本发明公开了一种马铃薯金线虫RPA‑LFD快速检测方法及应用,属于生物技术领域。本发明公开了马铃薯金线虫RPA‑LFD快速检测引物和探针,其特征在于,所述引物序列为如SEQ ID NO:1所示上游引物序列和SEQ ID NO:2所示下游引物序列,所述探针序列如SEQ ID NO:3所示。利用上述引物和探针构建了RPA‑LFD检测方法,通过对马铃薯金线虫DNA提取,马铃薯金线虫RPA体系等温扩增,采用LFD试纸条可特异快速检测出马铃薯金线虫。本发明的检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便,在马铃薯金线虫快速检疫检测方面具有很高的应用价值。