本发明涉及烟草成分检测领域,尤其涉及一种同时测定烟草中10种Amadori化合物的方法。所述方法采用在线SPE‑LC‑MS/MS分析方法进行测定;其中,所述在线SPE采用HySphere MM anion阴离子交换柱对样品进行在线净化。本发明的方法采用全自动固相萃取技术在线纯化烟草样品,固相萃取方式自动化操作更加简便,可实现样品高通量分析,显著提高检测效率,减少人为误差,提高检测准确性;同时,经在线SPE处理后的烟草样品,基线噪声更小,干扰峰明显减少,基质效应减小,大大降低了烟草样品对检测系统的污染,提高了检测重复性和灵敏度,延长了液质系统的使用寿命。