本发明公开了一种ITS2序列扩增通用引物，其正向引物序列如SEQ ID No.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示；并公开了该ITS2序列扩增通用引物在中药材鉴定中的应用。本发明还公开了一种鉴定中药材的方法及试剂盒。本发明克服了当前采用的ITS2条形码扩增引物ITS2F/ITS3R在通用性上存在的局限性，将引物的通用性提高达20％，在中药材鉴定领域具有重要价值。
本发明公开了一种用于哈蟆油药材DNA条形码鉴定的PCR扩增引物，该引物对的正向引物序列如SEQ ID No.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示。本发明还提供了一种获得哈蟆油药材DNA条形码的扩增方法，采用如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的引物进行PCR扩增，PCR扩增的条件为：94℃变性1分钟；94℃变性1分钟，50℃‑54℃退火1.5分钟，72℃延伸1分钟，35个循环；72℃延伸5分钟。采用本发明的PCR扩增引物及扩增方法，其PCR扩增特异性强，能快速有效的获得哈蟆油药材DNA条形码，使利用DNA条形码技术进行哈蟆油药材及基原动物鉴定成为可能。
