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[发明专利]一种针对呼吸道合胞病毒感染的免疫物组合物及其应用-CN202310005068.8在审
发明人：付远辉;何金生;彭向雷;郑妍鹏;虞结梅 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2023-01-04 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： A61K39/155 文献下载
摘要：本发明提供了一种针对呼吸道合胞病毒感染的免疫物组合物及其应用，属于疫苗制备技术领域。本发明通过将呼吸道合胞病毒减毒株和呼吸道合胞病毒复制缺陷型腺病毒载体分别与呼吸道合胞病毒病毒融合前融合糖蛋白进行组合，用于诱导针对呼吸道合胞病毒感染的保护性免疫，提供针对呼吸道合胞病毒感染的保护性免疫的方法。
一种针对呼吸道病毒感染免疫组合及其应用

[发明专利]一种呼吸道合胞病毒抗原蛋白的编码基因、抗原蛋白、重组载体、疫苗及应用-CN202310005071.X在审
发明人：付远辉;何金生;彭向雷;郑妍鹏;虞结梅 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2023-01-04 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12N15/45 文献下载
摘要：本发明提供了一种编码呼吸道合胞病毒融合前融合糖蛋白(preF)、核蛋白(nucleoprot ein，N)和转录延长/转录终止抑制因子(M2‑1)的核苷酸序列、重组载体、疫苗及应用，属于疫苗制备技术领域。本发明利用RSV主要中和抗原preF、和可拓宽抗原T细胞表位的RSV病毒内部保守蛋白N和M2‑1的共表达，构建获得表达该抗原组合的RSV腺病毒载体；所述重组载体能够用于制备呼吸道合胞病毒疫苗，经滴鼻免疫及攻毒感染小鼠后，该RSV腺病毒载体疫苗免疫动物后可同时诱导产生针对preF、N和M2‑1的高效、持久的呼吸道黏膜局部的体液免疫、记忆性细胞免疫和记忆性固有免疫应答。
一种呼吸道病毒抗原蛋白编码基因重组载体疫苗应用

[发明专利]呼吸道合胞病毒全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列、重组腺病毒载体及其应用产品-CN202010863762.X有效
发明人：何金生;付远辉;刘美琴;彭向雷;郑妍鹏;黄蕾 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2020-08-25 - 公布日： 2022-11-04 - 主分类号： C12N15/45 文献下载
摘要：本发明提供了一种呼吸道合胞病毒全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列、重组腺病毒载体及其应用产品。该全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列包括S155C、S190F、V207L和S290C四个突变位点，保留了融合糖蛋白的跨膜区及胞内区，其序列表如序列1所示。还提供了一种含有全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列的猩猩复制缺陷型重组腺病毒载体pChAd63或人复制缺陷型重组腺病毒载体pAd26，腺病毒载体出发毒株为猩猩腺病毒63型或人腺病毒26型，缺失了腺病毒E1和E3区、且E4orf6替换为人5型腺病毒E4orf6。以及应用重组腺病毒的产品。本发明的重组腺病毒载体免疫动物后，能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞免疫和体液免疫反应，产生的抗体对融合前F识别能力较强，具有较好的免疫效果和免疫保护作用。
呼吸道病毒全长融合糖蛋白核苷酸序列重组载体及其应用产品

[发明专利]一种共表达呼吸道合胞病毒融合前蛋白和黏附糖蛋白的复制缺陷型腺病毒载体疫苗-CN202010864874.7有效
发明人：何金生;付远辉;彭向雷;郑妍鹏 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2020-08-25 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明提供了一种共表达呼吸道合胞病毒融合前蛋白和黏附糖蛋白的复制缺陷型腺病毒载体疫苗，该序列包括preF和G130‑230的核酸序列，其由T2A序列连接在一起，编码preF的核苷酸序列位于preF2A3G序列5’端，编码G130‑230的核苷酸序列位于preF2A3G序列3’端。通过猩猩63型复制缺陷型重组腺病毒载体表达所述核苷酸序列，重组腺病毒为rChAd63/preF2A3G，该重组腺病毒免疫动物后可同时诱导产生针对融合糖蛋白和黏附糖蛋白的血清抗体,且诱导产生的血清抗体主要是针对preF的抗体，可以应用在预防呼吸道合胞病毒疫苗中。所述重组腺病毒疫苗可以大规模制备，用于预防RSV感染。
一种表达呼吸道病毒融合蛋白黏附糖蛋白复制缺陷载体疫苗

