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[发明专利]一种原人参二醇酵母细胞工厂的构建方法及其应用-CN202211048608.2有效
发明人：李检秀;谢能中 -专利权人：广西科学院
申请日： 2022-08-29 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开一种原人参二醇酵母细胞工厂的构建方法及其应用，以酿酒酵母BY4742为出发菌株，通过同源重组的方式，将不同物种来源的3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、法尼基焦磷酸合成酶、角鲨烯合酶、角鲨烯环氧酶、达玛烯二醇合酶、原人参二醇合酶以及提供还原力NADPH的辅酶，整合到BY4742染色体多拷贝位点区，构建得到原人参二醇底盘细胞，然后经过多途径代谢网络优化，促进内质网膜扩增，削弱竞争性代谢途径法尼醇和羊毛甾醇的代谢流。基于上述组合策略构建得到的PPD细胞工厂，摇瓶批次发酵产量达到563.60±1.65mg/L，以葡萄糖、木薯淀粉水解液、甘蔗汁、甘蔗糖蜜为碳源进行5L发酵罐补料发酵，PPD产量最高为23.92±0.96 g/L。
一种人参酵母细胞工厂构建方法及其应用

[发明专利]一株青霉属真菌Penicillium sp. YMS6及其应用-CN202310711611.6在审
发明人：刁梦雪;谢能中;李检秀 -专利权人：广西科学院
申请日： 2023-06-15 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明提供一株青霉属真菌Penicillium sp.YMS6及其应用，该真菌于2023年5月10日在中国典型培养物保藏中心登记保藏，保藏号为CCTCC No：M2023717。该菌株能够同时或单独转化三七皂苷中的二醇型人参皂苷Rb1及三醇型人参皂苷Rg1生成药用价值更高的稀有人参皂苷F2及F1，其为生物发酵制备稀有人参皂苷拓展新的渠道；同时克服了传统物理方法及化学方法反应步骤繁多、副产物较难去除及环境污染等缺点，为获得稀有人参皂苷提供了绿色、高效的途径，具有较高应用价值。
青霉真菌 penicillium sp yms6 及其应用

[发明专利]一种香紫苏内生真菌及其筛选分离与应用-CN202310711614.X在审
发明人：刁梦雪;谢能中;蒙丽钧;李检秀 -专利权人：广西科学院
申请日： 2023-06-15 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明提供一种香紫苏内生真菌及其筛选分离与应用，该菌为分离自香紫苏植物的散囊菌纲曲霉属的内生真菌，分类命名为Aspergillus tubingensis XY17，于2022年11月07日在中国典型培养物保藏中心登记保藏，保藏号为CCTCC No：M20221729。该菌能够转化香紫苏醇产生香紫苏醇的结构类似物，克服了传统化学方法反应步骤繁多、副产物较难去除及环境污染等缺点，可实现规模化生产，具有较高应用价值。
一种紫苏真菌及其筛选分离应用

[发明专利]一组糖基转移酶基因及其在制备三七/人参皂苷中的应用-CN202110285350.7有效
发明人：李检秀;谢能中;李燕婷 -专利权人：广西科学院
申请日： 2021-03-17 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开一组糖基转移酶基因及其在制备三七/人参皂苷中的应用，所述的基因为首次在三七基因组中挖掘得到3个糖基转移酶新基因，分别命名为PnUGT 87、PnUGT 19、PnUGT12，具有如SEQ ID NOs：1、2或3所示的核苷酸序列；同时公开了所述的糖基转移酶基因编码的氨基酸序列，分别如SEQ ID NOs：4、5或6所示。同时本发明还公开了含有上述基因的表达载体，以及由所述表达载体转化的宿主细胞。本发明的糖基转移酶基因弥补了现有人参/三七皂苷生物合成相关的基因的数量较少，绝大部分人参/三七皂苷分子合成机制尚不明确，为人工合成人参/三七皂苷单体提供新基因。
一组糖基转移酶基因及其制备三七人参皂苷中的应用

