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[发明专利]一种引发溶血性输血反应的类孟买表型的SNP位点、应用及试剂-CN202310412594.6在审
发明人：朱发明;应燕玲;洪小珍;张晶晶;许先国;黄新宇 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2023-04-10 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12Q1/6881 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学检测技术领域，尤其是涉及一种引发溶血性输血反应的类孟买表型的SNP位点、应用及试剂。本发明发现了一种可引发溶血性输血反应的H血型系统血型基因的新的SNP突变位点，产生了该血型系统的一种新的等位基因，可导致产生类孟买表型。提供有关SNP位点及其分子检测试剂，有助于明确个体的H血型基因型，可进一步提高输血安全。本发明还提供了前述SNP位点及等位基因的快速检测方法，从而提供了一种有效的避免溶血性输血反应发生的基因诊断、产前基因筛查及遗传咨询的途径，应用效果表明本发明所提供的SNP位点及检测引物可以有效的用于临床患者以及献血者外周血进行H血型类孟买型FUT1基因突变位点的检测。
一种引发溶血输血反应孟买表型 snp 应用试剂

[发明专利]一种与免疫性溶血性输血反应相关的H血型系统抗原缺失的SNP位点、应用及试剂-CN202310494551.7在审
发明人：应燕玲;洪小珍;张晶晶;朱发明 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学检测技术领域，尤其是涉及一种与免疫性溶血性输血反应相关的H血型系统抗原缺失的SNP位点、应用及试剂。本发明在先证者的FUT1基因中发现了两个可导致氨基酸残基突变的新的SNP突变位点和一个同义SNP突变，其中两个新错义突变位点的组合可引发溶血性输血反应。经过单倍型测序确认其中c.575GC突变和c.289GA突变分别位于一对等位基因上会导致氨基酸残基置换。基于此，本发明提供有关SNP位点组合及其分子检测试剂，有助于明确个体的H血型基因型，辅助其红细胞抗原和血清抗体的鉴定，可进一步提高输血安全、加强预防输血引发的溶血性输血反应。
一种免疫性溶血输血反应相关血型系统抗原缺失 snp 应用试剂

[发明专利]36个红细胞血型系统基因全编码区序列同步检测基因分型方法、探针集及试剂盒-CN202211150571.4在审
发明人：应燕玲;朱发明;张晶晶;洪小珍;许先国 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2022-09-21 - 公布日： 2023-03-17 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供一种36个红细胞血型系统基因全部编码区序列同步检测基因分型方法、探针集及试剂盒，所述方法对36个红细胞血型系统对应基因的全部编码区序列进行捕获、文库制备、Illumina平台测序上机以及生物信息学分析，实现对36个红细胞血型系统基因单孔同步高通量基因分型；所述探针集为核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.871所示的探针的集合。本发明能够极大地简化多个血型系统同步分型的检测，提高工作效率，同时大大缩减了实验样本和测试成本，具有通量高、覆盖面广的特点；本发明检测的红细胞血型基因集覆盖对应基因的全部编码区序列，序列分析全面，可用于解决红细胞血型系统中存在的变异体样本基因分型难题。
36 红细胞血型系统基因编码序列同步检测方法探针试剂盒

[发明专利]一种人红细胞血型抗原系统基因分型的多重PCR方法、引物及试剂盒-CN202111117473.6有效
发明人：朱发明;应燕玲;张晶晶;洪小珍;何吉 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2021-09-23 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12Q1/6881 文献下载
摘要：本发明提供一种人红细胞血型抗原系统基因分型的多重PCR‑SBT方法、引物及试剂盒。所述多重PCR‑SBT方法对24个红细胞血型系统基因在同一多重扩增反应体系、反应程序和测序反应下进行分型，具体包括以下步骤：(1)制备人基因组DNA，作为PCR扩增的模板；(2)在同一PCR反应体系中，提供多对扩增引物，用聚合酶链反应多重扩增人基因组DNA中24个红细胞抗原系统的基因序列；(3)将步骤(2)得到的扩增产物进行双酶切纯化；(4)提供测序引物，将步骤(3)得到的纯化产物进行测序PCR反应；(5)将步骤(4)得到的测序产物进行醋酸钠‑乙醇沉淀法纯化，进行毛细管电泳测序；(6)将步骤(5)获得的序列通过软件分析，确定其基因型。
一种红细胞血型抗原系统基因多重 pcr 方法引物试剂盒

