本发明公开了一种DNA修复蛋白用于修复CRISPR/Cas9基因编辑相关宿主基因损伤的方法,具体为一种提高DNA修复效率的蛋白、表达质粒、基因编辑质粒在修复基因编辑相关损伤的应用,所述蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,所述基因编辑质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明的结果显示RAD52过表达载体能够显著增加宿主细胞内的RAD52基因在mRNA和蛋白质水平的表达量,本发明提供的蛋白和载体能够修复基因编辑所致损伤,相比于现有的通过抑制Cas9蛋白活性而降低基因编辑的方法,能够修复已经造成DNA损伤;本发明为修复基因编辑相关损伤的提供了一种新方法。
本发明公开了一种有效以反义寡核苷酸为基础的抗登革病毒的核酸靶点及其应用。本发明属于基因工程技术领域,涉及一种有效以反义寡核苷酸为基础的抗登革病毒的核酸靶点及其应用。本发明的反义寡核苷酸是SEQ ID No.1所示单链RNA分子、该单链RNA分子及其修饰物、或其药学上可接受的盐,可直接靶向登革病毒核酸,特异性降解和沉默靶基因,使病毒失去复制能力,具有效率高、特异性强、可编程特点,且不易产生传统抗病毒药物所产生的耐药性,作为一种新的抗病毒药物具有广泛的应用前景。
本发明公开了一种用于检测SARS‑CoV‑2 69‑70del位点的CRISPR‑Cas13a系统。该系统包括RT‑RAA扩增引物、Cas13a蛋白和crRNA;RT‑RAA引物对由SEQ ID NO:7所示的单链DNA分子和SEQ ID NO:8所示的单链DNA分子组成;SARS‑CoV‑2 69‑70del位点的靶点序列位于SARS‑CoV‑2基因组第21753‑21786位,并缺失tacatg 6个碱基;SARS‑CoV‑2 69‑70del位点的crRNA序列如SEQ ID NO:3所示。实验证明,本发明可实现对SARS‑CoV‑2 69‑70del位点核酸的高灵敏、高特异检测,灵敏度达到单拷贝。本发明具有重要的应用价值。