[发明专利]用于DNA断裂和标记的固定化的转座酶复合体有效
申请号: | 201310459721.4 | 申请日: | 2013-09-30 |
公开(公告)号: | CN103710323B | 公开(公告)日: | 2019-06-14 |
发明(设计)人: | A.S.贝尔耶夫 | 申请(专利权)人: | 安捷伦科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/10;C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人: | 封新琴 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 本发明提供了用于制备高度适用于断裂DNA的纯化的转座酶复合体的简单和迅速的方法。所述方法包括在细胞裂解物中形成转座酶与寡核苷酸衔接子的复合体,然后从所述细胞裂解物中的其它物质中将该复合体纯化出来。纯化使用特异性结合对完成,其中所述对的一个成员结合于复合物的寡核苷酸衔接子,而所述对的另一个成员结合于固体基质。结合的复合体可以立即在DNA断裂反应中使用以产生结合于固体基质的DNA片段,后者可以用于任意目的,包括用作扩增和测序的模板。 | ||
搜索关键词: | 用于 dna 断裂 标记 固定 转座酶 复合体 | ||
【主权项】:
1.一种结合固体基质的哈氏弧菌(Vibrio harveyi)转座酶复合体,所述复合体包含:包含至少一个哈氏弧菌转座酶的转座酶组分;包含至少一个寡核苷酸衔接子的寡核苷酸衔接子组分,其中每个衔接子包含至少一个双链部分,该双链部分含有所述复合体的转座酶的识别序列,并且其中每个复合体的所述衔接子中的至少一个结合有特异性结合对的成员;包含特异性结合对的接头组分,该特异性结合对的一个成员结合于衔接子,且该特异性结合对的另一个成员结合于固体基质;以及固体基质,其中当所述复合体包含一个转座酶时,其与一个衔接子结合;而当所述复合体包含多于一个转座酶时,至少两个衔接子结合于这些转座酶。
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