本发明涉及植物病毒、病菌生物检测技术领域，具体涉及一种基于重组酶介导等温核酸扩增技术(RT‑RAA)检测辣椒轻斑驳病毒和炭疽菌的引物组、试剂盒及方法。本发明中所设计的检测PMMoV的正向引物PM‑F2的序列如SEQ ID No.1所示，反向引物PM‑R2的序列如SEQ ID No.2所示，探针引物PM‑P3的序列如SEQ ID No.3所示，所设计的检测炭疽菌的正向引物CT‑F1的序列如SEQ ID No.4所示，反向引物CT‑R1的序列如SEQ ID No.5所示，探针引物CT‑P1的序列如SEQ ID No.6所示，本发明引物组可以有效扩增PMMoV的CP基因、炭疽菌组蛋白的H3基因，引物组具有较高的特异性和灵敏性，与其他病毒或细菌无交叉反应，可与侧向流免疫层析联合使用用于植物PMMoV和炭疽菌的现场快速检测，对于PMMoV和炭疽菌有效防治具有重要意义。
本发明涉及植物病毒疫苗构建的技术领域，尤其涉及一种植物病毒移动蛋白及其应用，该移动蛋白为P3a蛋白，来源于MaYMV，用于编码MaYMV的一个蛋白，该移动蛋白的编码基因如SEQ ID NO.1。本发明首次研究得出P3a具有影响病毒细胞间移动的功能，将P3a构建到病毒内，替换病毒本身的运动蛋白，可以促进病毒在细胞间移动，利用此功能将其应用在植物病毒疫苗，有利于促进疫苗在植物细胞间有效扩散，增强疫苗的保护作用，达到更好的免疫的目的。
本发明公开了一种烟草NbTUA基因及其在抑制病毒移动的应用，涉及基因工程技术领域，该基因具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。通过病毒诱导的基因沉默(VIGS)的技术，抑制NbTUA基因在本氏烟的表达后，含绿色荧光蛋白的辣椒轻斑驳病毒在NbTUA沉默的本氏烟中移动变快，NbTUA具有影响病毒移动的功能，在抵抗病毒功能上起到了积极的作用，减少病毒对植物的危害。
本发明公开了一种用于检测中国南瓜曲叶病毒的RPA引物、探针、试剂盒及检测方法，属于生物安全技术领域。RPA引物基于中国南瓜曲叶病毒外壳蛋白基因序列设计的，RPA引物序列如SEQ ID No:1和2所示；PRA探针根据RPA引物扩增区域设计，其序列大小为49 bp，其5'端用FAM标记，3'端用C3‑Spacer修饰，且在RPA探针的序列中间距5'端的33bp处进行THF修饰。本发明还提供含有RPA引物和探针的试剂盒。本发明进一步提供基于RPA引物和探针建立的RPA检测方法，将RPA技术应用到媒介昆虫烟粉虱体内的中国南瓜曲叶病毒的分子检测，其兼具特异性强、灵敏度高、实用性好、对仪器设备要求较低的特点，为中国南瓜曲叶病毒的早期监控、带毒烟粉虱的防治和病毒病防治提供新方法。
本发明涉及一种RNA植物病毒-烟草花叶病毒属（Tobamovirus）的黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV）侵染性克隆载体制备及携带黄瓜绿斑驳花叶病毒侵染性克隆的农杆菌菌株的致病性分析。黄瓜绿斑驳花叶病毒的侵染性克隆载体，该侵染性克隆载体由黄瓜绿斑驳花叶病毒CGMMV全序列融合到带35S启动子和核酶Rz的载体pCB301-CH制备得到，所述的黄瓜绿斑驳花叶病毒CGMMV全序列如Seq ID No:12所示。本发明农杆菌菌株可以大量产生黄瓜绿斑驳花叶病毒的侵染性克隆；该侵染性克隆只侵染植物，不侵染昆虫，不感染动物和人，相对安全。
