本发明提供了一种抗REGγ蛋白的重组单克隆抗体,所述抗体包括重链可变区和轻链可变区。所述的重链可变区的核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:3所示,所述的轻链可变区的核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:4所示。本发明将携带重组抗体基因的轻链和重链真核表达质粒共转染到HEK293T细胞,进行表达纯化。用抗REGγC末端区域的单克隆抗体作为对照抗体,利用WesternBlot、细胞免疫荧光、免疫组化技术、ELISA技术对本发明抗体进行性能评价。结果显示本发明重组单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、稳定性强、不依赖动物生产、适合量化生产等优点,为以过表达REGγ蛋白作为疾病的诊断与治疗靶标提供有效的工具。
本发明公开了一种Psme3条件性基因敲除小鼠模型的构建方法及其应用。所述Psme3条件性基因敲除小鼠模型的构建方法,是利用Cas9/RNA system gene targeting技术,将Psme3基因的第3~5外显子敲除,从而实现整个基因失活,获得了Psme3基因条件性敲除小鼠模型。Psme3作为蛋白酶体激活因子,调节20S蛋白酶体的水解活性,而且调控多种肿瘤相关因子降解。本发明构建得到的Psme3基因条件性敲除小鼠模型为进一步研究Psme3基因的生物学功能奠定了基础,可以为Psme3高表达的实体瘤的发生发展中的作用机制提供理想模型。