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[发明专利]葡萄砧木特异性分子标记及其筛选方法和应用-CN202110756537.0有效
发明人：吴永兴;谢魏魏;王晓菲;钟醒宇;黄晓毅 -专利权人：尼秀媚;周扬颜;山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-07-05 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了3种葡萄砧木特异性分子标记及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）提取叶片基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点，并对SNP进行过滤，以提高SNP的准确性；（4）根据每个品种的分型结果筛选3种葡萄砧木中至少有一个品种与其他两个品种不同的位点；（5）最终筛选到5842个鉴定3种葡萄砧木的SNP位点，在这些SNP位点当中，根据每个位点能够区分砧木的类别可以组合出几百组能够高效鉴别3种葡萄砧木的SNP位点标记群。本发明基于这些位点标记开发出两种简便、快速、可靠鉴定3种葡萄砧木的方法，为从源头准确控制葡萄品种奠定技术基础。
葡萄砧木特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]梨砧木特异性分子标记及其筛选方法和应用-CN202110746399.8有效
发明人：周扬颜;陈磊;刘帅;尼秀媚;吴永兴;宫文荣 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-07-01 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了3种梨砧木特异性分子标记及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点，并对SNP进行过滤，以提高SNP的准确性；（4）根据每个品种的分型结果筛选3种梨砧木中至少有一个品种与其他两个品种不同的位点；（5）根据上述筛选策略，最终筛选到782个鉴定3种梨砧木的SNP位点，在这些SNP位点当中，根据每个位点能够区分砧木的类别可以组合出几百组能够高效鉴别3种砧木的SNP位点标记群；基于这些位点标记开发出两种简便、快速、准确鉴定3种梨砧木的方法，为从源头准确控制梨品种奠定技术基础。
砧木特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]樱桃主栽品种特异性分子标记及其筛选方法和应用-CN202110894426.6有效
发明人：周扬颜;宫文荣;王晓菲;任志娜;陈磊;钟飞;尼秀媚 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-08-05 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了19种樱桃品种特异性分子标记及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点，并对SNP进行过滤，以提高SNP的准确性；（4）根据每个品种的分型结果筛选19种樱桃品种中至少有一个品种与其他品种不同的位点；（5）根据上述筛选策略，筛选到3751个SNP位点，在这些SNP位点当中，根据每个位点能够区分品种的类别可以组合出几千组能够高效鉴别19种樱桃品种的SNP位点标记群；（6）基于这些位点标记开发出两种简便、快速、可靠鉴定19种樱桃品种的方法，为从源头准确控制樱桃品种奠定技术基础。
樱桃品种特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]富士系列苹果特异性分子标记位点及其筛选方法和应用-CN202110693411.3有效
发明人：王彦娟;周扬颜;张欣;尼秀媚;吕金浮;刘永光;杨园园 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司;潍坊科技学院
申请日： 2021-06-22 - 公布日： 2022-12-27 - 主分类号： C12Q1/6809 文献下载
摘要：本发明公开了8种富士系列苹果特异性分子标记位点及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，筛选，验证，获得准确鉴定8种富士系列苹果的74个SNP标记位点；（4）在74个SNP标记位点当中筛选到几组能够高效鉴别8种富士系列苹果的SNP位点标记群；（5）基于这些位点标记群开发出一种简便、快速、准确鉴定8种富士系列苹果的PCR鉴定方法，为从源头准确控制苹果品种奠定技术基础。
富士系列苹果特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]苹果砧木特异性分子标记位点及其筛选方法和应用-CN202110536824.0有效
发明人：尼秀媚;王彦娟;钟醒宇;薛其勤;李美芹;刘晓明;杨园园 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司;潍坊科技学院
申请日： 2021-05-17 - 公布日： 2022-11-01 - 主分类号： C12Q1/6811 文献下载
