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[发明专利]一种红豆杉植物细胞种子稳定培养方法-CN201210506201.X有效
发明人：李干雄;侯云屏;古志渊;骆雪兰;曾腾锋;吴永艳;肖华 -专利权人：广东科伦药业有限公司
申请日： 2012-11-30 - 公布日： 2013-03-13 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开一种红豆杉植物细胞种子稳定培养方法，旨在提供一种经济可行、工艺简单可控、成本低并能够稳定培养红豆杉植物细胞种子的方法；该方法是：1）对继代种子取样检测；2）种子终生物量调整到5~10 g/L；3）培养液初始糖度提高到15~25 g/L；4）培养液初始电导率提高到2.5~3.5ms/cm；5）培养初始生物量控制在2.5~3.5g/L，初始pH控制在5.0~6.0，搅拌进行种子继代培养；6）当步骤5）中的继代培养的种子满足：A、培养液终糖度大于8g/L或B、培养液终电导率大于2.0ms/cm或C、培养液终pH小于6.0；按步骤1)~5)启动下一次种子继代培养；属于种子培养技术领域。
一种红豆杉植物细胞种子稳定培养方法

[实用新型]一种植物细胞反应器的专用搅拌装置-CN201220207490.9有效
发明人：肖华;骆雪兰;古志渊;黄增松;吴永艳;侯云屏;侯玲琳;李干雄;曾腾锋 -专利权人：广东科伦药业有限公司
申请日： 2012-05-09 - 公布日： 2012-12-05 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种植物细胞反应器的专用搅拌装置，属于搅拌设备技术领域，其技术要点包括搅拌轴，其中所述搅拌轴的下部近端部设有径向混合动力搅拌器，在径向混合动力搅拌器上方的搅拌轴上设有至少一个轴向混合动力搅拌器；本实用新型旨在提供一种结构紧凑、细胞混合效果良好的植物细胞反应器的专用搅拌装置；用于植物细胞的混合。
一种植物细胞反应器专用搅拌装置

[实用新型]一种带有多功能视镜的植物细胞反应器-CN201120526375.3有效
发明人：李干雄;骆雪兰;肖华;钟立;古志渊;吴永艳;曹德;侯云屏;黄増松;曾腾锋 -专利权人：广东科伦药业有限公司
申请日： 2011-12-14 - 公布日： 2012-08-08 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种带有多功能视镜的植物细胞反应器，属于植物细胞反应器技术领域，其技术要点包括反应器本体，其中所述的反应器本体上表面设有带视灯的顶部视镜，在反应器本体侧壁沿竖直方向间隔设有若干侧视镜；本实用新型旨在提供一种结构简单、使用方便的带有多功能视镜的植物细胞反应器；用于细胞培养。
一种带有多功能植物细胞反应器

[实用新型]一种植物细胞反应器的高效空气分布器-CN201120525186.4有效
发明人：李干雄;骆雪兰;肖华;钟立;古志渊;吴永艳;曹德;侯云屏;黄増松;曾腾锋 -专利权人：广东科伦药业有限公司
申请日： 2011-12-14 - 公布日： 2012-08-08 - 主分类号： C12M1/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种植物细胞反应器的高效空气分布器，属于植物细胞反应器技术领域，其技术要点包括进气管，其中所述的进气管连接有空气分布总管，所述的空气分布总管侧壁上连接有空气分布支管，所述的空气分布支管的出气端设有带通孔的空气分布板；本实用新型旨在提供一种结构简单、使用方便且效果好的植物细胞反应器的高效空气分布器；用于植物细胞培养。
一种植物细胞反应器高效空气分布

[实用新型]培养植物细胞的无菌取样装置-CN201020222568.5在审
发明人：李干雄;张京维;古志渊;叶岸青;曹德;骆雪兰;侯云屏;肖华 -专利权人：梅州市杉维生物医药工程研究有限公司
申请日： 2010-06-01 - 公布日： 2010-12-29 - 主分类号： C12M1/26 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种培养植物细胞的无菌取样装置，取样阀门一端设有取样管，取样管伸入反应器内，取样阀门下端设有排污阀门，所述的取样阀门另一端通过导管分别与出样阀门、阀门连接，无菌过滤器上设有压力表，无菌过滤器上设有供气或供汽阀门，无菌过滤器通过导管分别与阀门、排污阀门连接。本实用新型安装和拆洗方便，取样后所有的阀门和导管内无残留植物细胞培养物，可以大幅度降低长时间培养植物细胞时因频繁取样带来的污染，提高培养植物细胞的成功率。
培养植物细胞无菌取样装置

