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[发明专利]一种催化特性提高的蔗糖合酶突变体-CN202310696842.4在审
发明人： 丁重阳;赵丽婷;马忠宝;陈磊;徐萌萌;王琼;胡满峰;顾正华;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-13 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种催化特性提高的蔗糖合酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明提供的突变体SuSy‑M6半衰期为50min，是WT的50倍。突变子SuSy‑M6在55℃下的相对酶活比酶活为24.4U/mg，比WT提高了40％。突变子成功克服了稳定性带来的酶活的损失，实现了稳定性和酶活同时提升，满足工业化生产的需求。
一种催化特性提高蔗糖突变体

[发明专利]一种酶活提高的蔗糖合酶突变体-CN202310700317.5在审
发明人： 丁重阳;赵丽婷;马忠宝;陈磊;徐萌萌;王琼;顾正华;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-13 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活提高的蔗糖合酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明通过基因工程手段对蔗糖合酶进行改造，得到酶活力提高的突变体V148S‑K769H，其比酶活为39U/mg，是野生型比酶活的2.2倍，满足工业化生产的需求。
一种提高蔗糖突变体

[发明专利]一种具有群体感应特征的启动子及其应用-CN202111192261.4有效
发明人：李由然;石贵阳;陈媛;张梁;丁重阳;徐沙;顾正华 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-10-13 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种具有群体感应特征的启动子及其应用，具有与SEQ ID NO.1所示的序列同源性≥95％的核酸序列，本发明提供的启动子Ptr1来源于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis BL2)。本发明所述启动子具有前期(1‑5h)表达极弱，后期(16‑48h)表达脉冲型增长的特性，是响应群体密度的自诱导高效表达系统。本发明提供的启动子确保细菌种群达到一定数量后才产生目标产物，无需添加诱导剂，保证了细胞在“生长”与“生产”两相之间进行适时的转变。
一种具有群体感应特征启动子及其应用

[发明专利]一种离子交换树脂选择性固定化酶、制备方法及其应用-CN202210462716.8有效
发明人：东为富;王康静;丁重阳;王世波;李婷 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-04-28 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：本发明提供一种离子交换树脂选择性固定化酶、制备方法及其应用，属于固定化酶制备技术领域，本发明分为以下步骤：第一步，对大孔型离子交换树脂进行预处理；第二步，离子交换树脂吸附过渡金属离子；第三步，加入缓冲溶液反应掉多余的活性基团；第四步，加入带His标签的蛋白酶进行固定化。本发明制备的离子交换树脂柱制备简单，价格低廉，反应条件简单温和，可同时实现纯化和固定化过程。固定化提高了酶的相对活性和稳定性，制备得到的固定化酶结合牢靠，可进行多次酶催化反应。
一种离子交换树脂选择性固定制备方法及其应用

[发明专利]一种区别不同基原桑黄类真菌的方法与应用-CN202310656063.1在审
发明人：张梁;李默影;顾正华;庞欣;辛瑜;郭自涛;李由然;丁重阳;石贵阳 -专利权人：宜兴食品与生物技术研究院有限公司;江南大学
申请日： 2023-06-05 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： G01N30/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种区别不同基原桑黄类真菌的方法与应用。本发明所述方法为：将桑黄样品预处理；用UPLC‑Q‑TOF‑MSE进行数据非依赖模式采集数据，将采集的数据分别进行FBMN构建及可视化，得到每个桑黄的分子网络图形；再将所采集的不同基原桑黄的数据同时进行FBMN构建及可视化，得到桑黄样品的分子网络图形；最后对比桑黄样品的分子网络图形与每个桑黄样品的分子网络图形，即可判断是否属于同一基原。本发明将UPLC‑Q‑TOF‑MSE与非依赖模式采集数据结合，实现了桑黄的FBMN构建及不同基原桑黄的区分，还可区分特定组分在不同基原桑黄中的含量，为桑黄的基原鉴定及成分利用提供了新的思路和方法。
一种区别不同基原桑黄类真菌方法应用

