本发明公开了一种检测AcVA、AcVB、CMV和AcCRaV四种猕猴桃病毒的引物和试剂盒。引物包括配合使用的体系Ⅰ和体系Ⅱ;体系Ⅰ和体系Ⅱ中至少一组体系包括如SEQ ID NO.1~2和SEQ ID NO.3~4所示的引物;同时,体系Ⅰ和体系Ⅱ分别包括如SEQ ID NO.5~6或SEQ ID NO.7~8所示的引物,且体系Ⅰ和体系Ⅱ含有的引物不同。本发明通过设计两组引物体系,通过一批次的检测就能够有效的将AcVA、AcVB、CMV和AcCRaV四种猕猴桃病毒完全的检测出来,同时还能够避免引物之间的相互干扰。