本发明属于生物技术领域,具体涉及一种O‑琥珀酰巯基裂解酶突变体及其编码基因,以及在生物催化制备L‑蛋氨酸中的应用,所述突变体由SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第59位和/或第125位进行单点突变或多点突变获得。本发明的有益效果主要体现在:本发明提供了一种转化率高的OSHS突变体,以含OSHS突变体的重组菌的破碎粗酶液为催化剂,以O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸为底物,以甲硫醇钠为巯基供体,合成L‑蛋氨酸,工业成本较低;在最优体系下,对400~800mM底物的转化率达到80%~85%,与野生型的底物的转化率71%相比较,分别提高了13%~20%,且具备大规模应用的潜力,在L‑蛋氨酸的工业化生产中具有极高应用价值。
本发明涉及一种L‑泛解酸内酯脱氢酶、编码基因,含有编码基因的载体、基因工程菌,以及其在微生物催化制备酮基泛解酸内酯中的应用。所述L‑泛解酸内酯脱氢酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明挖掘的源自Pseudonocardia sp.73‑21的L‑泛解酸内酯脱氢酶具有严格的L‑立体选择性,本发明构建的重组大肠杆菌表达L‑泛解酸内酯脱氢酶具有良好的溶解性,避免了L‑泛解酸内酯脱氢酶异源表达容易形成大量包涵体的问题。本发明提供的L‑泛解酸内酯脱氢酶在生物催化制备酮基泛解酸内酯/D‑泛解酸内酯中具有应用价值。