本发明提供一种非洲猪瘟病毒基因工程亚单位口服疫苗,其中包含有用于重组表达非洲猪瘟病毒抗原蛋白的基因工程乳酸乳球菌,所述的抗原蛋白是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的ASFV p30蛋白、氨基酸序列为SEQID NO:3的ASFV p54蛋白或氨基酸序列为SEQ ID NO:5的ASFV p72蛋白。所述的抗原蛋白连接有大肠埃希氏菌不耐热肠毒素B亚单位LTB基因蛋白。本发明的非洲猪瘟病毒基因工程亚单位口服疫苗可有效地刺激肠道局部免疫细胞产生分泌型IgA,刺激机体产生黏膜反应,通过血液循环,进而刺激机体产生细胞免疫和体液免疫。