[发明专利]一种虎奶菇超支化多糖降解物及其制备方法-CN202111437282.8有效
发明人：陈磊;唐璐莹;孙延辉;葛佩佩;丁重阳;陈献忠 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-11-29 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12P19/14 文献下载
摘要：本发明属于生物材料技术领域，具体涉及一种虎奶菇超支化多糖降解物及其制备方法。本发明是针对超支化多糖的糖苷键构成，采用纤维素酶或β‑葡萄糖苷酶处理的方法，有效切断其中的糖苷键，获得了多糖降解产物，酶解后，得到的多糖降解产物分子量显著降低。酶法降解具有特异性强、反应条件温和、过程可控、绿色高效等优点，且降解时不破坏底物的基团结构，是实现超支化多糖有效降解的重要工具。针对虎奶菇超支化多糖的结构特点，本发明采用对其中大量存在的糖苷键具有降解作用的纤维素酶或β‑葡萄糖苷酶，通过控制酶解条件，生成低分子量的多糖降解产物和还原糖，为超支化多糖的结构改性和高附加值产品的开发奠定基础。
一种虎奶菇超支多糖降解及其制备方法

[发明专利]一株α-法尼烯合成酿酒酵母工程菌的构建及应用-CN202310436611.X在审
发明人：石贵阳;王均华;李由然;朱惠霖;张梁;丁重阳;徐沙;顾正华 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-04-21 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了一株α‑法尼烯合成酿酒酵母工程菌的构建及应用，属于合成生物学技术领域。本发明整合表达了甲羟戊酸途径基因和α‑法尼烯合酶编码基因，提高了IPP和DMAPP供给能力，并回补缺陷型基因HIS3、TRP1、LYS2、LEU2和URA3提高了菌体生物量；本发明还通过表达双拷贝Fsso基因促进α‑法尼烯的积累。本发明构建的优势基因工程菌摇瓶发酵最高能够积累待续3.58g/Lα‑法尼烯，5L发酵罐最高能够积累待续26.16g/Lα‑法尼烯。
法尼烯合成酿酒酵母工程构建应用

[发明专利]一种液态发酵虎奶菇菌丝体合成麦角硫因及有机硒的方法-CN202310388859.3在审
发明人：陈磊;张卓敏;孙延辉;唐美达;丁重阳;石贵阳;顾正华 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-04-12 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12P13/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种液态发酵虎奶菇菌丝体合成麦角硫因及有机硒的方法，属于食用菌发酵技术领域。本发明采用液态发酵方式，利用双碳源、双氨基酸等手段来提高虎奶菇菌丝体麦角硫因的产量，进而以亚硒酸钠进行氧化诱导，在摇瓶发酵第7d，菌丝体中麦角硫因含量达4.68mg/g DW，发酵液中菌丝体麦角硫因的含量达35.27mg/L；并获得同时富含麦角硫因和有机硒的菌丝体，其中菌丝体里有机硒含量为0.21％(即2.1mg/g菌体干重)。该方法采用食用真菌发酵工艺，来源安全，条件温和，发酵周期短，所制备的同时富含麦角硫因及有机硒的虎奶菇菌体在食品、医药、化妆品领域均具有广泛的应用前景。
一种液态发酵虎奶菇菌丝体合成麦角有机方法

[发明专利]高耐硒灵芝Ganoderma lucidum JNUSE-200及其富硒发酵策略-CN202111537482.0有效
发明人： 丁重阳;徐萌萌;王琼;魏志毅;赵丽婷;顾正华;马忠宝;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-12-15 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了高耐硒灵芝Ganoderma lucidum JNUSE‑200及其富硒发酵策略，属于生物技术领域。本发明提供的灵芝菌株Ganoderma lucidum JNUSE‑200已于2021年9月17日保藏于中国典型培养物保藏中心。硒耐受能力的提升对其富硒至关重要，而本发明的灵芝菌株Ganoderma lucidum JNUSE‑200在整个液体发酵生长周期中，均能稳定耐受200ppm亚硒酸钠，菌丝体生长正常，菌丝细胞没有出现凋亡，且没有出现刺激性难闻气味，菌丝体富硒总量可以达到2000mg/kg，因此本菌株具有很广泛的应用前景。
高耐硒灵芝 ganoderma lucidum jnuse 200 及其发酵策略

[发明专利]一种虎奶菇菌核的平板培养方法-CN202210170505.7有效
发明人：陈磊;周俊;曾彤;石贵阳;丁重阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-02-23 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种虎奶菇菌核的平板培养方法，属于食用菌培养技术领域。本发明所述平板培养方法：(1)PDA培养基的配置：用酸或碱将PDA培养基的pH值调节为4‑9，配置PDA培养基，灭菌冷却至60‑75℃，加入双氧水溶液，得到含有双氧水的PDA培养基；(2)将虎奶菇菌种接种在装有步骤(1)所述的含有双氧水的PDA培养基的平板上，置于恒温培养箱A中培养，至菌丝长满PDA平板，转接至恒温培养箱B中恒温培养。本发明所述方法不需要木屑、棉籽壳等复杂的袋料固体培养基，具有接种方便、培养周期短、易于控制等优点。
一种虎奶菇菌核平板培养方法

