[发明专利]以蛋白中色氨酸残基为Forster共振能量转移供体的均相亲和分析方法无效

专利信息
申请号: 200810237000.8 申请日: 2008-12-30
公开(公告)号: CN101452002A 公开(公告)日: 2009-06-10
发明(设计)人: 廖飞;邓萍;谢燕玲;杨晓兰;赵运胜;朱莎;廖娟;刘冬;于明安 申请(专利权)人: 重庆医科大学
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N21/76
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 400016重*** 国省代码: 重庆;85
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摘要: 发明以蛋白质中色氨酸残基为内在Forster共振能量转移供体并设计特异性分析探针为Forster共振能量转移接受体,从而建立均相荧光亲和分析方法;所用分析探针带萘胺类荧光团,可检测探针与蛋白复合物中色氨酸残基在340nm附近荧光经共振能量转移被猝灭下降或探针经共振能量转移激发而使探针特有荧光升高;测定经过共振能量转移激发产生的探针特有荧光可高灵敏度非竞争性测定蛋白含量;通过候选配体竞争结合,测定共振能量转移产生的探针特有荧光或蛋白自身340nm荧光的变化,可测定非荧光候选配体竞争结合的半有效浓度,考虑分析探针与靶蛋白浓度相当的情况可推算候选配体的解离常数;当分析探针的亲和力比待测配体的亲和力低得多时,通过竞争结合还可以测定高亲和力配体的含量;此技术可用于实验诊断和配体类药物筛选。
搜索关键词: 蛋白 色氨酸 残基 forster 共振 能量 转移 供体 均相 亲和 分析 方法
【主权项】:
1、一种基于蛋白与荧光标记的小分子配体(或半抗原)为探针所形成的复合物中色氨酸残基与配体探针发生Forster共振能量转移,引起结合反应体系的蛋白质自身荧光信号下降而荧光标记配体探针的特有荧光信号升高的均相荧光亲和分析方法,可用于测定混合物中蛋白含量、高亲和力配体(半抗原)含量及配体与该蛋白的亲和力。
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