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[发明专利]一种利用对香豆酸合成白藜芦醇工程菌、构建及应用-CN202310691519.8在审
发明人：吴元庆;杨志彬;冯斌;李迪;胡江林 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2023-06-12 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用对香豆酸合成白藜芦醇工程菌、构建及应用，属于生物技术领域。本发明通过表达4‑香豆酰辅酶A连接酶突变体的编码基因和/或白藜芦醇合酶突变体的编码基因以及乙酰辅酶A羧化酶的编码基因和/或乙酰辅酶A合成酶的编码基因，在分别显著提高4‑香豆酰辅酶A连接酶、白藜芦醇合酶的催化活力的基础上，通过乙酰辅酶A、丙二酰辅酶A的增强表达，获得的解脂耶氏酵母工程菌能高效利用对香豆酸生产白藜芦醇，摇瓶发酵产量达到2.4g/L，5L发酵罐中分批补料发酵底物转化率达到96.3％，白藜芦醇产量达到47.8g/L。
一种利用香豆酸合成藜芦工程构建应用

[发明专利]一种生物合成5-羟基β-吲哚基丙氨酸的解脂耶氏酵母工程菌、构建及其应用-CN202310028063.7在审
发明人：吴元庆;杨志斌;廖小龙;展全乐;胡江林 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2023-01-09 - 公布日： 2023-09-15 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的解脂耶氏酵母工程菌、构建及其应用，涉及生物工程技术领域。本发明以解脂耶氏酵母作为出发菌，通过导入外源的色氨酸羟化模块、BH4合成模块和BH4循环再生模块，构建四氢喋呤再生途径和四氢喋呤再生途径，实现5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的生物合成，进一步敲除吲哚胺2，3‑双加氧酶和芳香族氨基酸氨基转移酶I的编码基因，构建了一种生物合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的解脂耶氏酵母工程菌，实现了以色氨酸为底物生物合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸，并使5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的产量得到显著的提升。
一种生物合成羟基吲哚丙氨酸解脂耶氏酵母工程构建及其应用

[发明专利]以β-吲哚基丙氨酸为底物合成5-羟基β-吲哚基丙氨酸的方法及其应用-CN202210457985.5有效
发明人：赵云现;杨志彬;胡江林;崔金旺;赵凯;展全乐 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2022-04-27 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12P13/06 文献下载
摘要：本发明提供了以β‑吲哚基丙氨酸为底物合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的方法及其应用。本发明提供的5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸高产菌株，用于以β‑吲哚基丙氨酸为底物生物法合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的方法，5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的合成产量高。本发明通过对BH4再生系统的构建，新的BH4再生酶的挖掘，加强了工程菌株BH4的再生能力，尤其是双BH4再生系统的同时作用，显著提升了生物合成5‑羟基β‑吲哚基丙氨酸的产量。
吲哚丙氨酸合成羟基方法及其应用

[发明专利]一类基因组上严谨型强表达的脱水四环素启动子表达系统的构建及应用-CN202211449605.X在审
发明人：吴元庆;杨志斌;李迪;胡江林 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2022-11-18 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一类基因组上严谨型强表达的脱水四环素启动子表达系统的构建及应用，属于基因工程领域。本发明构建的严谨型强表达诱导系统是在大肠杆菌基因组上完成，构建的系列脱水四环素启动子表达系统在非诱导条件下渗透表达率极低，诱导条件下表达能力极强。该表达系统适用于有毒产物进行时空生产时使用，在合成生物学生物智造研究中有广泛应用场景。
一类基因组严谨表达脱水四环素启动子系统构建应用

[发明专利]一种以对香豆酸为底物合成白藜芦醇的工程菌株、构建及其应用-CN202310164664.0在审
发明人：吴元庆;杨志彬;冯斌;李迪;胡江林 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2023-02-25 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种以对香豆酸为底物合成白藜芦醇的工程菌株、构建及其应用，属于生物技术领域。本发明对4‑香豆酰辅酶A连接酶和白藜芦醇合酶活性位点进行半理性设计改造，将最优突变体4CL1(M4)和VST1(N3)在解脂耶氏酵母菌株中表达，获得的工程菌株能高效转化对香豆酸为白藜芦醇，摇瓶发酵产量达到724.6mg/L，随后利用刚性连接子将2个突变体融合表达，得到的以对香豆酸为底物生产白藜芦醇的解脂耶氏酵母工程菌，5‑L发酵罐分批补料发酵，底物转化率达到92.3％，白藜芦醇产量达到35.8g/L。
一种香豆酸合成藜芦工程菌株构建及其应用

