本发明公开了‘赣彤1号’CcMYB10_LIKE基因及其表达蛋白和应用,属于植物基因工程技术领域。本发明的‘赣彤1号’CcMYB10_LIKE基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。以‘赣彤1号’7个组织为材料,克隆得到‘赣彤1号’CcMYB10_LIKE基因,在此基础上构建其植物表达载体35S::CcMYB10_LIKE,转入‘南林895杨’与拟南芥中,得到转基因植株。转基因杨树植株的新叶的叶柄与叶片交接处呈红色,除PAL外的结构基因均显著上调。转基因拟南芥叶片边缘呈现紫红色,其茎与子叶的连接处呈明显的紫色,所有结构基因均显著上调。
本发明公开了‘赣彤1号’CcMYB4_LIKE基因及其表达蛋白和应用,属于植物基因工程技术领域。本发明的‘赣彤1号’CcMYB4_LIKE基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明以‘赣彤1号’7个组织为材料,通过克隆得到‘赣彤1号’CcMYB4_LIKE基因,在此基础上构建其植物表达载体35S::CcMYB4_LIKE,转入‘南林895杨’与拟南芥中,得到转基因植株。转基因杨树与CK相比,叶片颜色变浅,生长速度加快。转基因‘南林895杨’植株中,4CL和C4H基因表达量上调。转基因拟南芥植株中,CHS、LDOX和DFR基因下调。
本发明公开了‘赣彤1号’CcTT2_LIKE基因及其表达蛋白和应用,属于植物基因工程技术领域。本发明的‘赣彤1号’CcTT2_LIKE基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。以‘赣彤1号’7个组织为材料,克隆得到‘赣彤1号’CcTT2_LIKE基因,在此基础上构建其植物表达载体35S::CcTT2_LIKE,转入‘南林895杨’与拟南芥中,得到转基因植株。转基因杨树植株的新叶的叶柄与叶片交接处呈红色,除PAL外的结构基因均显著上调。转基因拟南芥叶片边缘呈现紫红色,其茎与子叶的连接处呈明显的紫色,所有结构基因均显著上调。
本发明公开了竹柏和长叶竹柏叶绿体基因组PCR扩增引物及其应用,属于分子生物学技术领域。本申请设计了29对特异性竹柏和长叶竹柏叶绿体基因组PCR扩增引物,引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.58所示,产物平均片段约3.7kb,以Sanger测序法进行测序和拼接验证,其结果与通过提取叶绿体DNA进行高通量测序的结果一致,得到竹柏叶绿体基因组序列长度为133724bp,长叶竹柏的叶绿体基因组序列为133777bp。表明本发明引物重复性好,能够特异性的扩增出竹柏与长叶竹柏叶绿体基因组,有利于通过叶绿体基因组研究竹柏与长叶竹柏叶的系统进化、亲本分析、品种鉴定、系统地理学等。
本发明公开了香樟叶绿体全基因组PCR扩增引物及其应用,属于生物科学技术领域。本申请设计了26对特异性樟叶绿体全基因组PCR扩增引物,引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.52所示,将其应用在香樟叶绿体全基因组序列PCR扩增、香樟品种鉴定和樟科叶绿体基因组系统发育研究中,完成了5个香樟不同化学型个体叶绿体基因组的扩增和Sanger测序,并基于贝叶斯法利用19个樟科植物的68个共有叶绿体蛋白编码基因序列构建了系统发育树。本发明引物重复性好,能够特异性的扩增出香樟叶绿体基因组序列,达到快速鉴别的目的,为香樟品种鉴定、亲缘关系分析及遗传进化分析提供了重要的依据。
本发明公开了一种西番莲内参基因及其专用引物和应用,属于植物分子生物学技术领域。本发明提供的西番莲内参基因为EF1基因,其基因序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过西番莲的转录组测序库,挑选了10个候选参考基因,并依此设计了实时荧光定量引物,经过筛选,得到以上所述内参基因,在不同算法和不同样本处理的9种情况中,EF1稳定性在五种条件下稳定性排名第一和第二,其余四种情况下排名第三至第五,稳定性也较好。本发明不仅解决了现有西番莲检测中没有内参基因的现状,而且所设计的实时荧光定量引物用于西番莲组织中基因表达分析时引物特异性强,从提高了实时荧光定量检测西番莲基因时的检测效率和检测结果的可信度。
本发明公开了银杏类黄酮3′,5′‑羟化酶GbF3′5′H1基因及其蛋白和应用,属于基因工程技术领域。该类黄酮3′,5′‑羟化酶GbF3′5′H1基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,该类黄酮3′,5′‑羟化酶GbF3′5′H1的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该类黄酮3′,5′‑羟化酶GbF3′5′H1的基因序列来源于银杏。本发明从银杏中克隆出该类黄酮3′,5′‑羟化酶GbF3′5′H1基因,并对其功能进行了系统鉴定,发现了该基因可以提高植物类黄酮相关代谢物的含量,并且可以在转基因杨树中参与和促进类黄酮相关代谢物的合成。
本发明公开了一种调控柽柳盐耐性的关键基因TcSBP5,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。TcSBP5表达的蛋白产物为柽柳SBP转录因子,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明通过转化拟南芥,得到超表达TcSBP5基因的拟南芥,其种子的耐盐萌发率显著下降,其植株的耐盐性生理指标显著下降,总体表现出生长抑制的典型盐敏感表型,说明了该基因为重要的调控植物耐盐性的关键因子,在林木耐盐性育种领域有重要应用价值。