[发明专利]人内皮生长因子受体2蛋白全人单克隆抗体及其制备方法无效
| 申请号： | 02139322.2 | 申请日： | 2002-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN1396182A | 公开（公告）日： | 2003-02-12 |
| 发明（设计）人： | 刘镭;李军;王太重 | 申请（专利权）人： | 陕西超英生物医学研究开发有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/22 | 分类号： | C07K16/22;C12P21/08 |
| 代理公司： | 西安新思维专利事务所有限公司 | 代理人： | 黄秦芳 |
| 地址： | 710061 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种人内皮生长因子受体2蛋白全人单克隆抗体及其制备方法。本发明利用HER2/neu胞外段的全人单克隆抗体，从根本上解决鼠源单抗的HAMA问题，提高治疗效果。制备过程包括四个步骤①培育HER2致敏人B细胞；②融合HER2致敏人B细胞与人骨瘤细胞(Karpas707H)；③抗HER2胞外段单克隆抗体的筛选；④抗HER2胞外段单克隆抗体的扩增。其特性是抗原表位为HER2/neu胞外段多肽，可特异地与HER2/neu胞外段结合；指导合成的全部基因序列均来源于人的B淋巴细胞和人骨髓瘤细胞；它与HER2/neu胞外段结合的解离系数等于或低于10－8M；它与鼠HER2/neu胞外段有交叉反应。 | ||
| 搜索关键词： | 内皮 生长因子 受体 蛋白 全人 单克隆抗体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种人内皮生长因子受体2蛋白全人单克隆抗体，其特征在于：它由下述制备方法制得，依次包括以下步骤，①培育HER2致敏人B细胞；②HER2致敏的人B细胞与人骨瘤细胞融合，具体操作过程如下：首先将用于融合的1～2×106Karpas707H与步骤①所得到的3～7×106致敏人B细胞混合，在2分钟内逐滴加入1～2ml新鲜配制的PEG-2000；然后快速滴入RPMI164050～60ml，200×g离心5分钟，弃上清，重复加入RPMI164050～60ml洗涤；最后将融合细胞调制成1～2×106/ml，预培养细胞，向细胞培养板中每孔加入常规量，HATRPMI1640培养12～15天，转HTRPMI1640培养7～12天；③抗HER2胞外段单克隆抗体的筛选；④抗HER2胞外段单克隆抗体的扩增。
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