[实用新型]培养红豆杉植物细胞的反应器-CN200920195263.7在审
发明人：李干雄;张京维;曾腾锋;叶岸青;肖华;骆雪兰 -专利权人：梅州市杉维生物医药工程研究有限公司
申请日： 2009-09-22 - 公布日： 2010-07-14 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种培养红豆杉植物细胞的反应器，反应器上设有出气阀门，供气管一端接有空气分布器，供气管另一端接有供气阀门，其特征在于另一条供气管接有另一供气阀门。本实用新型通过供气管通入无菌压缩空气主要提供红豆杉植物细胞所需的混合功能，通过调整空气流量的大小和通气管的管径大小提供红豆杉植物细胞所需的混合效果，防止红豆杉植物细胞的沉淀；此外，通过装有空气分布器的供气管通入无菌压缩空气主要提供红豆杉植物细胞所需的溶氧，通过调整空气流量的大小和空气分布器孔径大小提供红豆杉植物细胞所需的溶氧。本实用新型安装和拆洗简便，不易残存物料，培养红豆杉植物细胞时污染率低，能提高长时间培养红豆杉植物细胞的成功率。
培养红豆杉植物细胞反应器

[发明专利]培养红豆杉植物细胞生产紫杉醇的专用培养基-CN200910193549.6在审
发明人：李干雄;张京维;侯云屏;骆雪兰;肖华;曹德;古志渊;黄巧明 -专利权人：梅州市杉维生物医药工程研究有限公司
申请日： 2009-10-30 - 公布日： 2010-04-21 - 主分类号： C12P17/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种培养红豆杉植物细胞生产紫杉醇的专用培养基，以B5培养基为基础配方，通过正交优化试验得到用于培养红豆杉植物细胞生产紫杉醇的专用培养基。本发明的专用培养基与B5培养基进行基本成分对比生产时，专用培养基中紫杉醇的含量是B5培养基4.2倍；当接入高密度红豆杉植物细胞，在培养过程中添加硝酸银、水杨酸、壳聚糖、甲基茉莉酮酸、柠檬酸三铵、硫酸镧、苯丙氨酸、氨基乙酸、色氨酸和赖氨酸进行组合试验，能进一步提高紫杉醇的含量，缩短细胞生产周期，细胞培养到第31天时，紫杉醇的含量最高为285.15mg/L，是B5培养基中紫杉醇最高含量的81倍，实现采用专用培养基培养红豆杉植物细胞来高效率生产紫杉醇。
培养红豆杉植物细胞生产紫杉醇专用培养基

[发明专利]从红豆杉枝叶中初分离10－去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法-CN200410077553.3有效
发明人：王国亮;张依健;骆雪兰;黄巧明;谢维权;夏惠青;王彬力;曾秋玲;叶瑞英;侯嵩生;李志良 -专利权人：梅县梅雁生物工程研究所
申请日： 2004-12-27 - 公布日： 2005-08-31 - 主分类号： C07D305/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种从红豆杉枝叶初分离10－去乙酰基巴卡亭III的方法，用70～80％乙醇提取红豆杉枝叶，得到水溶性浓缩液，静置后，不溶于水的紫杉醇及低极性杂质沉淀析出，10－去乙酰基巴卡亭III等较大极性的紫杉醇同系物留在水溶液中，过滤，得到固形物和水性滤液，滤液pH值5～6，用大孔吸附树脂吸附滤液中的10－去乙酰基巴卡亭III，吸附后，用无水乙醇洗脱被大孔吸附树脂吸附的10－去乙酰基巴卡亭III，乙醇洗脱液浓缩后，得到富集10－去乙酰基巴卡亭III的产物。本发明充分利用了红豆杉枝叶资源，既提取了紫杉醇，又提取了10－DABIII，提高了资源利用率，省去了液－液萃取步骤，减少了有机溶剂使用量，降低了成本，安全性高。
红豆杉枝叶分离 10 乙酰基巴卡亭方法

[发明专利]一种从红豆杉植物枝叶中初分离紫杉醇的方法-CN200410077554.8有效
发明人：王国亮;骆雪兰;谢维权;黄巧明;夏惠青;王彬力;叶瑞英;曾秋玲;侯嵩生;李志良 -专利权人：梅县梅雁生物工程研究所
申请日： 2004-12-27 - 公布日： 2005-06-29 - 主分类号： A01G7/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种用活性炭吸附剂从红豆杉植物中初分离紫杉醇的方法，用80％乙醇于室温浸提红豆杉枝叶干粉，搅拌，过滤，得到乙醇浸提液，合并乙醇浸提液；加水稀释为55～65％乙醇浸提液；在搅拌下加入6～8％活性炭进行吸附，紫杉醇被吸附后，过滤，收集吸附了紫杉醇的活性炭。在真空减压下，回收滤液中的乙醇；活性炭装柱，用50％丙酮的乙醇洗脱被活性炭吸附的紫杉醇，用HPLC检测洗脱液中的紫杉醇，合并含紫杉醇的洗脱液，减压回收洗脱剂，得到含紫杉醇的浸膏待进一步纯化。本发明比Nair方法更简化，省去了有机溶剂萃取去杂步骤，易于操作，紫杉醇的回收彻底，脱杂率为80.6％，洗脱率97.19％，成本更低。
一种红豆杉植物枝叶分离紫杉醇方法

