[发明专利]蜂王浆主蛋白MRJP1特异性抗体及其制备方法与Elisa定量检测

摘要

本发明公开了一种蜂王浆主蛋白MRJP1特异性抗体及其制备方法与Elisa定量检测。首先对意大利蜜蜂（Apismellifera）蜂王浆主蛋白MRJPs家族所有成员（MRJP1-MRJP9）的蛋白质氨基酸序列作同源性分析，选定MRJP1不同于其它MRJPs家族成员的特异性多肽的氨基酸序列。采用化学法合成相关特异性多肽，作为抗原，免疫新西兰白兔、取血清，Elisa检测得到效价较高的多克隆抗体R2，再用合成的MRJP1多肽制备的亲和柱纯化该抗体。以MRJP1为抗原Elisa法检测抗体R2的效价，该抗体的效价>1:20000。本发明为蜂王浆中MRJP1的定性定量检测提供了一种非常可靠的快速检测新方法，也为蜂产品质量监管部门、加工贸易企业蜂王浆、蜂蜜产品质量控制，新鲜度检测、真假产品鉴别提供了非常可靠的技术手段。

主权项

一种蜂王浆主蛋白MRJP1特异性抗体的制备方法，其特征在于，采用以下步骤制备：1）从国际GenBank检索并下载蜂王浆主蛋白MRJPs家族全部9个成员MRJP1‑MRJP9基因所编码的氨基酸序列，采用生物信息学分析软件作同源性分析，选出MRJP1特有的多肽，所述的MRJP1特有的多肽与其他8个MRJPs成员共享的连续的同源氨基酸残基数量不超过3个；2）用化学法合成所述的MRJP1特有的多肽；3）用所述的MRJP1特有的多肽免疫新西兰白兔，从新西兰白兔采集血清，获得MRJP1特异性多克隆抗体，纯化后冻存。