摘要：本发明公开了6个矮化品种苹果砧木特异性分子标记位点及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，筛选，验证，获得准确鉴定6种苹果砧木的14096个SNP标记位点；（4）在14096个SNP标记位点当中，根据每个位点能够区分砧木的类别可以组合出几千组能够高效鉴别6种砧木的SNP位点标记群；（5）基于这些位点标记开发出两种简便、快速、准确鉴定6种矮化品种苹果砧木的方法，为确保科研部门、苗木繁育和果园种植企业准确识别、控制苹果砧木品种奠定技术基础。
苹果砧木特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]梨品种特异性分子标记及其筛选方法和应用-CN202110694322.0有效
发明人：毛伟;张英杰;吴永兴;厉龙飞;庞薇;刘帅;钟醒宇 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-06-22 - 公布日： 2022-09-27 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了12个梨品种特异性分子标记及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点，并对SNP进行过滤，以提高SNP的准确性；（4）根据每个品种的分型结果筛选12个梨品种中至少有一个品种与其他品种不同的位点；（5）根据上述筛选策略，最终筛选到4479个鉴定12个梨品种的SNP位点，在这些SNP位点当中，根据每个位点能够区分梨品种的类别可以组合出几千组能够高效鉴别12个梨品种的SNP位点标记群；（6）基于这些位点标记开发出两种简便、快速、可靠鉴定12个梨品种的方法，为确保科研部门、苗木繁育和果园种植企业准确识别、控制梨品种奠定技术基础。
品种特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]葡萄品种特异性分子标记及其筛选方法和应用-CN202110711960.9有效
发明人：钟醒宇;李经伟;毛伟;李晏;庞薇;王彦娟 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-06-25 - 公布日： 2022-09-27 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了11种葡萄品种特异性分子标记及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，（3）对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点，并对SNP进行过滤；（4）根据每个品种的分型结果筛选11种葡萄品种中至少有一个品种与其他两个品种不同的位点；（5）根据上述筛选策略，最终筛选到7532个鉴定11种葡萄品种的SNP位点，（6）基于这些位点标记开发出两种简便、快速、可靠鉴定11种葡萄品种的方法。本发明为从源头准确控制葡萄品种奠定技术基础，11种葡萄品种的组培苗、嫁接苗均能够准确的区分，确保育种企业对葡萄品种的把控，减少由于品种误差造成的经济损失。
葡萄品种特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]樱桃砧木特异性分子标记及其筛选方法和应用-CN202110812606.5有效
发明人：李晏;王晓菲;周扬颜;庞薇;李经伟 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-07-19 - 公布日： 2022-09-27 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了5种樱桃砧木特异性分子标记及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点，（4）根据每个品种的分型结果筛选5种樱桃砧木中至少有一个品种与其他品种不同的位点；（5）根据上述筛选策略，最终筛选到7134个鉴定5种樱桃砧木的SNP位点。本发明基于这些位点标记开发出两种简便、快速、可靠鉴定5种樱桃砧木的方法，为从源头准确控制樱桃品种奠定技术基础。5种樱桃砧木的组培苗、嫁接苗均能够准确的区分，为确保科研部门、苗木繁育和果园种植企业准确识别、控制樱桃砧木品种奠定技术基础。
樱桃砧木特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]一种抑制蓝莓果实内源基因表达的方法、系统与应用-CN202110414401.1有效
发明人：周扬颜;莫翱玮;陈文秀;孙卫健;许鹏昊;郭鹏 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-04-16 - 公布日： 2022-09-27 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明提供了一种抑制蓝莓果实内源基因表达的方法，包括：将经打孔的蓝莓果实浸入含有T‑DNA给体载体和TI辅助质粒的根癌农杆菌宿主菌和含有2‑(N‑吗啉)乙磺酸，氯化镁，乙酰丁香酮农杆菌侵染液组成的农杆菌侵染悬液，得混合物；将前述混合物放入压强为0.01‑0.085MPa发真空环境处理3‑15min。其中，T‑DNA给体载体中的RNAi表达盒含有具有表达元件的RNAi载体靶序列，具有表达元件的用于插入RNAi载体靶序列的位点，或者有具有表达元件的用于置换RNAi载体靶序列的DNA片段。前述方法能够有效地抑制蓝莓果实内源基因表达。
一种抑制蓝莓果实内源基因表达方法系统应用