[发明专利]一种白藜芦醇三甲醚的合成方法-CN202111220743.6有效
发明人：赵云现;杨志彬;崔金旺 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-10-20 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C07C41/16 文献下载
摘要：本发明提供了一种白藜芦醇三甲醚的合成方法，包括以下步骤：A)将白藜芦醇、溶剂和相转移催化剂混合，得到初始混合物；B)将初始混合物与甲基化试剂在碱性环境下，反应，提纯后得到白藜芦醇三甲醚。本申请提供的合成方法以白藜芦醇为起始原料，经一步甲基化反应得到白藜芦醇三甲醚，合成工艺简单，条件温和，收率98.5％以上，质量好，含量大于99.5％。本发明提供合成白藜芦醇三甲醚的方法既节省了成本又易于工业化生产。
一种藜芦甲醚合成方法

[发明专利]一种合成膳食补充剂褪黑素的新方法-CN202110729918.X有效
发明人：赵云现;杨志彬;崔金旺 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-06-29 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C07D209/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种合成膳食补充剂褪黑素的新方法，属于药物化学合成技术领域。该方法以N‑乙酰基血清素为起始原料，经一步甲基化反应得到褪黑素，合成工艺简单，合成工艺条件温和，收率高为98.5％以上，质量好，含量大于99.5％，完全符合USP42标准。本发明提供合成膳食补充剂褪黑素的新方法节省了成本且易于工业化生产。
一种合成膳食补充剂褪黑素新方法

[发明专利]一种N,N-二甲基-5-羟基色胺的制备方法-CN202111334064.1有效
发明人：赵云现;杨志彬;崔金旺 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-11-11 - 公布日： 2023-06-16 - 主分类号： C07D209/16 文献下载
摘要：本发明提供了一种N,N‑二甲基‑5‑羟基色胺的制备方法，以5‑羟色胺盐酸盐为起始原料，在傅‑克催化剂(三氟乙酸锌和氯化锌)作用下与甲醛和氰基硼氢化钠反应，得到N,N‑二甲基‑5‑羟基色胺。本发明提供的方法合成工艺简单，合成条件温和，收率高，为90％以上，质量好，含量大于99.5％。本发明提供的合成N,N‑二甲基‑5‑甲氧基色胺的方法，易于工业化生产。
一种甲基羟基制备方法

[发明专利]一种N-乙酰基-5-甲氧基色胺的合成方法-CN202111202302.3有效
发明人：赵云现;杨志彬;崔金旺 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-10-15 - 公布日： 2023-06-16 - 主分类号： C07D209/16 文献下载
摘要：本发明提供了一种N‑乙酰基‑5‑甲氧基色胺的合成方法，包括以下步骤：在氮气气氛下，将5‑羟基色胺盐酸盐溶液和添加剂混合后滴加乙酰氯，反应结束后中和至pH值为8.5～9，水洗至中性，得到N‑乙酰基‑5‑羟基色胺；向所述N‑乙酰基‑5‑羟基色胺中在pH值为11～11.5条件下，滴加硫酸二甲酯，反应结束后进行后处理，得到N‑乙酰基‑5‑甲氧基色胺。本发明以5‑羟基色胺盐酸盐为原料，经乙酰基化、甲基化反应制得成品褪黑素，避免了因为分步提纯纯化产物造成的浪费，具有合成路线短、合成周期短、原料种类少等特点，所得产品收率高，纯度可满足市场需要。本发明提供的褪黑素的生产方法节省了成本易于工业化生产。
一种乙酰基色合成方法

[发明专利]一种新的色氨酸脱羧酶突变体、重组基因工程菌的构建及其应用-CN202211449607.9在审
发明人：吴元庆;杨志彬;胡江林;冯斌 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2022-11-18 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种新的色氨酸脱羧酶突变体、重组基因工程菌的构建及其应用。通过对色氨酸脱羧酶原始序列进行突变，使得突变后的色氨酸脱羧酶活性提升，其表现为催化色氨酸产色胺、以及催化5‑羟基色氨酸产5‑羟基色胺水平显著提高。本发明还提供了表达色氨酸脱羧酶突变体的表达载体以及大肠杆菌工程菌的构建方法。使用表达色氨酸脱羧酶突变体的工程菌可显著提升催化效率，为色胺及5‑羟基色胺工业化生产奠定基础。
一种色氨酸脱羧酶突变体重组基因工程构建及其应用

