本发明公开了疏水蛋白mHGFI基因及表达的蛋白及应用,疏水蛋白mHGFI基因的核苷酸序列是SEQ ID NO.2表示。本发明采用大肠杆菌的表达系统,利用基因工程的方法对原有的灰树花菌(Grifola frondosa)HGFI基因中半胱氨酸进行突变为丝氨酸,获得高表达、表达的疏水蛋白溶解性好以及生产周期短的疏水蛋白mHGFI基因,实验表明,1L的TB培养基可以得到2mg目的蛋白mHGFI。疏水蛋白mHGFI基因表达的蛋白具有与真菌疏水蛋白HGFI相近的双亲性及应用性质。仍然可以作为乳化剂使小油滴在水中稳定存在,并且可以作为分散剂分散石墨烯及碳纳米管,解决疏水性材料修饰问题。
本发明公开了疏水蛋白mHFBI基因及表达的蛋白及应用,所述基因的核苷酸序列是SEQ ID NO.2表示,本发明采用大肠杆菌的表达系统,利用基因工程的方法对原有的瑞氏木酶(Trichoderma reesei)HFBI基因中半胱氨酸进行突变为丝氨酸,获得高表达、表达的疏水蛋白溶解性好以及生产周期短的疏水蛋白mHFBI基因,实验表明,1L的TB培养基可以得到2mg目的蛋白mHFBI。疏水蛋白mHFBI基因表达的蛋白具有与真菌疏水蛋白HFBI相近的双亲性及应用性质。仍然可以作为乳化剂使小油滴在水中稳定存在,并且可以作为分散剂分散石墨烯及碳纳米管,解决疏水性材料分散问题。
本发明公开了一种寨卡病毒衣壳蛋白刚性融合表达载体及构建及应用,寨卡病毒衣壳蛋白刚性融合表达载体MBP‑ZIKV_capcid_pET22b中所述MBP‑ZIKV_capcid的核苷酸序列用SEQ ID NO.1所示。本发明利用MBP基因与寨卡病毒衣壳蛋白基因进行刚性融合能在体外大量表达和纯化寨卡病毒衣壳蛋白,寨卡病毒衣壳蛋白刚性融合表达载体转化到宿主细胞后,克服了现有技术寨卡病毒衣壳蛋白单个蛋白的蛋白表达水平低和蛋白高聚的问题,蛋白溶解度提高﹑使蛋白纯化容易,能高效获得寨卡病毒衣壳蛋白,为纯化该蛋白及其相关种属蛋白提供了新技术,可用于医疗检测和生物学功能实验相关产品的开发。
本发明公开了细胞表面展示PET分解酶的重组毕赤酵母及构建与应用,其构建为:(1)化学合成SEQ ID No.1所示的改良过的PET分解酶的核苷酸序列;从毕赤酵母GS115基因组中克隆出锚定蛋白基因的核苷酸序列;(2)利用OverlapPCR将锚定蛋白基因的核苷酸序列和改良过的PET分解酶基因的核苷酸序列连接得到融合序列;(3)将融合序列连接到毕赤酵母表达载体上,得到重组表达载体;(4)将重组表达载体转入宿主毕赤酵母中,得到细胞表面展示PET分解酶的重组毕赤酵母。本发明可以将PET分解酶锚定到细胞表面,固定化后的酶可做全细胞催化剂,相比于野生型稳定性高、回收方便、易控制、可反复利用。