[发明专利]从红豆杉细胞培养液滤液中富集提取紫杉醇的方法-CN01107410.8有效
发明人：王国亮;骆雪兰;谢维权;黄巧明;侯嵩生 -专利权人：梅县梅雁生物工程研究所
申请日： 2001-01-03 - 公布日： 2004-09-15 - 主分类号： C07D305/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种从红豆杉细胞培养液滤液中富集提取紫杉醇的方法，其技术要点是将大孔吸附树脂与红豆杉细胞培养液滤液充分混合进行吸附富集，或让红豆杉细胞培养液滤液多次通过装有大孔吸附树脂的柱子进行吸附富集，有机溶剂洗脱被树脂吸附的紫杉醇，浓缩可得到高含紫杉醇的浓缩物。本发明简化了工艺、降低了提取分离紫杉醇的成本，简便、高效、易于工业化并可节省大量有机溶剂、减少设备费用、节约能源，避免污染环境。
红豆杉细胞培养液滤液富集提取紫杉醇方法

[发明专利]从红豆杉植物细胞培养液中初分离紫杉醇的方法-CN00122083.7有效
发明人：王国亮;骆雪兰;黄巧明;陈黎明;巫秀萍;李志良;袁涌娜;张庆云;侯嵩生 -专利权人：梅县梅雁生物工程研究所
申请日： 2000-08-21 - 公布日： 2003-10-08 - 主分类号： C07D305/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种从红豆杉植物细胞培养液中初分离紫杉醇方法，其技术要点是培养液中加入絮凝剂，搅拌均匀便迅速絮凝澄清，经过滤后可得到富集紫杉醇的浓缩物。组合的絮凝剂在絮凝澄清、过滤方面优于单一的絮凝剂。经HPLC检测表明，絮凝处理和未经絮凝处理的培养液中紫杉醇含量无明显变化，说明絮凝处理对紫杉醇不产生不利反应。它具有简便、可靠、效率高、成本低的优点，且不产生三废污染。
红豆杉植物细胞培养液分离紫杉醇方法

[发明专利]从红豆杉植物细胞培养液絮凝物中分离纯化紫杉醇的方法-CN02152157.3有效
发明人：王国亮;骆雪兰;谢维权;黄巧明;余瑜;夏惠青;王彬力;侯云屏;李干雄;何艳宇;李志良;侯嵩生 -专利权人：梅县梅雁生物工程研究所
申请日： 2002-12-03 - 公布日： 2003-06-04 - 主分类号： C07D305/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种从红豆杉植物细胞培养液絮凝物中分离纯化紫杉醇的方法。首先用90～99％乙醇或甲醇多次室温浸提絮凝物，乙醇或甲醇的提取物或将其进一步用二氯甲烷萃取所得产物，先后进行常压硅胶柱层析和薄层硅胶低压柱层析，柱层析所得紫杉醇用乙酸乙酯和正已烷或丙酮和正己烷混合溶剂多次重结晶，紫杉醇纯度达98.1％。由于红豆杉植物细胞培养液絮凝物体积相对细胞培养液体积小得多，却富集了细胞培养液中95～100％的紫杉醇，所以，从絮凝物中提取紫杉醇要比从细胞培养液中直接提取紫杉醇节省了大量有机溶剂、简化了分离过程、降低了成本、节省了提取紫杉醇的时间。
红豆杉植物细胞培养液絮凝分离纯化紫杉醇方法

[发明专利]从生产葛粉的废水中提取葛根素及提高其产量的方法-CN01127622.3无效
发明人：王国亮;骆雪兰;谢维权;黄巧明;侯嵩生 -专利权人：梅县梅雁生物工程研究所
申请日： 2001-07-11 - 公布日： 2002-02-06 - 主分类号： C07H17/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种从生产葛粉的废水中提取葛根素及提高其产量的方法,其技术关键是筛选具有吸附和催化转化双重功能的大孔吸附树脂,将生产葛粉的废水流经大孔吸附树脂层析柱或是将废水与大孔吸附树脂混合摇动进行吸附和催化转化,有机溶剂洗脱被吸附和转化的葛根素,减压回收溶剂得到粗葛根素。本发明利用了葛粉生产厂家的废水,提取和增产葛根素,提高了葛根资源利用率、降低了生产成本,且避免了废水对环境的污染。
生产葛粉水中提取葛根提高产量方法

[发明专利]从生产葛粉的废水中提取葛根黄酮的方法-CN01114814.4无效
发明人：王国亮;骆雪兰;谢维权;黄巧明;侯嵩生 -专利权人：梅县梅雁生物工程研究所
申请日： 2001-06-14 - 公布日： 2001-12-19 - 主分类号： C07D311/30 文献下载
摘要：本发明公开了一种从生产葛粉的废水中提取葛根黄酮的方法,其技术要点是将生产葛粉的废水流经大孔吸附树脂层析柱或是将大孔吸附树脂与废水充分混合摇动进行吸附富集,有机溶剂洗脱被树脂吸附的葛根黄酮,减压回收溶剂得到的粗葛根黄酮,本发明利用了葛粉生产厂家的废水,提取粗葛根黄酮,提取率在83.6%到94.4%之间,充分利用了葛根资源,降低了成本,且避免了废水对环境的污染。
生产葛粉水中提取葛根黄酮方法

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