[发明专利]一株香叶基香叶醇合成酿酒酵母工程菌的构建及应用-CN202310437712.9在审
发明人：石贵阳;王均华;李由然;朱惠霖;张梁;丁重阳;徐沙;顾正华 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-04-21 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一株香叶基香叶醇合成酿酒酵母工程菌的构建及应用，属于合成生物学技术领域。本发明在染色体整合表达MVA途径基因，提高了IPP和DMAPP供给能力，并回补缺陷型基因HIS3、TRP1、LYS2、LEU2和URA3提高了菌体生物量。本发明还通过表达双拷贝PaGGPPs‑ERG20和PaGGPPs‑DPP1基因促进香叶基香叶醇的积累，表达NADH依赖型spHMGR基因和弱化甾醇合成途径代谢流进一步促进香叶基香叶醇的积累。本发明构建的基因工程菌摇瓶发酵能够积累1.2g/L香叶基香叶醇，5L发酵罐能够积累5.57g/L香叶基香叶醇。
一株香叶基香叶醇合成酿酒酵母工程构建应用

[发明专利]一种催化香紫苏醇生产香紫苏内酯的方法-CN202110785213.X有效
发明人：张梁;望子龙;方亚坤;辛瑜;顾正华;李由然;徐沙;丁重阳;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-07-12 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12P17/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种催化香紫苏醇生产香紫苏内酯的方法，所述方法包括如下步骤：(1)子囊菌纲Filobasidium属的真菌经过种子培养，制得种子液；(2)按照发酵培养基的体积的5％‑10％的量将步骤(1)所得种子液接入含有香紫苏醇及所需营养物质的发酵培养基中，置于恒温摇床中25‑30℃培养60‑84h，制得含香紫苏内酯的发酵液；所述发酵培养基中含有助溶剂。本发明在发酵体系中添加助溶剂，可以提高底物香紫苏醇在发酵体系中溶解进而提高香紫苏醇的转化率和香紫苏内酯的产量。
一种催化紫苏生产内酯方法

[发明专利]一种酶催化合成核苷酸糖的方法-CN202111482940.5在审
发明人： 丁重阳;赵丽婷;马忠宝;沈玲;姚睿;徐萌萌;王琼;顾正华;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-12-07 - 公布日： 2023-06-09 - 主分类号： C12P19/30 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶催化合成核苷酸糖的方法，属于生物技术领域。本发明以蔗糖为底物，经蔗糖合酶催化生成尿苷二磷酸葡萄糖和果糖，果糖经甘露糖异构酶或来苏糖异构酶催化生成甘露糖，甘露糖经N‑乙酰己糖氨磷酸激酶催化生成甘露糖‑1‑磷酸，甘露糖‑1‑磷酸经GDP‑Man焦磷酸化酶催化得到鸟苷二磷酸甘露糖。本发明是将合成UDP‑Glc和合成GDP‑Man的模块级联在一起，以廉价蔗糖为原料，在最短的反应路线下，同时获取UDP‑Glc和GDP‑Man，从而降低合成高附加值多寡糖及糖苷的成本。
一种催化合成核苷酸方法

[发明专利]一种耐热的磁性壳聚糖固定化酶的制备-CN202310065215.0在审
发明人：李由然;石贵阳;聂铭甫;张梁;丁重阳;徐沙;顾正华;陈磊 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-01-16 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种耐热的磁性壳聚糖固定化酶的制备，涉及固定化酶的技术领域。该固定化酶载体以壳聚糖和海藻酸钠为原料，利用碱性溶液冷冻条件下的溶解及氢键重排的方法，制备出力学性质优良且耐高温的壳聚糖复合水凝胶，进一步采用化学交联法制备固定化耐高温酶。基于此，本研究建立的固定化酶制备方法，有助于解决工业酶高温情况下易失活，且难以连续使用的问题。
一种耐热磁性聚糖固定制备

[发明专利]一种热稳定性提高的蔗糖合酶突变体-CN202211333535.1在审
发明人： 丁重阳;赵丽婷;马忠宝;陈磊;徐萌萌;王琼;顾正华;李由然;徐沙;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-10-28 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种热稳定性提高的蔗糖合酶突变体，属于酶工程领域。本发明提供热稳定性提高的蔗糖合酶突变体，能够在高温下实现UDP‑Glc的合成，从而提高其生产效率，满足工业化生产的需求。
一种热稳定性提高蔗糖突变体

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