本发明属于基因工程领域，具体涉及β‑呋喃果糖苷酶突变体及其应用。所述突变体是通过用另一种氨基酸残基取代SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的下述位点的氨基酸残基而获得的β‑呋喃果糖苷酶突变体，所述的氨基酸残基位置为SEQ ID NO：1所示氨基酸序列中的：第218位，和/或第408位，和/或第410位。以上三个位点的单点及联合突变能够增强功能性寡糖的合成能力，催化蔗糖生成β‑2，6糖苷键连接的低聚果糖6F‑FOS的转化率显著提高。其中S218A/H410A为最佳突变体，其催化蔗糖合成低聚果糖的转化率最高可达62％(±5％)，且新生成了蔗果四糖，最高可达60g/L(±5％)。本发明的突变体β‑呋喃果糖苷酶合成新型低聚果糖6F‑FOS的能力比野生型显著提高，是合成β‑2，6型低聚果糖的优良生物催化剂。
本发明公开一种耐有机溶剂半乳糖苷酶高产菌株，一种半乳糖苷酶以及一种以乳糖为供体酶法半乳糖基化核苷类化合物的方法。该菌株分类命名为Lactobacillus casei YZ09，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2014540。本发明分离克隆到该菌株所产耐有机溶剂半乳糖苷酶的基因，它具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。菌株YZ09所产半乳糖苷酶具有溶剂耐受性好、作用pH范围广、底物特异性好等性质。该半乳糖苷酶能廉价易得的乳糖为供体在非水相体系中修饰核苷类药物，具有很好的工业应用价值。
本发明提供一种青霉素酰化酶、编码基因、产生菌株及其应用，属于生物制药技术领域。青霉素酰化酶产生菌，为木糖氧化无色杆菌（Achromobacter xylosoxidans）PX01，保藏登记号为CCTCC NO：M 2015215。所述霉素酰化酶，具有如SEQ ID NO：2所示氨基酸序列或与该序列具有98%以上同源性的氨基酸序列。所述青霉素酰化酶编码基因具有如SEQ ID NO：1所示的序列或与该序列具有90%以上同源性的序列。本发明还要求保护含有所述编码基因的重组载体、表达盒或重组菌以及所述酶在合成β-内酰胺类抗生素中的应用。该青霉素酰化酶具有耐高温、pH稳定性好、有机溶剂耐受性强的优点。
