[发明专利]一种制备胰岛素分泌细胞的方法及其专用培养基组合物

摘要

本发明公开了一种将间充质干细胞诱导为胰岛素分泌细胞的培养基组合物，由培养基A、B和C组成；培养基A的溶质及其浓度如下：4.75-5.25ml/L胎牛血清和4.75-5.25ng/mL activin A；培养基B的溶质及其浓度如下：0.95×10-5-1.05×10-5mol/L维甲酸、19-21ng/ml EGF、19-21ng/ml bFGF、1.9-2.1mmol/L谷氨酰胺、0.95-1.05％非必需氨基酸和1.9-2.1％B27；培养基C的溶质及其浓度如下：4.5-5.5ml/L胎牛血清、19-21ng/ml exendin-4、9.5-10.5ng/ml activin A、9.5-10.5mmol/L尼克酰胺、1.9-2.1％B27和0.95-1.05％N2。本发明的诱导培养方法，适合于各种组织来源的间充质干细胞，该诱导培养方法无病毒导入、易操作、效率高。

主权项

将间充质干细胞诱导为胰岛素分泌细胞的培养基组合物，由培养基A、培养基B和培养基C组成；所述培养基A由动物细胞基础培养基和溶质组成；所述溶质及其在所述培养基A中的浓度如下：4.75ml/L‑5.25ml/L胎牛血清和4.75ng/mL‑5.25ng/mL activin A；所述培养基B由动物细胞基础培养基和溶质组成；所述溶质及其在所述培养基B中的浓度如下：0.95×10‑5mol/L‑1.05×10‑5mol/L维甲酸、19ng/ml‑21ng/ml EGF、19ng/ml‑21ng/ml bFGF、1.9mmol/L‑2.1mmol/L谷氨酰胺、体积浓度为0.95％‑1.05％的非必需氨基酸和体积浓度为1.9％‑2.1％的B27；所述培养基C由动物细胞基础培养基和溶质组成；所述溶质及其在所述培养基C中的浓度如下：4.5ml/L‑5.5ml/L胎牛血清、19ng/ml‑21ng/ml exendin‑4、9.5ng/ml‑10.5ng/ml activin A、9.5mmol/L‑10.5mmol/L尼克酰胺、体积浓度为1.9％‑2.1％的B27和体积浓度为0.95％‑1.05％的N2。