本发明涉及一种羧酯酶及其编码基因，以及由该编码基因构建的基因工程，以及其在微生物催化制备S‑萘普生中的应用。所述羧酯酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因核苷酸核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用该基因构建工程菌进行酶法立体选择性催化生产S‑萘普生，具有时空产率高，效果稳定的特点，在较短时间内可以获得转化效率可达到48%以上，光学纯度可达到99%以上，对实现高产量高纯度的S‑萘普生生产具有重要意义。
本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶突变体、编码基因及应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的野生型蔗糖磷酸化酶第137位精氨酸经单点突变而得。本发明通过在来源于罗氏乳杆菌的野生型蔗糖磷酸化酶的第137位氨基酸残基位点引入点突变，显著提高了其在以蔗糖和甘油为原料生产2‑α‑葡萄糖基甘油的催化活性和糖基化位点的区域选择性，降低了副产物1‑α‑葡萄糖基甘油的合成。该酶突变体LreSP‑R137M在生产2‑α‑葡萄糖基甘油方面具有良好的应用价值。
本发明涉及一种来源于胡椒的2‑链烯还原酶及其编码基因，以及该2‑链烯还原酶在微生物催化制备四氢胡椒碱中的应用。所述胡椒2‑链烯还原酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供了一种可催化制备四氢胡椒的2‑链烯还原酶及其编码基因，利用该酶以胡椒碱为反应底物，可实现四氢胡椒碱的高效制备。
本发明公开了一种姜黄素还原酶CfcurA及其编码基因，以及其在微生物催化制备四氢姜黄素中的应用。所述姜黄素还原酶CfcurA氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示，其编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了一种姜黄素还原酶CfcurA及其编码基因，可用于酶法催化生产四氢姜黄素，该方法转化率较高，选择性较好，可在24h内催化20g/L的姜黄素生成16.4g/L的四氢姜黄素，具有较好应用前景。
本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及编码基因，以及含对硝基苄基酯酶突变体的基因工程菌，及其在酶催化dl‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述对硝基苄基酯酶突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的对硝基苄基酯酶第109位、110位、193位、270位、273位、314位或362位的氨基酸残基进行组合突变获得。本发明的有益效果主要体现在：①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂，酶催化活性维持较高水平；②在无助溶剂体系下，突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。这些突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以20～200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l‑薄荷醇，结果表明产物l‑薄荷醇的eep值99％，底物转化率95％，表现出良好的工业应用性能。
本发明公开了一种l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖基化酶及编码基因，以及含l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖基化酶的基因工程菌，及其在微生物催化制备l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖苷中的应用。所述l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖基化酶氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。本发明所述生产l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖苷的重组大肠杆菌，即重组大肠杆菌(Escherichia coli)E.coli 28a‑sth1275能够在胞内高效合成l‑薄荷醇‑β‑半乳糖基化酶。该重组菌经过发酵，诱导胞内表达l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖基化酶，将发酵液离心获得细胞，再重悬后可直接用于制备l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖苷。以l‑薄荷醇和乳糖为底物，催化合成l‑薄荷醇‑O‑β‑半乳糖苷。
