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[发明专利]一种制备分子量窄分布糊精的方法-CN201510224774.7有效
发明人：石贵阳;陈坚;王宝石;胡志杰;蒋小东;孙福新;张杰;李由然;张梁;丁重阳;李赢;顾正华 -专利权人：江南大学;江苏国信协联能源有限公司
申请日： 2015-05-05 - 公布日： 2018-06-05 - 主分类号： C12P19/14 文献下载
摘要：一种制备分子量窄分布糊精的方法，包括以下步骤：淀粉与水混合均匀，调节pH至5.8～6.0，加入高温α‑淀粉酶；置于99℃水浴槽中搅拌均匀，碘试为浅棕色即合格；灭酶；配置成浓度为1.5～10％(w/w)糊精溶液；在糊精溶液中添加乙醇至乙醇20％(v/v)，协同添加聚乙二醇与氯化钠，静置，离心，沉淀，洗涤，干燥获得组分1；上清液中，添加乙醇至终浓度为30％(v/v)，协同添加聚乙二醇与氯化钠，静置，离心，沉淀，洗涤，干燥获得组分2；重复上述过程，至乙醇浓度为90％(v/v)；组分1、2等即为所述各级分子量窄分布糊精。凡提及经有机溶剂逐级或协调聚乙二醇与盐沉淀分离淀粉或糊精方法，均适用本发明技术。
乙醇分子量窄分布聚乙二醇氯化钠糊精溶液制备洗涤沉淀淀粉酶协同水混合均匀分离淀粉有机溶剂浅棕色上清液水浴槽盐沉淀碘试灭酶淀粉重复配置协调

[发明专利]一种漆酶预处理从柚皮中提取果胶的方法-CN201810006231.1在审
发明人：李松;丁重阳;张克明;葛飞;陶玉贵;魏胜华 -专利权人：安徽工程大学
申请日： 2018-01-04 - 公布日： 2018-05-18 - 主分类号： C08B37/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种漆酶预处理从柚皮中提取果胶的方法，涉及以柚皮为原料的天然产物加工方法，该方法利用漆酶对柚皮粉进行预处理后，再经过盐酸酸解、活性炭脱色、蒸发浓缩、乙醇沉淀和干燥等步骤获得果胶产品；该方法利用漆酶进行预处理可有效降解柚皮中的木质素并破坏柚皮粉的表面微观结构，以利于果胶在酸解过程中的释放，从而达到提高果胶提取得率的目的；所得果胶具有溶解性好、酯化度高、灰分含量少等特点；该方法可提高柚皮的综合利用价值，减少废弃柚皮对环境造成的污染，同时还可以应用于其他从含木质素的天然原料中提取果胶的工艺过程之中。
一种预处理柚皮中提取果胶方法

[发明专利]一株能够利用木糖的酵母Candidajeffriesii的表达系统-CN201510006229.0有效
发明人：张梁;范贺超;高芝;李由然;石贵阳;顾正华;李赢;丁重阳;何冬旭 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-01-06 - 公布日： 2018-03-20 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一株能够利用木糖的酵母Candida jeffriesii的表达系统，包括一种表达载体，从5’‑3’依次可操作性地连接有以下元件pMD19‑Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。本发明的表达载体可实现在Candida jeffriesii中的整合型稳定表达，对木糖利用酵母Candida jeffriesii的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
能够利用酵母 candida jeffriesii 表达系统

[发明专利]树干毕赤酵母基因表达系统及其构建与应用-CN201510005584.6有效
发明人：张梁;范贺超;高芝;李由然;石贵阳;顾正华;李赢;丁重阳;何冬旭 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-01-06 - 公布日： 2017-11-21 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及树干毕赤酵母基因表达系统及其构建与应用，包括一种新型表达载体，其为环状，从5’‑3’依次可操作性地连接有以下元件pMD19‑Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。所述能够利用木糖的酵母为树干毕赤酵母。本发明的表达载体可实现在树干毕赤酵母中的整合型稳定表达，对树干毕赤酵母的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
树干酵母基因表达系统及其构建应用

[发明专利]一种能够提高非酶糖基化反应抑制率的蜜环菌发酵液的制备方法-CN201410577583.4有效
发明人： 丁重阳;田超;彭林;顾正华;张梁;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2014-10-24 - 公布日： 2017-09-22 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：一种能够提高非酶糖基化反应抑制率的蜜环菌发酵液的制备方法，包括以下步骤(1)斜面培养；(2)种子液的培养；(3)将蜜环菌种子液以4％的接种量接种到发酵培养基中，在28～32℃、摇床转速150转/分钟的条件下发酵培养2～4天；(4)调整摇床的温度，在22～25℃、摇床转速150转/分钟的条件下，继续发酵培养3～5天。本发明显著提升了蜜环菌发酵液对非酶糖基化反应的抑制率，为提高其他微生物发酵液的生物活性提供了一种新的方法，同时也为蜜环菌在发酵工业上的应用开发出一种新方向。
一种能够提高非酶糖基化反应抑制蜜环菌发酵制备方法

