[发明专利]一种Exiguobacterium sp. MY02菌株的嘧啶核苷磷酸化酶基因及其制备方法无效
| 申请号： | 200510021829.0 | 申请日： | 2005-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN1800409A | 公开（公告）日： | 2006-07-12 |
| 发明（设计）人： | 阮期平;韩文君;古静燕;赵丽 | 申请（专利权）人： | 绵阳师范学院 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12N15/11;C07H21/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 621000四川省绵阳市游仙区仙人路一*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 一种嘧啶核苷磷酸化酶的结构基因，其特征在于它是编码Exiguobacterium sp.MY02菌株的嘧啶核苷磷酸化酶的结构基因。制备该基因时，首先使用PCR法筛选Exiguobacterium sp.MY02菌株的基因组DNA文库并测序，初步确定嘧啶核苷磷酸化酶的基因序列；进一步在大肠杆菌中重组表达该基因、纯化重组酶并测定活性，结果表明所发明的嘧啶核苷磷酸化酶基因能编码生产重组嘧啶核苷磷酸化酶，且重组酶不仅具有磷酸化活性还具有较高转移酶活性，具有工业应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 exiguobacterium sp my02 菌株 嘧啶 核苷 磷酸化酶 基因 及其 制备 | ||
【主权项】：
1、一种嘧啶核苷磷酸化酶基因，其特征在于它是Exiguobacterium sp.MY02菌株嘧啶核苷磷酸化酶的结构基因，核苷酸序列为：1 atgcgtatgg tagatttgat tgcaacaaaa cgagacggtg gcgaactcgc aacagctgat 6061 attcaagcaa tggtagaagg attcacgaat ggtgagattc cagattacca aatgtcagcg 120121 atgtcgatgg cgattttcta tcaaggaatg tcagatcgtg aaatcgctga tttgacgatg 180181 gcgatggtca actcgggcga cgtgatcgac ctttcacgta tccacggtaa aaaagtcgat 240241 aaacgctcga caggcggtgt tggtgacaag atcagtctga tcgtcgcacc gctcgttgcg 300301 tcaatcggca ttccggttgc gaagatgagc ggtcgtggac tcggtcatac aggtggaacc 360361 atcgacaaac tcgaagcgtt ccctggtttt gacgtcgagc tttctgaaga agcgttcgtc 420421 tcacaagtca acgacatcaa gatggcgatc atcggtcaaa cgggtaacct gacgcctgca 480481 gacaaaaaac tctacgcatt acgtgacgtc acggcgacgg tcaactcgat cccattgatc 540541 gcaagttcaa tcatgtcgaa aaaaatcgca gcaggagcag acagcatcgt actcgacgtc 600601 aagacaggtt ctggtgcctt catgaaatcg tttgaagatg caaaagcact cgcgacagag 660661 atggtttcaa tcggtaagag tgtcaaccgt aagacggttg ctatcattac agacatggat 720721 cagccgctcg gctttgaaat cggaaacgca aacgaagtca aggaagcgat cgaagtcctt 780781 caagggaaag atgtccgtga cttgaaagtc atcgccttga cgattgcatc acacatggcg 840841 gtcctcggtg atttctaccc gacattcgac gaagcatatg cggatctcga aacacgtctc 900901 ggtaacggag cagcacttga cgtcttcaag aagttcatcg cagcgcaagg tggcgacgcg 960961 tcactcgttg acgatatgac aaaagcactt gaaacgaaat acgaaaaaac attcgtcgct 10201021 tcaaaagcag gttatgtctc tgaaatcatc gctgacgaag tcggtgttgc agcaatgatc 10801081 ctcggtgcag gacgcgtgac gaaagcagat gagatcgatc acgcagcaag cgttacgctg 11401141 cacaagaaag tcggcgatcg tgtcgaagtc ggtgatgtca tcgcaacact tcgttcaaac 12001201 aaagatacac tcgatcaagc aatcgaaaaa atggatcacg cgtaccacat cagtgaaacg 12601261 aaaccggaag cacgtccgct cgtccacgct gtcattcaat aa 1302Exiguobacterium sp.MY02菌株的“嘧啶核苷磷酸化酶基因”总长1302bp，根据原核生物的基因特征进行判断，前3个字符“atg”是该基因的起始密码子，根据三联体密码规则依次计算，最后3个字符“taa”是该基因的终止密码子。
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- 本发明涉及不依赖于模板的核酸合成方法，所述方法包括在存在古细菌DNA引物酶或其功能活性片段和/或变体的情况下，使包含具有游离3’‑羟基的3’‑末端核苷酸的起始序列与至少一种核苷三磷酸或核苷三磷酸的组合反复接触，从而使所述核苷三磷酸共价结合至所述3’‑末端核苷酸的游离3’‑羟基。本发明还涉及古细菌DNA引物酶的分离的功能活性片段，这些片段能够具有不依赖于模板的末端核苷酸转移酶活性，但不具备不依赖于模板的引物酶活性。
- 产生经扩增的双链脱氧核糖核酸的方法以及用于所述方法的组合物和试剂盒-201780061724.9
- 当利和夫;马格诺利娅·博斯蒂克;安德鲁·法默 - 宝生物工程（美国）有限公司
- 2017-11-08 - 2023-05-23 - C12P19/34
- 提供从核酸样品产生经扩增的双链脱氧核糖核酸(dsDNA)的方法。所述方法的各个方面包括使用单一产物核酸引物和模板转换寡核苷酸进行扩增以产生经扩增的dsDNA产物。也提供用于执行所述方法的组合物和试剂盒。
- 用于基因片段连接的应用方法和试剂盒-202111359063.2
- 李敏 - 北京光华生明生物科技有限公司
- 2021-11-16 - 2023-05-19 - C12P19/34
- 本发明属于生物酶应用技术领域，具体涉及用于基因片段连接的蛋白酶的核酸序列。本发明还涉及用于基因片段连接的方法，所述方法包括用于基因片段连接的蛋白酶的核酸序列。本发明还涉及用于基因片段连接的试剂盒，所述试剂盒包括用于基因片段连接的蛋白酶的核酸序列。本发明还涉及针对用于基因片段连接的蛋白酶在对具有不同序列特征，不同片段大小以及不同片段数量的基因片段进行连接的过程中的应用。使用本发明的用于基因片段连接的方法和试剂盒，能够特异、高效、快速，较准确地进行microRNA基因片段，高GC含量的基因片段以及多个长基因片段的连接及基因克隆。
- 专利分类
