本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种耐热性增强的谷胱甘肽合成酶及应用，所述谷胱甘肽合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，反应体系pH7.0，含有硫酸镁、六偏磷酸钠、甘氨酸及谷氨酸钠、L‑半胱氨酸盐酸盐、AMP钠盐，加入谷胱甘肽合成酶的粗酶液及耐热型多聚磷酸激酶，30～45℃反应。该谷胱甘肽合成酶与野生型谷胱甘肽合成酶相比，可应用于高温催化NADH，表现出更强的热稳定性。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种耐热性增强的NADH焦磷酸酶突变体及应用，该NADH焦磷酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。使用时，取NADH干粉，加入MgCl2、MnCl2和Tris‑HCl，加入NADH焦磷酸酶突变体的粗酶液，30～60℃反应。该NADH焦磷酸酶突变体与野生型NADH焦磷酸酶相比，可应用于高温催化NADH，表现出更强的热稳定性。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种高温高pH条件下制备还原型烟酰胺单核苷酸的工艺，具体为：取NADH干粉，加入MgCl2、MnCl2和Tris‑HCl，pH为7.5～10.0，加入NADH焦磷酸酶突变体的粗酶液，30～60℃反应，所述NADH焦磷酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。采用该NADH焦磷酸酶突变体可应用于高温高pH条件下制备还原型烟酰胺单核苷酸；与野生型NADH焦磷酸酶相比，表现出更强的耐碱性。
本发明涉及酶催化技术领域，尤其是一种谷胱甘肽的制备工艺，其工艺为：反应体系pH7.0～9.5，含有硫酸镁、六偏磷酸钠、甘氨酸及谷氨酸钠、L‑半胱氨酸盐酸盐、AMP钠盐，加入谷胱甘肽合成酶的粗酶液及耐热型多聚磷酸激酶，30～45℃反应；所述谷胱甘肽合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明工艺不使用价格昂贵的乙酰磷酸、ATP等，本发明采用的谷胱甘肽合成酶与野生型谷胱甘肽合成酶相比，酶活高，保证了更高的L‑半胱氨酸转化率。