[发明专利]一种合成3-甲氧基-18β-甘草次酸的方法-CN202111452581.9有效
发明人：赵云现;崔金旺;杨志彬 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-12-01 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C07J63/00 文献下载
摘要：本发明涉及药物化学技术领域，提出了一种合成3‑甲氧基‑18β‑甘草次酸的方法，以18β‑甘草次酸为原料，以原甲酸三甲酯作为甲基化试剂，高氯酸溶液为催化剂在有机溶剂中经过甲基化反应得到。通过上述技术方案，解决了现有技术中合成工艺流程长、收率低和成本高的问题。
一种合成甲氧基 18 甘草方法

[发明专利]一种合成7，4′-二甲基柚皮素的方法-CN202111331678.4有效
发明人：赵云现;崔金旺;杨志彬 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-11-11 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C07D311/32 文献下载
摘要：本发明涉及生物半合成技术领域，提出了一种合成7，4'‑二甲基柚皮素的方法，包括以下步骤：S1、将柚皮素加入乙醇水溶液中，加入相转移催化剂搅拌；S2、同时添加氢氧化钠溶液和甲基化试剂；S3、滴加完毕后，升温至50～55℃，继续反应；S4、反应完毕后调节pH；S5、进行后处理即得7，4'‑二甲基柚皮素产品。通过上述技术方案，解决了现有技术中的7，4'‑二甲基柚皮素合成工艺复杂、所用化学原料多且危险、收率低和成本高的问题。
一种合成甲基柚皮素方法

[发明专利]一种褪黑素的合成方法-CN202110498061.5有效
发明人：赵云现;杨志彬;崔金旺 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-05-08 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C07D209/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种褪黑素的合成方法，属于药物化学合成技术领域。该方法以5‑羟色胺盐酸盐为原料，通过一锅投料的方法经过羟基的甲基化反应得到5‑甲氧基色胺，再经氨基的乙酰化反应制备得到褪黑素粗品，最后再经过一步精制提纯从而得到成品褪黑素。本发明提供的褪黑素合成方法避免了因为分步提纯纯化产物造成的浪费，具有合成路线短、合成周期短、原料种类少等特点，所得产品收率高，纯度可满足市场需要。本发明提供的褪黑素的合成方法节省了成本且易于工业化生产。
一种褪黑素合成方法

[发明专利]一种合成治疗病毒性药物N,N-二甲基-5-羟基色胺-N12-氧化物的方法-CN202111375754.1有效
发明人：赵云现;崔金旺;杨志彬 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-11-19 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C07D209/16 文献下载
摘要：本发明涉及药物化学合成技术领域，提出了一种合成治疗病毒性药物N,N‑二甲基‑5‑羟基色胺‑N12‑氧化物的方法，包括以下步骤：S1、将N,N‑二甲基‑5‑羟基色胺和相转移催化剂加入到乙醇中搅拌成均一溶液；S2、滴加双氧水乙醇溶液，控制滴加温度0～5℃，滴加完毕后继续反应；S3、后处理。通过上述技术方案，解决了现有技术中的合成工艺复杂、所用化学原料多、收率低和成本高的问题。
一种合成治疗病毒性药物甲基羟基 n12 氧化物方法

[发明专利]一种放射性示踪剂2-碘褪黑素的合成工艺-CN202110790004.4有效
发明人：赵云现;崔金旺;杨志彬 -专利权人： 河北维达康生物科技有限公司
申请日： 2021-07-13 - 公布日： 2022-12-30 - 主分类号： C07D209/30 文献下载
摘要：本发明涉及药物合成技术领域，提出了一种放射性示踪剂2‑碘褪黑素的合成工艺。本发明选用碘化钾和碘单质的混合物为反应过程中的碘化试剂，并选用四丁基溴化铵和氯化亚铜为催化剂，大大提高了反应收率和产物纯度。
一种放射性示踪剂碘褪黑素合成工艺

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