本发明公开了一种DNA修复蛋白用于修复CRISPR/Cas9基因编辑相关宿主基因损伤的方法,具体为一种提高DNA修复效率的蛋白、表达质粒、基因编辑质粒在修复基因编辑相关损伤的应用,所述蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,所述基因编辑质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明的结果显示RAD52过表达载体能够显著增加宿主细胞内的RAD52基因在mRNA和蛋白质水平的表达量,本发明提供的蛋白和载体能够修复基因编辑所致损伤,相比于现有的通过抑制Cas9蛋白活性而降低基因编辑的方法,能够修复已经造成DNA损伤;本发明为修复基因编辑相关损伤的提供了一种新方法。
本发明公开了一种靶向敲除鸡TET2基因的sgRNA及CRISPR/Cas9系统与应用,所述sgRNA核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑4任一所示,本发明还公开了靶向敲除鸡TET2基因的CRISPR‑Cas9系统,以及该系统在敲除鸡TET2基因的细胞株中的应用。本发明通过CRISPR‑Cas9技术首次靶向敲除鸡巨噬细胞系(HD11)的TET2基因,适用于较难转染和抗生素筛选敏感的免疫细胞,且确保了细胞中不含有转基因片段,同时发现敲除TET2基因的HD11细胞具有免疫抑制特征,为鸡免疫抑制机制的研究提供了理想模型。