本发明涉及植物病毒、病菌生物检测技术领域，具体涉及一种基于重组酶介导等温核酸扩增技术(RT‑RAA)检测辣椒轻斑驳病毒和炭疽菌的引物组、试剂盒及方法。本发明中所设计的检测PMMoV的正向引物PM‑F2的序列如SEQ ID No.1所示，反向引物PM‑R2的序列如SEQ ID No.2所示，探针引物PM‑P3的序列如SEQ ID No.3所示，所设计的检测炭疽菌的正向引物CT‑F1的序列如SEQ ID No.4所示，反向引物CT‑R1的序列如SEQ ID No.5所示，探针引物CT‑P1的序列如SEQ ID No.6所示，本发明引物组可以有效扩增PMMoV的CP基因、炭疽菌组蛋白的H3基因，引物组具有较高的特异性和灵敏性，与其他病毒或细菌无交叉反应，可与侧向流免疫层析联合使用用于植物PMMoV和炭疽菌的现场快速检测，对于PMMoV和炭疽菌有效防治具有重要意义。
本发明涉及植物病毒疫苗构建的技术领域，尤其涉及一种植物病毒移动蛋白及其应用，该移动蛋白为P3a蛋白，来源于MaYMV，用于编码MaYMV的一个蛋白，该移动蛋白的编码基因如SEQ ID NO.1。本发明首次研究得出P3a具有影响病毒细胞间移动的功能，将P3a构建到病毒内，替换病毒本身的运动蛋白，可以促进病毒在细胞间移动，利用此功能将其应用在植物病毒疫苗，有利于促进疫苗在植物细胞间有效扩散，增强疫苗的保护作用，达到更好的免疫的目的。
本发明公开了基于PCR和RPA检测紫云英矮缩病毒的引物组、试剂盒及检测方法，其中，本发明中所设计的引物组的正向引物MDV‑CPF1的序列如SEQ ID No.1所示，反向引物MDV‑CPR1的序列如SEQ ID No.1所示，该引物组可以有效扩增靶基因，具有较高的特异性和灵敏性，与其他病毒无交叉反应，可用于紫云英矮缩病毒的现场快速检测，对于有效防治该病害具有重要意义。
本发明公开了一种烟草NbTUA基因及其在抑制病毒移动的应用，涉及基因工程技术领域，该基因具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。通过病毒诱导的基因沉默(VIGS)的技术，抑制NbTUA基因在本氏烟的表达后，含绿色荧光蛋白的辣椒轻斑驳病毒在NbTUA沉默的本氏烟中移动变快，NbTUA具有影响病毒移动的功能，在抵抗病毒功能上起到了积极的作用，减少病毒对植物的危害。
本发明公开了一种用于检测中国南瓜曲叶病毒的RPA引物、探针、试剂盒及检测方法，属于生物安全技术领域。RPA引物基于中国南瓜曲叶病毒外壳蛋白基因序列设计的，RPA引物序列如SEQ ID No:1和2所示；PRA探针根据RPA引物扩增区域设计，其序列大小为49 bp，其5'端用FAM标记，3'端用C3‑Spacer修饰，且在RPA探针的序列中间距5'端的33bp处进行THF修饰。本发明还提供含有RPA引物和探针的试剂盒。本发明进一步提供基于RPA引物和探针建立的RPA检测方法，将RPA技术应用到媒介昆虫烟粉虱体内的中国南瓜曲叶病毒的分子检测，其兼具特异性强、灵敏度高、实用性好、对仪器设备要求较低的特点，为中国南瓜曲叶病毒的早期监控、带毒烟粉虱的防治和病毒病防治提供新方法。