[发明专利]一种蓝莓果实瞬时表达的方法、系统与应用-CN202110413253.1有效
发明人：周扬颜;莫翱玮;陈文秀;孙卫健;郭鹏;许鹏昊 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-04-16 - 公布日： 2022-09-23 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于蓝莓果实基因表达的方法，包括步骤：将蓝莓果实表面打孔得到经打孔的蓝莓果实；将经打孔的蓝莓果实浸入农杆菌侵染悬液，得到蓝莓果实侵染悬液混合物；将蓝莓果实侵染悬液混合物放入真空环境，得到经真空处理的蓝莓果实，真空环境的压强为0.01‑0.085MPa，处理时间为3‑15min；农杆菌侵染悬液包括重组农杆菌和农杆菌侵染液；重组农杆菌为含有T‑DNA给体载体和Ti辅助质粒的根癌农杆菌宿主菌；T‑DNA给体载体的T‑DNA片段中含有具有表达元件的目的基因；农杆菌侵染液中含有2‑(N‑吗啉)乙磺酸。本发明还公开了前述方法在蓝莓ACO1基因表达中的应用。
一种蓝莓果实瞬时表达方法系统应用

[发明专利]一种基于叶片诱导的银杏再生的方法-CN202210113345.2有效
发明人：周扬颜;王杰;张宪省;桑亚林 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司;山东农业大学
申请日： 2022-01-30 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于银杏再生的培养基组合，包括银杏叶片诱导愈伤培养基、银杏不定芽伸长培养基和银杏生根培养基；银杏叶片诱导愈伤培养基包括MS培养基、4‑8g/L琼脂、25‑32g/L蔗糖、0.08‑0.15mg/L IAA和0.06‑0.10mg/L IBA；银杏不定芽伸长培养基包括MS培养基、4‑8g/L琼脂、25‑32g/L蔗糖、0.25‑0.40mg/L IBA和0.06‑0.12mg/L玉米素；银杏生根培养基包括1/2MS培养基、4‑8g/L琼脂、25‑32蔗糖、0.20‑0.30mg/L IBA和0.2‑0.4mg/L NAA。本发明还公开了使用前述培养基组合的银杏再生的方法。
一种基于叶片诱导银杏再生方法

[发明专利]7种苹果品种特异性分子标记及其筛选方法和应用-CN202110620751.3有效
发明人：周扬颜;黄晓毅;厉龙飞;王彦娟;尼秀媚 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司;潍坊科技学院
申请日： 2021-06-03 - 公布日： 2022-08-02 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了我国大面积栽培的7种苹果主栽品种的特异性分子标记及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点，并对SNP进行过滤，以提高SNP的准确性；（4）根据每个品种的分型结果筛选7种苹果中至少有一个品种与其他品种不同的位点；（5）根据上述筛选策略，最终筛选到10个鉴定7种苹果的SNP位点；（6）基于这些位点标记开发出一种简便、快速、可靠鉴定7种苹果的PCR方法，7种苹果品种的鉴定方法对于我国传统苹果品种栽培模式继承和研究、新品种培育研究、资源保护、种苗繁育，以及我国老旧果园更新换代具有重要的应用价值。
苹果品种特异性分子标记及其筛选方法应用

[发明专利]一种杨树嫁接苗的制备方法-CN202110379746.8有效
发明人：周扬颜;郭鹏;陈文秀;莫翱玮;孙卫健;许鹏昊 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-04-08 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： A01G17/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种杨树嫁接苗的制备方法，步骤为：以毛白杨组织培养苗为砧木，砧木的切面与砧木茎秆纵轴之间的夹角为30°，以青杨组织培养苗为接穗，接穗的切面与接穗茎秆纵轴之间的夹角为30°，将接穗的切面与砧木的切面涂6‑BA水溶液后对接，通过嫁接套管固定接口处后在温室中培养。该方法制备的杨树嫁接苗成活率高，抗病力强。
一种杨树嫁接制备方法

[实用新型]一种植物组织培养苗炼苗装置-CN202220245944.5有效
发明人：周扬颜;王杰;张宪省;桑亚林 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司;山东农业大学
申请日： 2022-01-30 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种植物组织培养苗炼苗装置，包括培养瓶和干燥瓶，培养瓶用于容置植物组织培养苗，干燥瓶内部容纳有干燥剂，培养瓶和干燥瓶之间连接有第一通气管和第二通气管，培养瓶、第一通气管、干燥瓶、第二通气管和培养瓶依次连通并形成用于气体循环的通路。培养瓶中加水可以增加培养瓶中的湿度，干燥瓶中的干燥剂能够降低培养瓶中的湿度，该炼苗装置能够有效地用于植物组织培养苗炼苗，特别是调节培养瓶中的湿度。
一种植物组织培养苗炼苗装置

[发明专利]一种蓝莓内参基因及其引物和应用-CN202110387280.6有效
发明人：周扬颜;郭鹏;陈文秀;莫翱玮;孙卫健;许鹏昊 -专利权人： 山东大丰园农业有限公司
申请日： 2021-04-08 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于蓝莓内参基因的实时荧光定量PCR引物对，包括针对蓝莓actin7基因的PCR引物对和/或针对蓝莓TUB基因的PCR引物对。前述实时荧光定量PCR引物对中的引物特异性强，具有很高的稳定性、可靠性和重复性，为在ABA胁迫等逆境胁迫下蓝莓相关功能基因的精确定量研究提供有力支持，提高了研究的可靠性。
一种蓝莓内参基因及其引物应用

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