[发明专利]一种能够提高非酶糖基化反应抑制率的猴头菌发酵液的制备方法-CN201410578568.1有效
发明人： 丁重阳;田超;彭林;顾正华;张梁;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2014-10-24 - 公布日： 2017-08-15 - 主分类号： C12P1/02 文献下载
摘要：一种能够提高非酶糖基化反应抑制率的猴头菌发酵液的制备方法，包括以下步骤(1)斜面培养；(2)种子液的培养；(3)将猴头菌种子液以4％的接种量接种到无葡萄糖发酵培养基中，在30℃，摇床转速150转/分钟的条件下发酵培养2～4天；(4)向发酵液中补加葡萄糖，葡萄糖的补加量为以发酵培养基体积计、补加后浓度为20g/L，其他培养条件不变，继续发酵培养2～6天。本发明显著提升了猴头菌发酵液对非酶糖基化反应的抑制率，对研究猴头菌在治疗糖尿病及其并发症方面将会有巨大的推进作用。
一种能够提高非酶糖基化反应抑制猴头菌发酵制备方法

[发明专利]一种发酵茶渣制备的饲料添加剂及其应用-CN201611214808.5在审
发明人： 丁重阳;王琼;艾连中;李进伟;苑畅;汪瑞;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-12-26 - 公布日： 2017-05-17 - 主分类号： A23K10/37 文献下载
摘要：本发明公开了一种发酵茶渣制备的饲料添加剂及其应用，属于微生物发酵领域。本发明利用食药用真菌和红发夫酵母共培养对茶进行适度发酵，在尽可能多保留或提高茶渣中有益成分的同时，降解不易被利用的纤维素等物质，还可以增加食药用真菌中的活性成分，提高茶渣的利用价值。本发明方法所制备的产品中含有多酚、多糖、虾青素等物质，粗蛋白含量最高可达36.12％。本发明提供的产品既可单一应用，也可根据动物的种类、生长阶段进行产品复配应用。本发明所述的产品制备和应用方法简单易行，成本低廉，效果显著，同时对茶渣进行综合利用，减少环境污染。
一种发酵制备饲料添加剂及其应用

[发明专利]一种基因组代谢网络模型自动化修正方法-CN201510131784.6有效
发明人：张梁;吴晓红;薛卫;李由然;李赢;丁重阳;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-03-24 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： G06F19/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种基因组代谢网络模型自动化修正方法，利用了超文本传送协议和Java控件HttpClient相结合、并利用图像处理算法，实现自动提交并分析网站脚本语义，基于KEGG、MetaCyc、MetRxn在线数据库以及多个蛋白区间定位预测网站对基因组规模代谢网络模型进行了自动化断点补齐，同时通过蛋白区间预测结果和权重打分机制确定可信度高的特异性反应，完成代谢网络粗模型的自动化修正过程。利用本发明所述的方法进行基因组代谢网络模型修正的优点是更加省时、方便，且所得修正模型更为全面、准确。
一种基因组代谢网络模型自动化修正方法

[发明专利]一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法-CN201510224891.3有效
发明人：石贵阳;陈坚;王宝石;张杰;胡志杰;蒋小东;孙福新;张梁;李由然;丁重阳;李赢;顾正华 -专利权人：江南大学;江苏国信协联能源有限公司
申请日： 2015-05-05 - 公布日： 2017-05-03 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为11的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度‑时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。
一种曲霉麸曲孢子活力评价方法

[发明专利]一种生物有机肥的制备方法-CN201610812131.9在审
发明人：张梁;顾正华;丁重阳;李由然;李赢;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-09-08 - 公布日： 2017-03-01 - 主分类号： C05F15/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种生物有机肥的制备方法，将禽畜粪便、秸秆混匀之后拌入微生物菌剂，堆置发酵，至彻底腐熟之后进行干燥、造粒，从而得到生物有机肥成品。其中所使用的微生物菌剂由微生物单菌粉及辅料组成，微生物单菌粉包括地衣芽孢杆菌CCTCC No.M 2016202、枯草芽孢杆菌CCTCC No.M 2011443、凝结芽孢杆菌CCTCC No.M 2015273、黑曲霉、酿酒酵母。所得生物有机肥产品有效期长达12个月以上，远超过现行生物有机肥标准NY 884‑2012所规定的不低于6个月；有机肥生产厂家可以在需求淡季进行制备、仓储来满足旺季需求，不需要在短时间内满负荷甚至超负荷运转，有利于平稳生产。
一种生物有机肥制备方法

