性。
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- 张爱联;罗进贤;张添元;刘振旺;易国辉;陈丽萍 - 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
- 2012-05-02 - 2012-10-10 - C12N9/44
- 本发明公开了一种生产重组混合异淀粉酶的方法。属生物技术领域。首先分别克隆解淀粉假单胞杆菌和软腐细菌的异淀粉酶基因；构建含解淀粉假单胞杆菌的异淀粉酶基因表达框架和软腐细菌的异淀粉酶基因表达框架的毕赤酵母表达载体，并将其表达载体转化毕赤酵母，筛选高表达以上所述的两种异淀粉酶的重组子作为工程菌；发酵毕赤酵母工程菌生产重组混合异淀粉酶。与传统的由单基因编码的异淀粉酶不同，本发明生产的重组混合异淀粉酶出现酶反应的两个最适温度和pH，理化特性高，适合于多种用途；由于实现两个酶基因同时在其毕赤酵母中表达，使其异淀粉酶产量显著提高，起到降低生产成本的作用。
- 一种应用自诱导培养基和双温度调控策略生产胞外普鲁兰酶的方法-201210187066.7
- 聂尧;徐岩;陈文波 - 江南大学
- 2012-06-08 - 2012-09-19 - C12N9/44
- 一种应用自诱导培养基和双温度调控策略生产胞外普鲁兰酶的方法，属于微生物发酵生产普鲁兰酶的技术领域。本发明将黑座克雷伯氏菌（Klebsiellavariicola）CCTCC NO：M2012108普鲁兰酶编码基因插入表达载体pET28a(+)中构建重组质粒，并转化大肠杆菌获得含有目的普鲁兰酶基因的重组菌株E.coliBL21(DE3)/pET28a(+)-pulA。利用自诱导培养基，并采用先37℃培养2~4小时后25℃继续培养48~72小时的双温度调控方式，将重组大肠杆菌E.coliBL21(DE3)/pET28a(+)-pulA进行培养和发酵产酶。采用优化后的自诱导培养基和双温度发酵条件后，胞外普鲁兰酶酶活可以达到60~70U/mL。本发明为重组大肠杆菌生产胞外普鲁兰酶提供了有效策略，对于今后开发新型重组普鲁兰酶的生产工艺和应用价值具有重要意义。
- 一种通过促进活性蛋白聚集体解聚提高淀粉脱支酶产量的方法-201210035298.0
- 吴敬;陈晟;段绪果;陈坚 - 江南大学
- 2012-02-16 - 2012-07-04 - C12N9/44
- 本发明公开了一种通过促进活性蛋白聚集体解聚提高淀粉脱支酶产量的方法，属于发酵工程技术领域。本发明以重组大肠杆菌pulB/pET20b(+)/BL21(DE3)为生产菌株，在工业级发酵培养基中连续流加甘油进行分批补料发酵，发酵后期通过添加Tween 80来促进活性蛋白聚集体解聚提高酶的分泌，发酵35小时，胞外酶活可达386U/mL。采取本策略进行发酵实现了酶的高效胞外表达，大幅提高了生产强度。由于酶分泌到培养基中，菌体经过简单的过滤就可得到酶液，工艺简单易行，减少了后续提取成本，适合工业化生产。
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