[发明专利]一种人血小板同种抗原系统等位基因分型的实时荧光PCR方法、探针、引物及试剂盒-CN202110247485.4在审
发明人：朱发明;张晶晶;洪小珍;陈舒;王洁琳 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2021-03-05 - 公布日： 2021-08-13 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供一种人血小板同种抗原系统等位基因分型的实时荧光PCR方法、探针、引物及试剂盒。所述人血小板同种抗原系统等位基因分型的实时荧光PCR方法对HPA‑6w和HPA‑21w抗原系统的a和b等位基因在同一扩增反应体系以及扩增反应程序下进行分型指定，具体包括如下步骤：(1)制备人基因组DNA，作为PCR扩增的模板；(2)合成扩增引物、特异性荧光探针并配制PCR扩增反应体系；(3)用实时荧光PCR装置在同一扩增反应体系以及扩增反应程序下获取荧光信号；(4)分析步骤(3)获得的荧光信号结果，依据荧光信号强弱确定其基因型。本发明实现了同一条件下检测HPA‑6w和HPA‑21w等位基因，而且针对a和b等位基因采用不同的探针，有效解决了既往基于PCR‑SSP实时荧光的不足。
一种血小板同种抗原系统等位基因实时荧光 pcr 方法探针引物试剂盒

[发明专利]一种ABO基因单倍体分型方法及试剂-CN202010501840.1在审
发明人：朱发明;应燕玲;洪小珍;何吉;许先国 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2020-06-04 - 公布日： 2020-08-21 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明涉及一种ABO基因单倍体分型方法及试剂。所述ABO基因单倍体分型方法包括以下步骤：（1）设计并合成可扩增长片段特定等位基因的PCR扩增引物；（2）制备人基因组DNA；（3）根据ABO基因型，进行选择性PCR反应扩增人基因组DNA中ABO基因单倍体部分DNA序列；（4）将扩增产物进行双酶切纯化；（5）提供寡核苷酸测序引物，将双酶切纯化产物进行测序PCR反应；（6）将测序产物进行醋酸钠‑乙醇沉淀法纯化，并进行毛细管电泳测序；（7）确定ABO基因单倍体并指定其基因型。本发明所提供的ABO基因单倍体分型方法可选择性的分离出三个等位基因的单倍体形式，在ABO疑难血型的鉴定、ABO新等位基因序列的确认和精确分型等方面的具有广泛的应用价值。
一种 abo 基因单倍体方法试剂

[发明专利]一种基于NGS技术的ABO基因全长序列测定方法及试剂包-CN202010034652.2在审
发明人：朱发明;和艳敏;洪小珍;应燕玲;许先国;何吉 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2020-01-14 - 公布日： 2020-06-02 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明属于基因分型检测方法技术领域，具体涉及一种用于基于NGS技术的ABO基因全长序列测定方法。本发明还涉及一种基于NGS技术的ABO基因全长序列测定方法所用试剂。本发明所提供的方法对ABO基因全长序列包括5’UTR部分区域、第1号外显子至第7号外显子和全部内含子序列进行长片段PCR扩增、扩增产物文库制备、Illumina平台测序上机以及生物信息学分析。本发明所提供的试剂和方法可作为一种全新的、独立的、应用广泛的鉴定方法，解决了ABO精确分型的问题，发挥NGS技术对ABO基因分型高通量、结果准确的特点，在临床输血医学研究和遗传学等领域的相关应用将受到高度重视，对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。
一种基于 ngs 技术 abo 基因全长序列测定方法试剂

[发明专利]一种人类红细胞血型系统ABO抗原的多重PCR-SBT基因分型方法及试剂-CN201811609618.2有效
发明人：朱发明;应燕玲;洪小珍;何吉;许先国;陈舒;马开荣 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2018-12-27 - 公布日： 2019-08-30 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明属于基因分型检测方法技术领域，具体涉及一种用于人类红细胞血型系统ABO抗原的多重PCR‑SBT基因分型方法。本发明还涉及一种人类红细胞血型系统ABO抗原基因分型的多重PCR‑SBT试剂。本发明所提供的试剂和方法可作为一种独立的、应用广泛的鉴定方法，解决了ABO抗原系统快速准确定型的问题，发挥多重PCR‑SBT对ABO基因定型操作高通量、结果准确的特点，在临床输血医学研究和遗传学等领域的相关应用将受到高度重视，对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。
人类红细胞血型系统多重PCR 基因分型抗原定型基因分型检测医学研究单位抗原基因抗原系统输血医学现实意义药学研究高通量遗传学分型应用开发研究