[发明专利]灵芝发酵谷物制备饮品的方法-CN201610788991.3在审
发明人：艾连中;王光强;夏永军;孙勇;张汇;熊智强;丁重阳 -专利权人：上海理工大学
申请日： 2016-08-31 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： A23L2/38 文献下载
摘要：本发明提供一种灵芝发酵谷物制备饮品的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，将谷物进行预处理，得到谷物培养基；步骤二，向谷物培养基中接种入灵芝菌丝体，于30℃～40℃培养5天～20天后，得到发酵产物；步骤三，将发酵产物打碎或磨碎，加入蛋白酶进行蛋白质消解，得到发酵产物酶解物；步骤四，对发酵产物酶解物进行高温灭菌灭酶，得到灵芝发酵谷物饮品，其中，谷物为大米、小麦、薏仁米、大豆、黑米、荞麦、燕麦中的任意一种。本发明提供的制备方法成本低、工艺简单，根据本发明提供的方法可以制备得到不同种类谷物的灵芝发酵谷物饮品，这些饮品为液体型或固体型，其中均不含有固体残渣，具有良好的口感，可以直接饮用。
灵芝发酵谷物制备饮品方法

[发明专利]一种以微卫星为分子标记筛选酿酒酵母乙酸耐受性性状的方法-CN201410506102.0有效
发明人：张梁;石贵阳;肖银;胡芸;顾正华;丁重阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2014-09-26 - 公布日： 2016-11-30 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种以微卫星位点为分子标记对酿酒酵母乙酸耐受性性状进行筛选的方法，其特征在于，以微卫星位点ScATT3为分子标记，所述微卫星位点ScATT3与酿酒酵母乙酸耐受性性状成正相关(p<0.05)。与传统方法相比，本发明提供的以微卫星ScAAT3为分子标记对酿酒酵母乙酸耐受性进行筛选的方法，具有丰度高、多态性高、共显性标记、可以鉴别出杂合子和纯合子，实验重复性好，结果可靠，选择中性、可自动化检测分析等特点，具有广阔的应用价值。
一种卫星分子标记筛选酿酒酵母乙酸耐受性状方法

[发明专利]一种以L-苯丙氨酸为氨基供体的L-苯甘氨酸转氨酶及其应用-CN201510284722.9在审
发明人：石贵阳;刘双平;李由然;丁红辉;孙秀英;李赢;张梁;丁重阳;何冬旭;顾正华 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-05-28 - 公布日： 2015-08-05 - 主分类号： C12P13/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组L-苯甘氨酸转氨酶蛋白在催化苯乙酮酸到L-苯甘氨酸的反应中的应用，所述重组L-苯甘氨酸转氨酶蛋白来自于东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis CGMCC 4.1286)，以L-苯丙氨酸为最适氨基供体。本发明得到的L-苯甘氨酸转氨酶HpgT具有L-苯甘氨酸转氨酶活力，能够以L-苯丙氨酸为最适的氨基供体，能够高效催化苯乙酮酸生成L-苯甘氨酸。
一种苯丙氨酸氨基供体甘氨酸转氨酶及其应用

[发明专利]基于菌丝球分散技术的柠檬酸黑曲霉种子连续培养方法-CN201410329652.X有效
发明人：石贵阳;王宝石;张杰;胡志杰;蒋小东;孙福新;李赢;张梁;李由然;丁重阳;顾正华 -专利权人：江南大学;宜兴协联生物化学有限公司
申请日： 2014-07-11 - 公布日： 2014-10-15 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：一种基于菌丝球分散技术的柠檬酸黑曲霉种子连续培养方法，包括以下步骤：（1）将黑曲霉孢子液接种至种子培养基，培养制备成熟的种子液；（2）成熟的种子液经过分散器处理，得到分散菌丝种子液；（3）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量转接至发酵培养基发酵，当发酵培养基还原糖浓度低于0.5%时发酵结束；（4）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量接种至种子培养基，培养制备得到下一级成熟的种子液，然后回到步骤（2），即实现黑曲霉种子连续培养。本发明提供的黑曲霉种子连续培养方法，能直接减少黑曲霉孢子繁琐的培养过程，同时可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率。
基于菌丝分散技术柠檬酸曲霉种子连续培养方法

[发明专利]黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法-CN201410329786.1有效
发明人：石贵阳;王宝石;张杰;胡志杰;蒋小东;孙福新;李赢;张梁;李由然;丁重阳;顾正华 -专利权人：江南大学;宜兴协联生物化学有限公司
申请日： 2014-07-11 - 公布日： 2014-10-08 - 主分类号： C12P7/48 文献下载
摘要：一种黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法，包括以下步骤：（1）黑曲霉经过逐级扩大培养，获得成熟的孢子；（2）孢子液接种至种子培养基，培养成为成熟的种子液；（3）成熟的种子液转接至发酵培养基F1；（4）发酵培养后，分割发酵液为两部分；其中一部分发酵液继续发酵完毕，获得柠檬酸；（5）分割出的另一部分发酵液经分散器分散处理，获得分散菌丝的发酵液；（6）将分散菌丝发酵液接入发酵培养基F2；发酵培养后，回到步骤（4），如此重复实现连续发酵。本发明显著降低生产成本与运行成本，显著缩短生产周期，提高生产效率；同时提高设备利用率，降低劳动强度，过程简便易操作，可以广泛应用于柠檬酸的生产。
曲霉连续发酵生产柠檬酸方法

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