本发明公开了一种用于猴痘病毒检测的探针组合物,所述组合物包括猴痘探针组合物以及内参探针组合物;所述猴痘探针组合物包括猴痘检测探针以及检测引物对,所述内参探针组合物包括内参探针以及内参引物对;所述猴痘检测探针的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述检测引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.2~3所示;所述内参探针的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示,所述内参引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.5~6所示。本发明同时公开了包含上述探针组合物的试剂盒。结果表明,本发明的最低检出限为195copies/ml,检出率为95%,极大地提高检测猴痘病毒的效率。