[发明专利]一种同步检测5个红细胞血型系统12个抗原的基因分型方法及试剂-CN201811419215.1在审
发明人：朱发明;许先国;应燕玲;洪小珍;陈舒;马开荣;何吉 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2018-11-26 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12Q1/6876 文献下载
摘要：快速、准确的一种同步检测5个红细胞血型系统12个抗原的基因分型方法，包括步骤：(1)制备基因分型样本的人基因组DNA；(2)提供扩增引物，用聚合酶链反应同步扩增所述基因组DNA中5个血型系统12个抗原对应的基因序列；(3)将步骤(2)得到的扩增产物作双酶切纯化；(4)提供测序引物，将步骤(3)所得纯化产物分别作测序PCR反应；(5)将步骤(4)所得测序反应产物作醋酸钠‑乙醇沉淀法纯化，毛细管电泳测序；(6)将步骤(5)所得序列经软件分析，确定其血型抗原基因型；所述扩增引物和测序引物为序列号1‑14的，所述方法所用试剂具有所述扩增引物和测序引物。本发明用于种同步检测5个红细胞血型系统12个抗原的基因分型。
抗原红细胞血型测序引物基因分型扩增引物同步检测毛细管电泳测序聚合酶链反应人基因组DNA 乙醇沉淀法基因组DNA 测序反应纯化产物基因序列扩增产物软件分析同步扩增血型抗原血型系统制备基因测序PCR 醋酸钠基因型双酶切分型样本

[发明专利]一种评估造血干细胞移植植入状态的多重实时定量方法所用试剂-CN201710172643.8有效
发明人：许先国;何吉;洪小珍;章伟;朱发明 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2017-03-22 - 公布日： 2018-06-12 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：一种评估造血干细胞移植植入状态的多重实时定量方法所用试剂，由用于患者移植前和供者核苷酸多态性位点筛选的扩增673位点插入型、673位点缺失型、688位点插入型、688位点缺失型、803位点插入型、803位点缺失型、918位点插入型、918位点缺失型、944位点插入型、944位点缺失型、1066位点插入型、1066位点缺失型、1100位点插入型、1100位点缺失型、1151位点插入型、1151位点缺失型、1625位点插入型、1625位点缺失型、1989位点插入型、1989位点缺失型、2504位点插入型、2504位点缺失型、2568位点插入型、2568位点缺失型、2676位点插入型、2676位点缺失型等位基因的26对引物和用于荧光检测的13条寡核苷酸探针组成。本发明对于提高造血干细胞移植成功率和术后生存率具有重要意义。
位点缺失插入型位点造血干细胞移植实时定量植入寡核苷酸探针核苷酸多态性生存率等位基因荧光检测重要意义对引物扩增评估术后成功率筛选移植

[发明专利]一种人血小板同种抗原系统基因分型的PCR‑SBT方法及试剂-CN201410291315.6有效
发明人：朱发明;何吉;陈舒;洪小珍;许先国;刘瑛;吕杭军 -专利权人：浙江省血液中心
申请日： 2014-06-25 - 公布日： 2017-12-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供一种人血小板同种抗原系统基因分型的PCR‑SBT方法，该方法包括以下步骤制备人基因组DNA；扩增人基因组DNA中抗原系统的基因序列；将扩增产物进行双酶切纯化；将纯化产物进行测序PCR反应；将测序产物进行醋酸钠‑乙醇沉淀法纯化，进行毛细管电泳测序；将获得的序列通过软件分析确定其基因型。本发明还提供上述分型方法所用的试剂。本发明可作为一种独立的、应用广泛的鉴定方法，解决了HPA 28个抗原系统准确定型的问题，发挥PCR‑SBT对HPA基因定型操作高通量、结果准确的特点，在临床输血医学研究和遗传学等领域的相关应用将受到高度重视，对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。
一种血小板同种抗原系统基因 pcr sbt 方法试剂

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