本发明公开了一种一种参与二萜生物合成调控的丹参ERF‑Ⅶ转录因子SmERF73及其应用。本发明保护氨基酸序列为SEQ ID No.2的蛋白质及其编码基因。本发明还保护所述蛋白质作为转录因子及其在丹参酮产量提高中的应用。本发明对于丹参酮产量的提高具有重要的理论意义,并为药用植物次生代谢物生物合成调控的分子机制提供理论和技术支撑。
本发明公开了高卢蜜环菌的PCR‑RFLP鉴别方法。本发明提供了用于鉴定或辅助鉴定待测蜜环菌为A型蜜环菌还是B型蜜环菌的引物对,是通过包括如下步骤的方法设计得到的:将SEQ ID No.5与SEQ ID No.6进行序列比对,得到DNA比对序列矩阵;然后根据所述DNA比对序列矩阵中第550位核苷酸之前的保守区域设计上游引物,根据所述DNA比对序列矩阵中第555位核苷酸之后的保守区域设计下游引物;所述上游引物和所述下游引物组成所述引物对。本发明方法可以有效鉴别A型蜜环菌和B型蜜环菌。本发明为市售菌株鉴别提供一种快速、客观的检测方法,为栽培生产中高卢蜜环菌的高效利用奠定基础。
本发明公开了Diels‑Alder型加合物合成代谢途径中的FAD依赖氧化酶Ma‑2及应用。本发明提供了如下蛋白:SEQ ID No.4所示Ma‑2蛋白或其经一个或几个氨基酸残基取代和/或缺失和/或添加,或序列具99%、95%、90%、85%或者80%以上同源性且具相同功能的蛋白,或N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。本发明所提供的Ma‑2因具有FAD依赖氧化酶的特征结构域,能催化二烯体与查尔酮类化合物双键间发生[4+2]环化反应形成D‑A型加合物。本发明,对于生产D‑A型加合物及研究酶促D‑A型[4+2]环化反应机制具有重要的理论及实际意义。