[发明专利]一种针对呼吸道合胞病毒感染的组合疫苗-CN202010863764.9有效
发明人：何金生;杜琳;付远辉;朱卫华;彭向雷;高博;郑妍鹏;刘美琴 -专利权人：北京交通大学;北京智飞绿竹生物制药有限公司
申请日： 2020-08-25 - 公布日： 2022-08-16 - 主分类号： A61K39/295 文献下载
摘要：本发明提供了一种针对呼吸道合胞病毒感染的组合疫苗。包括：第一组合物，其包含免疫有效剂量的人26型复制缺陷型腺病毒载体和药学上可以接受的载体，人26型复制缺陷型腺病毒载体包含编码呼吸道合胞病毒的抗原蛋白的核苷酸；第二组合物，包含免疫有效剂量的猩猩63型复制缺陷型腺病毒载体和药学上可以接受的载体，猩猩63型复制缺陷型腺病毒载体包含编码呼吸道合胞病毒的抗原蛋白的核苷酸。第一组合物为初免组合物，第二组合物为加强组合物；或者，第一组合物为加强组合物，第二组合物为初免组合物。本发明的组合疫苗用于诱导针对呼吸道合胞病毒感染的保护性免疫，提供针对呼吸道合胞病毒感染的保护性免疫的组合物、疫苗和方法。
一种针对呼吸道病毒感染组合疫苗

[发明专利]一种RSV融合前F蛋白、表达质粒、细胞株和RSV疫苗组合物-CN202111536309.9在审
发明人：付远辉;何金生;郑妍鹏;彭向雷;虞结梅 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2021-12-15 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： C07K14/135 文献下载
摘要：本发明提供了一种RSV融合前F蛋白、表达质粒、稳定表达融合前F蛋白的细胞株和RSV疫苗组合物，涉及生物医药技术领域。本发明在融合前F蛋白基础上引入N70Q突变位点，消除该糖基化位点并增强免疫原性，并以GCN4基序替换跨膜区和胞内区形成稳定的分泌型三聚体从而获得分泌型三聚体化的融合前F蛋白(NQ)。本发明利用真核表达的方法，成功构建了稳定表达所述融合前F蛋白NQ的CHO细胞系，将表达的NQ和佐剂(Al(OH)3+CpG‑X1)组合后，制备疫苗组合物。本发明所述疫苗组合物可诱导产生Th1/Th2平衡免疫应答、高滴度的中和抗体，以及细胞免疫，为研制RSV亚单位疫苗奠定基础。
一种 rsv 融合蛋白表达质粒细胞株疫苗组合

[发明专利]两种表达水痘-带状疱疹病毒的gE蛋白的重组腺病毒及应用-CN202111536306.5在审
发明人：付远辉;何金生;黄蕾;虞结梅;彭向雷;郑妍鹏 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2021-12-15 - 公布日： 2022-03-11 - 主分类号： C07K14/04 文献下载
摘要：本发明提供了两种表达水痘‑带状疱疹病毒的gE蛋白的重组腺病毒及应用，涉及生物医药技术领域。本发明提供了两种基于水痘‑带状疱疹病毒gE蛋白的核苷酸序列制备的重组腺病毒，以可表达水痘‑带状疱疹病毒gE蛋白的重组腺病毒同源或异源组合作为带状疱疹病毒疫苗，其在小鼠上能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞及体液免疫反应。
表达水痘带状疱疹病毒 ge 蛋白重组病毒应用

[发明专利]一种呼吸道合胞病毒融合前F蛋白及其应用-CN201910337141.5有效
发明人：何金生;马尧;付远辉;彭向雷;郑妍鹏 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2019-04-25 - 公布日： 2021-09-10 - 主分类号： C07K14/135 文献下载
摘要：本发明提供了一种呼吸道合胞病毒融合前F蛋白及其应用，属于呼吸道合胞病毒疫苗技术领域。该融合前F蛋白是野生型F蛋白的第106位、第108位及第109位氨基酸由Arg突变为Asn后，第104位氨基酸由Asn突变为Cys、第155位氨基酸由Ser突变为Cys，或者第58位氨基酸由Thr突变为Cys、第190位氨基酸由Ser突变为Cys。本发明突变野生型F蛋白的第一个弗林酶切割位点，使Pre‑F的结构更加稳定，表达量没有下降且M1‑F在293T细胞中表达的融合前表位显著提高；对F蛋白氨基酸位点的第二次突变，使其形成二硫键，与野生型相比具有更稳定的融合前表位，适用于人RSV的其他病毒株；适用于以RSV F蛋白为抗原的各种疫苗形式，如：核酸疫苗、蛋白疫苗、载体疫苗及重组病毒颗粒疫苗。
一种呼吸道病毒融合蛋白及其应用

[发明专利]一类3-位官能团化的N(O,S)-杂茚类衍生物及其在抗呼吸道合胞病毒中的应用-CN201810109813.2有效
发明人：何金生;王玉成;付远辉;张国宁;徐竹欣;李强;郑妍鹏;王菊仙;彭向雷;白晓光 -专利权人：北京交通大学;中国医学科学院医药生物技术研究所
申请日： 2018-02-05 - 公布日： 2020-12-29 - 主分类号： C07D209/30 文献下载
摘要：本发明公开了一类3‑位官能团化的N(O,S)‑杂茚类衍生物及其在抗呼吸道合胞病毒中的应用。其结构为：其中：n为0或1；X表示碳原子或氮原子；Y表示NH、NMe、氧原子或硫原子；Z表示NH、氧原子、硫原子、亚砜基或砜基；当Z为硫原子、亚砜基或砜基时：R1表示C1‑C6烷基、C1‑C6烷氧基、卤素、硝基、氨基或羟基；R2表示H、C1‑C6烷基、C1‑C6烷氧基、卤素、硝基、氨基或羟基；R1与R2相同或不同；所述R1和R2各自为1个或2个；当Z为NH或氧原子时：R1、R2表示H、C1‑C6烷基、C1‑C6烷氧基、卤素、硝基、氨基或羟基；R1与R2相同或不同；所述R1和R2各自为1个或2个。本发明研究发现该类衍生物具有较强的抗呼吸道合胞病毒活性，有望开发成为临床有效的抗病毒药物。
一类官能团杂茚类衍生物及其呼吸道病毒中的应用

