本发明公开了一种采用DNA分子重排(DNA Shuffling)技术获得了草甘膦抗性增强的来源于葡萄的EPSP合酶多位点突变体及其编码基因与应用。所述突变体含有7个突变位点,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,其编码的碱基序列如SEQ ID No.2所示。试验表明,本发明的来源于葡萄的EPSP合酶多位点突变体及其编码的基因,同时具有较高的草甘膦抗性和较强的与PEP亲和性,这些特性将为该基因用于抗草甘膦转基因作物的培育提供了可能。
本发明公开了一种优化后可在毕赤酵母和拟南芥中表达的漆酶LbLAC9I序列及其应用。所述漆酶LbLAC9I的核苷酸序列如SEQ ID No 1,全长1518 bp,其编码的蛋白质序列如SEQ ID No 2,共501个氨基酸。通过将该序列转入毕赤酵母和拟南芥中都能表达出有活性的漆酶,该漆酶可用于染料脱色。
本发明公开了一种优化后适用于大肠杆菌表达的邻苯二酚降解相关的四个基因及其应用。每个基因都由独立的T7启动子和终止子控制,其核苷酸序列分别如SEQ ID No 1、SEQ ID No 2、SEQ ID No 3和SEQ ID No 4所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列分别如SEQ ID No 5、SEQ ID No 6、SEQ ID No 7和SEQ ID No 8所示。本发明优化合成的基因能够在大肠杆菌中成功表达,可用于制备降解邻苯二酚的微生物。
本发明公开了一种优化后适用于大肠杆菌表达的苯酚羟化酶基因序列及其应用。编码的苯酚羟化酶由两个亚基组成,每个亚基都由独立的T7启动子和终止子控制,其核苷酸序列分别如SEQ ID No 1和SEQ ID No 2所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列分别如SEQ ID No 3和SEQ ID No 4所示。本发明优化合成的基因能够在大肠杆菌中成功表达,可用于制备降解苯酚的微生物。
本发明公开了一种优化后适用于大肠杆菌表达的甲苯单加氧酶基因序列及其应用。编码的甲苯单加氧酶由六个亚基组成,每个亚基都由独立的T7启动子和终止子控制。其核苷酸序列分别如SEQ ID No 1、SEQ ID No 2、SEQ ID No 3、SEQ ID No 4、SEQ ID No 5和SEQ ID No 6所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列分别如SEQ ID No 7、SEQ ID No 8、SEQ ID No 9、SEQ ID No 10、SEQ ID No 11和SEQ ID No 12所示。本发明的基因能够在大肠杆菌中成功表达,可用于制备降解甲苯的微生物。
本发明公开了一种优化后适用于毕赤酵母表达的漆酶LbLAC3I序列及其表达应用。所述漆酶LbLAC3I的核苷酸序列如SEQ ID No 1,全长1518bp,其编码的蛋白质序列如SEQ ID No2,共501个氨基酸。通过将该序列构建到毕赤酵母表达载体并转化入毕赤酵母中表达,可用于漆酶的生产及染料脱色。
本发明涉及一种来源于死海盐杆菌的山梨醇脱氢酶基因及其应用。所述山梨醇脱氢酶基因采用人工方法合成,其核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示,其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO2所示。将该山梨醇脱氢酶基因采用农杆菌蘸花法转化拟南芥,结果发现该基因能成功的提高转基因拟南芥的耐盐功能,因此该基因能够广泛应用于植物耐受高盐胁迫中。
一种来自灰黄链霉菌的L-谷氨酸氧化酶基因及其制备方法和应用,所述L-谷氨酸氧化酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,全长2004bp,其编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明从土壤中筛选出一株产L-谷氨酸氧化酶的灰黄链霉菌,从该菌株中获得所述L-谷氨酸氧化酶基因的全长序列,得到核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的L-谷氨酸氧化酶基因,并利用基因合成方法合成出该L-谷氨酸氧化酶基因,大大降低了L-谷氨酸氧化酶从野生菌中提取的成本,提高了该L-谷氨酸氧化酶的催化活性,同时所述L-谷氨酸氧化酶底物专一性很强,能特异性地催化L-谷氨酸,可应用于L-谷氨酸含量检测,用于食品工业和临床生化检测领域。
本发明公开了一种具有更高耐热性能的极端嗜热古菌(Pyrococcus horikoshii)的热休克蛋白基因PhHSPS。所述经过突变的耐高温基因PhHSPS,其核苷酸序列如SEQ ID NO1所示,其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO2所示。将分子进化获得的突变热休克蛋白基因转化大肠杆菌,发现该突变热休克蛋白基因能显著的提高大肠杆菌的耐热能力,因此该基因能够应用于细菌耐高温菌株的构建。