本发明第一方面提供了一种烟草NtNramp1基因，所述烟草NtNramp1基因的CDS序列如SEQ ID No.1所示。本发明第二方面提供了一种第一方面所述的烟草NtNramp1基因在调控酵母细胞Cd含量中的用途，在酵母细胞中过表达烟草NtNramp1基因会增加酵母细胞对Cd2+的吸收，并且增加酵母细胞中Cd2+的含量。本发明通过在酵母细胞中过表达烟草NtNramp1基因可以增加酵母细胞对Cd2+的吸收，并且增加酵母细胞中Cd2+的含量。
本发明涉及一种烟草输导蛋白相关基因NtImpα4及其应用，属于植物基因工程技术领域。一种烟草输导蛋白相关的基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供上述烟草输导蛋白相关基因在烟草叶片总氮和氨基酸含量调控中的应用。本发明通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术，构建了用于敲除NtImpα4基因的CRISPR/Cas9编辑载体，经编辑素材创制和分子检测鉴定后获得了NtImpα4基因敲除的烟草植株。本发明获得的NtImpα4基因敲除的编辑烟草植株，相比于对照烟草植株，对逆境的响应稍好，总氮和总氨基酸等指标均显著降低。
本发明第一方面提供了一种烟草NtHMA7基因，所述烟草NtHMA7基因的CDS序列如SEQ ID No.1所示。本发明第二方面提供了一种第一方面所述的烟草NtHMA7基因在烟草Cd胁迫抗性中的用途，在烟草中敲除NtHMA7基因能提高烟草对Cd胁迫的抗性，本发明为降低烟草及其制品中的Cd含量提供了一种新的方法。
本发明公开了一种烟草β‑葡葡糖苷酶相关基因NtBGLU17在调控烟草叶片次生代谢物含量中的应用。NtBGLU17基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，NtBGLU17编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术，构建了用于敲除NtBGLU17基因的CRISPR/Cas9编辑载体，经编辑素材创制和分子检测鉴定后获得了NtBGLU17基因敲除的烟草植株。本发明获得的，NtBGLU17基因敲除的编辑烟草植株，相比于对照烟草植株，成熟期腰叶中次生代谢物含量变化显著。
本发明涉及一种基于唾液微生物检测人群是否吸烟的引物对、试剂盒及方法，属于生物信息学技术领域。该试剂盒包括引物对、PCR试剂和阴性对照；引物对包括上游引物和下游引物；上游引物依次由标签序列和上游引物序列组成；下游引物依次由标签序列和下游引物序列组成；上游引物序列如SEQ ID NO：1所示；下游引物序列如SEQ ID NO：2所示；本发明首先采集待检测人的唾液样本，之后提取唾液中的总DNA，接着进行PCR扩增，PCR产物经回收纯化后测序，并OTUs聚类和物种分类分析，之后根据分析结果进行判断。本发明能有效预测人群是否有长期吸烟习惯，检测过程无创，低成本，快速便捷，安全性高，易于推广应用。
