[发明专利]布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶活性蛋白的制备方法无效
| 申请号： | 200910048246.5 | 申请日： | 2009-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN101935638A | 公开（公告）日： | 2011-01-05 |
| 发明（设计）人： | 李大伟;姚璎;周虎臣 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王锡麟;王桂忠 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种生物技术领域的布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶活性蛋白的制备方法，步骤包括：设计特异引物，扩增布氏锥虫全基因组；切胶回收，得到布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶基因；将步骤二得到的基因连接到克隆载体中，构建基因克隆质粒；将克隆质粒亚克隆进表达载体，鉴定，转化大肠杆菌，培养转化的大肠杆菌单克隆，诱导；纯化表达的融合蛋白，得到布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶活性蛋白。本发明所得的亮氨酰tRNA合成酶可以作为药物筛选的靶标，广泛的应用于药物筛选领域。 | ||
| 搜索关键词： | 布氏锥虫亮氨酰 trna 合成 活性 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶活性蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，设计特异引物，扩增布氏锥虫全基因组；步骤二，切胶回收，得到布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶基因；步骤三，将步骤二得到的基因连接到克隆载体中，构建基因克隆质粒；步骤四，将克隆质粒亚克隆进表达载体，鉴定，转化大肠杆菌，培养转化的大肠杆菌单克隆，诱导；步骤五，纯化表达的融合蛋白，得到布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶活性蛋白。
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