本发明涉及抗体技术领域,具体涉及rT3重组单克隆抗体制备方法及应用。本发明利用噬菌体展示技术,筛选获得了本发明所述的rT3重组兔单抗,其重链可变区具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;其轻链可变区具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。该单抗特异性强,检测灵敏度高,解决了rT3在样本中含量低、检测难度大的问题。经鉴定,利用该单抗进行重复多次检测,稳定性良好,准确性高,用于血清中rT3含量的检测,并结合其他甲状腺指标检验和临床表现,能对甲状腺功能亢进和甲状腺功能减退作出诊断,并且在糖尿病、肺部感染、心肌梗死、肝硬化、尿毒症和一些癌症的检测中也具有临床意义。
本发明公开了一种抗Cyfra21‑1的鼠单克隆抗体,所述鼠单克隆抗体分别命名为4C10和6F9,其中鼠单克隆抗体4C10具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的重链可变区和具有SEQ ID NO.4所示氨基酸序列的轻链可变区;鼠单克隆抗体6F9具有SEQ ID NO.3所示氨基酸序列的重链可变区和具有SEQ ID NO.5所示氨基酸序列的轻链可变区。运用本发明制备的鼠单克隆抗体建立双抗夹心法检测Cyfra21‑1的ELISA方法,相对于现有技术,备更高的灵敏度和特异性,与罗氏Cyfra21‑1检测试剂盒相关性更高。