[发明专利]重组人寡腺苷酸合成酶-1的制备方法有效
申请号: | 201110337751.9 | 申请日: | 2011-10-31 |
公开(公告)号: | CN102358897A | 公开(公告)日: | 2012-02-22 |
发明(设计)人: | 周敏毅;李孜;徐晨;刘金毅;程永庆 | 申请(专利权)人: | 北京三元基因工程有限公司;北京毕艾欧科技发展有限责任公司 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/63;C12N15/54 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 102600 北京市大兴区北臧村镇北京生物*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明属于生物医药领域,涉及重组人寡腺苷酸合成酶-1(OAS1)的制备方法,依次包括步骤:1)化学合成OAS1蛋白基因表达序列;2)构建表达OAS1蛋白的重组工程菌;3)发酵培养产生包涵体形式表达的OAS1;4)获得包涵体并对其依次用含从低到高浓度的1-8mol/L的尿素的溶液进行洗涤,含每种浓度的尿素的溶液洗涤1次,共洗涤2-4次后用含6-8mol/L盐酸胍与同下步阳离子交换层析相同缓冲溶液体系的溶液进行变性处理;5)变性液上阳离子交换层析柱进行纯化处理,洗脱后得到纯度在95%以上的OAS1变性蛋白。采用该方法可在不添加有利于纯化的标签的情况下通过一步纯化原核表达系统表达的OAS1蛋白,使其纯度达到95%以上,更好的符合免疫与筛选抗体的需要。 | ||
搜索关键词: | 重组 腺苷酸 合成 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种OAS1蛋白的制备方法,其特征是依次包括如下步骤:1)化学合成OAS1蛋白基因表达序列;2)用适宜的表达载体和上述OAS1蛋白表达基因序列构建重组表达载体,并将重组表达载体通过适宜的手段转入基因工程工程菌构建表达OAS1蛋白的重组工程菌;3)发酵培养上述重组工程菌,通过适宜的方式产生包涵体形式表达的OAS1;4)对发酵培养收获的工程菌进行破碎处理后获得包涵体,对包涵体依次用含从低到高浓度的1‑8mol/L的尿素的溶液进行洗涤,含每种浓度的尿素的溶液洗涤1次,共洗涤2‑4次后用含6‑8mol/L盐酸胍与同下步阳离子交换层析相同缓冲溶液体系的溶液进行变性处理;5)变性液上阳离子交换层析柱进行纯化处理,洗脱后得到纯度在95%以上的OAS1变性蛋白。
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- 一种人的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4突变蛋白及其应用-201711224595.9
- 张耀洲;吴玉乾;冯建华;李冬梅;张树军;胖铁良;陈玉皎;王文雅 - 天津市湖滨盘古基因科学发展有限公司
- 2017-11-29 - 2019-06-04 - C12N9/12
- 本发明涉及一种人的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4突变蛋白及其应用,通过将大量癌症患者作为研究病例,对病例进行基因检测并进行分析,确定出人的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4的突变蛋白,根据该人的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒,为癌症的基因诊断提供的指引作用,实现癌症的早诊断、早发现和相关治疗。
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