[发明专利]一种抗呼吸道合胞病毒药物的高通量筛选方法和应用-CN201710244050.8有效
发明人：何金生;付远辉;彭向雷;郑妍鹏;姜男;许敏 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2017-04-14 - 公布日： 2019-08-13 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开一种重组RSV反基因组质粒rRSV‑EGFP，其序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了由上述质粒经拯救获得的重组RSV以及其在筛选抗RSV药物中的应用。本发明筛选抗RSV药物的高通量筛选方法，包括：接种宿主细胞，加入重组RSV和待筛选药物；检测GFP荧光强度；评价待筛选药物的抗RSV效果。本发明利用表达绿色荧光蛋白的重组RSV与宿主细胞和待筛选化合物相互作用，由于绿色荧光蛋白的表达水平与病毒复制水平密切相关可以通过检查荧光强度分析化合物的抗病毒作用，进而建立针对RSV的高通量药物筛选模型，进行大规模的药物筛选，为抗RSV药物的研发奠定基础。
一种呼吸道病毒药物通量筛选方法应用

[发明专利]基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组及其应用-CN201510673911.5在审
发明人：何金生;付远辉;郑妍鹏;刘亚茹 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2015-10-16 - 公布日： 2015-12-30 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开一种基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组及其应用，该微型复制基因组包含RNA聚合酶Ⅰ启动子和终止子、Gaussia荧光素酶(Gaussia luciferase，Gluc)报告基因、RSV前导序列(Leader region/genomic promotor)、转录起始信号(Gene start signal，GS)、转录终止信号(Gene end signal，GE)和尾随序列(Trailer region/antigenomic promoter)等顺式作用元件(Cis-acting elements)；包含RSV微型复制基因组的pHM-RSV-Gluc表达载体，其包括基于RNA聚合酶Ⅰ的RSV微型复制基因组和pHM载体序列；利用所述筛选抗RSV化合物的方法，该方法包括如下步骤：接种宿主细胞，并加入RSV病毒和待筛选化合物；转染所述pHM-RSV-Gluc质粒到宿主细胞；检测Gaussia荧光素酶信号强度；评价待筛选化合物的抗RSV病毒的效果，通过该方法可对抗RSV的药物进行高通量筛选。
基于 rna 聚合 rsv 微型复制基因组及其应用

[发明专利]一种阿尔茨海默病致病基因及其应用-CN201210041609.4无效
发明人：彭向雷;管小亭;何金生;郑妍鹏;张莹;周淑杰 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2012-02-21 - 公布日： 2012-07-25 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开了属于分子病理学领域技术领域的一种阿尔茨海默病致病基因及其应用，其cDNA核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还涉及含有所述阿尔茨海默病致病基因的重组载体、含有该重组载体的重组细胞、阿尔茨海默病致病基因的编码蛋白以及阿尔茨海默病致病基因的外显子。本发明所述阿尔茨海默病致病基因的外显子，对该基因的检测可能用于AD患者的基因分子诊断，或利于明确AD患者亲属的发病风险预测。本发明可以对AD的发病机理提供重要线索，含有所述阿尔茨海默病致病基因的外显子载体可用于制备AD细胞或动物模型。
一种阿尔茨海默病致病基因及其应用

[发明专利]人呼吸道合胞病毒F蛋白的纯化方法-CN201110075335.6无效
发明人：何金生;郑妍鹏;唐亚宁;付远辉 -专利权人：北京交通大学
申请日： 2011-03-28 - 公布日： 2011-09-28 - 主分类号： C07K14/135 文献下载
摘要：本发明公开了一种人呼吸道合胞病毒F蛋白的纯化方法。该方法通过以RSV感染HEp-2细胞或Vero细胞，待细胞出现完全病变后，收获细胞及培养基，离心，取上清，PEG6000沉淀，获得的沉淀物经溶解后通过蔗糖密度梯度离心进一步纯化，纯化的病毒经裂解液溶解包膜蛋白后，蛋白粗提溶液依次经过离子交换层析和凝胶过滤层析对F蛋白进行纯化。经过两步层析可以得到高度纯化的F蛋白，且在纯化过程中保持了F蛋白的抗原性，纯化的F蛋白仍然能被一组单克隆抗体检测到。
呼吸道病毒蛋白纯化方法

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