[发明专利]泛素结合结构域融合蛋白在泛素化蛋白质的检测和分离中的应用无效
申请号: | 201210533058.3 | 申请日: | 2012-12-12 |
公开(公告)号: | CN103059141A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 林琼 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N9/10;C12N9/38;G01N33/68 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 212013 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用泛素结合结构域(Ubiquitin-bindingdomain,UBD)融合蛋白分离和检测泛素化蛋白的方法。其原理是用一个亲和标签与一个泛素结合结构域构建一个融合蛋白。该融合蛋白可在大肠杆菌中表达并通过其亲和标签的配体进行纯化及固定在凝胶颗粒上。带有泛素结合结构域融合蛋白的凝胶颗粒与细胞或组织的裂解液共育,可将裂解液中的泛素化蛋白通过沉淀分离出来。本发明在检测泛素化蛋白上比目前的抗体免疫沉淀检测法具有更高的效率,检测容量和灵敏度。此外,从经济效益角度相比,本发明检测泛素化蛋白的费用远低于昂贵的抗体免疫沉淀法;可应用于蛋白泛素化的基础研究及医疗诊断化验中的泛素化蛋白的测定。 | ||
搜索关键词: | 结合 结构 融合 蛋白 泛素化 蛋白质 检测 分离 中的 应用 | ||
【主权项】:
一种用于泛素化蛋白质的检测和分离的泛素结合域融合蛋白,其特征在于,该泛素结合域融合蛋白由亲和标签、泛素结合结构域构成;或者是由亲和标签、泛素结合结构域和它们之间的链接构成。
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