[发明专利]一种微波辅助杀灭黄曲霉的方法-CN201910493515.2有效
发明人： 谢能中;黄志民;李秉正;陈先锐;黄纪民 -专利权人：广西科学院;广西中科微波先进制造产业技术研究院;南宁市中科微波先进制造产业技术研究院
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2023-06-16 - 主分类号： A23L5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种微波辅助杀灭黄曲霉的方法，对易生长黄曲霉的固体物质采用微波、微电解和臭氧联合处理；所述微电解时间为5~30min；所述臭氧通入量为5~10g/m3；所述微波功率为500~1200W，微波频率为300MHz~2450MHz，温度设置为35~45℃，微波采用间歇处理，工作时间为5~60 s，间隔时间15~60 s，重复微波操作5~10次。本发明的方法能对玉米、小麦、稻谷、甘蔗等农作物和饲料中的黄曲霉及其孢子进行杀灭，黄曲霉的杀灭率为90~97%，从而降低黄曲霉产毒的能力，不产生化学残留，对环境无污染，产品安全性高，在食品、饲料加工等领域具有良好的发展前景。
一种微波辅助杀灭黄曲霉方法

[发明专利]一种高产白藜芦醇的酵母基因工程菌及其构建方法和应用-CN202211201237.7在审
发明人：蒙丽钧;谢能中;王青艳 -专利权人：广西科学院
申请日： 2022-09-29 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明提供一种高产白藜芦醇的酵母基因工程菌及其构建方法和应用，该工程菌通过在酿酒酵母染色体上过表达白藜芦醇合成酶STS、对香豆酰基辅酶A连接酶4CL、苯丙氨酸/酪氨酸氨解酶TAL、肉桂酸‑4‑羟化酶C4H、细胞色素P450酶还原酶CPR、DAHP合成酶突变体ARO4、分支酸变位酶突变体ARO7、分支酸合酶ARO2、莽草酸激酶AroL、乙酰辅酶A合成酶ACS和丙二酰辅酶A合成酶ACC1，同时敲除旁路基因CIT2、LPP1、DPP1、PDC6，实现以葡萄糖为底物生物合成白藜芦醇。本发明利用苯丙氨酸/酪氨酸解氨酶同时以苯丙氨酸和酪氨酸作为底物反应生成白藜芦醇合成的关键前体，强化白藜芦醇合成所需要的前体，使产物白藜芦醇的产量得到了大幅度的提高。
一种高产藜芦酵母基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种生产乙偶姻基因工程菌株及其构建方法与应用-CN202211601379.2在审
发明人： 谢能中;陈先锐;刁梦雪;李检秀;蒙丽钧 -专利权人：广西科学院
申请日： 2022-12-13 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产乙偶姻基因工程菌株及其构建方法与应用，先筛选和鉴定影响大肠杆菌乙偶姻胁迫抗性的功能基因，利用基因组遗传改造手段引入抗逆因子以提高菌株对产物的耐受性，再通过优化重组质粒拷贝数提高乙偶姻合成途径关键基因的表达水平，获得高合成能力和高胁迫抗性的工程菌株；然后采用廉价原料发酵合成乙偶姻，并在适宜条件下高效转化生成四甲基吡嗪；最后使用脱色纯化后的发酵液转化得到了较高纯度的四甲基吡嗪。本发明工艺方法绿色环保，可生成高值化学品（R）‑乙偶姻和四甲基吡嗪，为将来规模化工业生产奠定了重要的理论和技术基础。
一种生产乙偶姻基因工程菌株及其构建方法应用

[发明专利]重组微生物及其用途、生产四甲基吡嗪的方法-CN202110869706.1在审
发明人： 谢能中;陈先锐;李检秀;黄日波 -专利权人：广西科学院
申请日： 2021-07-30 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提出了一种重组微生物，该重组微生物pflB、ahdE、PPS基因被沉默。pflB、ahdE、PPS基因被沉默后，重组微生物生成甲酸、乙醇、甘油途径被抑制，重组微生物(R)‑乙偶姻合成显著增加。
重组微生物及其用途生产甲基方法

[发明专利]一种利用微波对土壤灭菌杀虫的方法-CN201910492758.4有效
发明人： 谢能中;黄志民;陈先锐;黄慨;黄艳燕;李检秀 -专利权人：广西科学院;广西中科微波先进制造产业技术研究院;南宁市中科微波先进制造产业技术研究院
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2021-11-30 - 主分类号： A01M17/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用微波对土壤灭菌杀虫的方法，其包括如下步骤：在所需微波灭菌杀虫区域架设导轨，然后安装微波灭菌杀虫设备，微波灭菌杀虫设备包括微波部和打凿部，打凿部可对土壤进行打孔，然后微波部是微波发射天线进入孔中进行微波灭菌杀虫操作。本发明采用物理方法对土壤进行灭菌杀虫，通过微波灭菌杀虫装置中的打凿部和微波部相配合，使微波发射器能深入土壤中，微波灭菌杀虫效果更佳，可杀灭土壤120‑160cm深处的菌虫，尤其是对三七根腐病病原菌、香蕉枯萎病病原菌、食用真菌病原菌、植物寄生线虫等实现灭杀，是一种方便、快捷、高效和安全灭菌杀虫方法。
一种利用微波土壤灭菌杀虫方法

