[发明专利]一种生产瑞替普酶的发酵培养基及其制备方法有效
申请号: | 201310323514.6 | 申请日: | 2013-07-30 |
公开(公告)号: | CN104342421B | 公开(公告)日: | 2017-04-12 |
发明(设计)人: | 窦啟玲 | 申请(专利权)人: | 贵州益佰制药股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/48 | 分类号: | C12N9/48;C12R1/19 |
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地址: | 550008 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明涉及一种用于生产瑞替普酶的发酵培养基及其制备方法,所述发酵培养基主要由KH2PO4、K2HPO4 ·2H2O、(NH4)2SO4、FeSO4·7H 2O、CaCl2·2H2O、CoCl2·6H2O、CuSO4·5H2O、MnSO4·H2O、Na2MoO4·2H2O、20%酪蛋白、MgSO4、50mg/ml卡那霉素、葡萄糖、柠檬酸、消泡剂、酵母提取物和H2O组成,按照各组培养液组成要求在蒸馏水中溶解并用氢氧化钠调节pH值,最后在发酵罐中灭菌即得。本发明采用的发酵培养基减轻了现有工艺发酵中对菌体生长和蛋白表达的抑制作用,使瑞替普酶大肠杆菌表达水平高,稳定性好,提高了瑞替普酶的产率。 | ||
搜索关键词: | 一种 生产 瑞替普酶 发酵 培养基 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种用于生产瑞替普酶的发酵培养基,其特征在于,由KH2PO4、K2HPO4·2H2O、(NH4)2SO4、FeSO4·7H2O、CaCl2·2H2O、CoCl2·6H2O、CuSO4·5H2O、MnSO4·H2O、Na2MoO4·2H2O、20%酪蛋白、MgSO4、卡那霉素、葡萄糖、柠檬酸、消泡剂、酵母提取物和H2O组成,其中主要组成为:A液:每升H2O中含KH2PO4 25‑40g、K2HPO4·2H2O 57.5‑80g、(NH4)2SO4 17.5‑25.8g、FeSO4·7H2O 0.008‑0.015g;B液:每升H2O中含CaCl2·2H2O 0.8‑1.6g、CoCl2·6H2O 1.60‑2.93g、CuSO4·5H2O 1.5‑2.5g、FeSO4·7H2O 1.80‑2.87g、MnSO4·H2O 1.0‑1.93g、Na2MoO4·2H2O1.60‑2.67g;C液:每升H2O中含20%酪蛋白25.0‑42.0ml、1M MgSO4 16.0‑37.0ml、50mg/ml卡那霉素10.0‑23.5ml、70%葡萄糖772.5‑867.5ml、40%(NH4)2SO4 80‑120ml、5%柠檬酸1.5‑5.0ml;酵母提取物:酵母提取物浓度为12%‑18%;消泡剂:每升H2O中含消泡剂为0.3‑0.7ml;培养基配制:发酵罐中添加纯化水8L、消泡剂5ml和1200mlA液、150mlB液,121℃下灭菌20分钟,冷却至30℃时,再加入,酵母提取物500ml和C液600ml,混匀,即得。
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