[发明专利]一种蛋白质热稳定性改造的方法及其在普鲁兰酶中的应用-CN201810204136.2有效
发明人：李检秀;杜奇石;黄日波;谢能中;陈先锐;黄艳燕;王青艳;秦艳 -专利权人：广西科学院
申请日： 2018-03-13 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： C07K1/107 文献下载
摘要：本发明涉及一种蛋白质热稳定性改造的方法及其在普鲁兰酶中的应用，该方法首先建立待改造蛋白质三维模型，用分子动力学模拟计算待改造蛋白质三维模型的分子热运动，根据氨基酸的Cα碳原子的位置偏移值Pi的大小判断待改造蛋白质各部分的热稳定性，确定待改造蛋白质的不稳定结构域，通过定点变异得到待改造蛋白质的突变体，从内部和外部加固不稳定结构域，并选择合适的表达系统进行表达，得到热稳定性改善的蛋白质突变体。野生型脱支普鲁兰酶BDPulA经本发明的方法改造得到热稳定性改善的BDPulA突变体，热处理1 h和2 h后，残余酶活65.54‑88.1%、52.15‑77.27%，分别是野生型脱支普鲁兰酶BDPulA的1.29‑1.75倍、1.14‑1.67倍；其T1/2 2.0‑4.5 h，是野生型脱支普鲁兰酶BDPulA的2.0‑4.5倍。
一种蛋白质热稳定性改造方法及其普鲁兰酶中的应用

[发明专利]一种微波杀灭柑橘木虱的方法-CN201910492759.9有效
发明人：陈先锐;黄志民;黄端权;谢能中 -专利权人：广西科学院;广西贺州市正丰现代农业股份有限公司;广西中科微波先进制造产业技术研究院;南宁市中科微波先进制造产业技术研究院
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： A01M1/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种微波杀灭柑橘木虱的方法，涉及微波应用技术领域。将微波设备在柑橘果园中分网格布置，然后在柑橘果园中由外向内依次自动开启微波设备进行微波发射，微波频率890‑940 MHz或2.4‑2.5 GHz、功率1‑5 KW，每台微波设备的单次微波发射时间为10‑180 s，间歇时间为1‑15 min，并采用微波杀灭聚拢的柑橘木虱和重复微波发射，实现长期杀灭柑橘木虱的效果。本发明杀灭和驱赶柑橘木虱效果显著，可以将果园内柑橘木虱的检出率降低幅度最高达90%以上，极大地限制了木虱传播柑橘黄龙病的能力，能够有效防止黄龙病的传播和蔓延，并且无需使用化学药剂，是一种生态、环保、高效的杀灭木虱方法。
一种微波杀灭柑橘方法

[发明专利]一种基于地面自走轮式机利用微波杀灭柑橘木虱若虫的方法-CN201910492724.5有效
发明人：黄志民;陈先锐;谢能中;黄慨 -专利权人：广西科学院;广西中科微波先进制造产业技术研究院;南宁市中科微波先进制造产业技术研究院
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： A01M1/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于地面自走轮式机利用微波杀灭柑橘木虱若虫的方法，涉及微波应用技术领域。本发明将柑橘木虱阳性率划分为3个等次，分别为＜40%，≥40%且＜80%，≥80%；然后针对不同的木虱阳性率，采取不同的微波杀灭工艺，利用2‑4架次自走轮式机间隔杀灭木虱若虫时，微波功率由最低500‑800 W逐渐增强至最高1800‑2000W，微波频率由最高2.4‑2.5 GHz逐渐降低至890‑940 MHz，经过自走轮式机不同强度和穿透深度的微波处理，通过微波热效应和非热效应将柑橘各部位的木虱若虫杀灭。本发明杀灭柑橘木虱若虫显著，微波处理后木虱检出率降低幅度最高达90%以上，极大降低了果园内柑橘木虱的种群数量，限制了木虱传播柑橘黄龙病的能力，有效防止黄龙病的传播和蔓延，并且无需使用化学药剂，是一种低成本、生态、环保、高效的杀灭木虱若虫方法。
一种基于地面轮式利用微波杀灭柑橘若虫方法

[发明专利]一种超声波驱赶柑橘木虱的方法-CN201910492760.1有效
发明人：黄志民;谢能中;陈先锐;黄慨 -专利权人：广西科学院;广西中科微波先进制造产业技术研究院;南宁市中科微波先进制造产业技术研究院
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2021-05-25 - 主分类号： A01M29/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种超声波驱赶柑橘木虱的方法，涉及超声波应用技术领域。本发明将超声波设备在柑橘果园中分网格布置，然后在柑橘果园中由内向外依次自动开启超声波设备进行超声波发射，每台超声波设备的超声波频率20 KHz‑10 MHz、功率1‑5 KW，单次超声波发射时间为1‑10 min，间歇时间为1‑15 min，并采用超声波阻隔柑橘木虱和重复超声波发射，实现长期驱赶柑橘木虱的效果。本发明驱赶柑橘木虱效果显著，可以将果园内柑橘木虱的检出率降低90%以上，极大地限制了木虱传播柑橘黄龙病的能力，能够有效防止黄龙病的传播和蔓延，并且无需使用化学药剂，是一种生态、环保、高效的驱赶木虱方法。
一种超声波驱赶柑橘方法

[发明专利]一种基于手持式微波装置杀灭柑橘木虱若虫的方法-CN201910493526.0有效
发明人：黄志民;谢能中;陈先锐;黄慨 -专利权人：广西科学院;广西中科微波先进制造产业技术研究院;南宁市中科微波先进制造产业技术研究院
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： A01G13/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于手持式微波装置杀灭柑橘木虱若虫的方法，涉及微波应用技术领域。本发明将柑橘木虱阳性率划分为3个等次，分别为＜40%，≥40%且＜80%，≥80%；然后针对不同的木虱阳性率，采取不同的微波杀灭工艺，采用果园工人2‑4次手持微波装置间隔杀灭木虱若虫时，微波功率由最低300‑400 W逐渐增强至最高900‑1000 W，微波频率由最高2.4 GHz‑2.5 GHz逐渐降低至890 MHz‑940 MHz，经过手持式微波装置不同强度和穿透深度的微波发射，通过微波热效应和非热效应将柑橘各部位的木虱若虫杀灭。本发明杀灭柑橘木虱若虫显著，微波处理后木虱检出率降低幅度最高达90%以上，极大降低了果园内柑橘木虱的种群数量，限制了木虱传播柑橘黄龙病的能力，有效防止黄龙病的传播和蔓延，并且无需使用化学药剂，是一种低成本、生态、环保、高效的杀灭木虱若虫方法。
一种基于手持式微装置杀灭柑橘若虫方法

[发明专利]一种利用微波对柑橘进行脱毒的方法-CN201910492723.0有效
发明人：陈先锐;黄志民;黄端权;谢能中 -专利权人：广西科学院;广西贺州市正丰现代农业股份有限公司;广西中科微波先进制造产业技术研究院;南宁市中科微波先进制造产业技术研究院
申请日： 2019-06-06 - 公布日： 2021-04-02 - 主分类号： A01G13/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用微波对柑橘进行脱毒的方法，涉及微波应用技术领域，其特征在于微波预处理时，微波照射频率为1.0 GHz‑3.0 GHz、功率为100‑900 W，微波照射时间为5‑20 s，然后停顿10‑30 s，重复操作3‑10次，将柑橘各部位温度加热至40‑45℃，并维持恒温30‑60 s；然后调整微波照射频率为350 MHz‑950 MHz、功率为1000‑3000 W，微波照射时间为3‑10 s，然后停顿20‑60 s，重复操作5‑20次，将柑橘各部位温度加热至50‑55℃，并维持恒温1‑5 min，利用微波照射对柑橘脱毒。本发明可以使柑橘各部位较快而均匀地达到韧皮杆菌致死温度，而树体不受影响，并且在微波电磁场的非热效应下，韧皮杆菌内的核酸和蛋白质等分子容易变性失活，达到双重杀菌效果，经微波脱毒后的柑橘采用GB/T 28062‑2011《柑桔黄龙病菌实时荧光PCR检测方法》检测，黄龙病转阴率≥82%，是一种高效、快速和环保的柑橘脱毒方法。
一种利用微波柑橘进行脱毒方法

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