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[发明专利]基于发根农杆菌侵染和转分化实现的苹果遗传转化方法-CN202310161237.7在审
发明人：程志娟;王胤霖;张宪省;韩洁;桑亚林 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2023-02-24 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：基于发根农杆菌侵染和转分化实现的苹果遗传转化方法，包括如下操作：步骤1：取苹果叶片作为外植体；步骤2：将所述外植体使用含有转基因质粒的发根农杆菌菌液侵染，得侵染叶片；步骤3：将所述侵染叶片置于共培养培养基和选择培养基中，进行生根培养，得不定根；步骤4：将所述不定根置于含有吲哚‑3‑乙酸和噻苯隆的根生芽培养基中，进行生芽培养，得再生芽。该方法利用含有转基因质粒的发根农杆菌菌液侵染苹果叶片，经共培养培养基和选择培养基培养后，得到便于观察区分的转基因不定根，然后经过含有吲哚‑3‑乙酸和噻苯隆的根生芽培养基培养，得到转基因再生芽；该方法具有高遗传转化率，低嵌合体频率的优点。
基于发根杆菌侵染分化实现苹果遗传转化方法

[发明专利]一种转抗虫基因窄冠黑杨11号的遗传转化方法-CN202010897942.X有效
发明人：李际红;邢世岩;桑亚林;王锦楠;王如月;国浩平;侯丽丽;王宝锐 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2020-08-31 - 公布日： 2023-03-17 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种转抗虫基因窄冠黑杨11号的遗传转化方法，属于植物基因工程技术领域。本发明的遗传转化方法包括：外植体选择及预培养、农杆菌侵染、诱导培养形成组培苗等过程，利用本发明的遗传转化方法可在短时间内培育出大量优质的抗蛀干害虫窄冠黑杨11号新品系，不仅可以缩短转化时间，提高遗传转化效率，而且转化体系稳定，不受时间和季节的影响，可以大批量的为华北地区培育生产具有抗蛀干害虫性能的优良黑杨品系。
一种转抗虫基因窄冠黑杨 11 遗传转化方法

[发明专利]一种基于叶片诱导的银杏再生的方法-CN202210113345.2有效
发明人：周扬颜;王杰;张宪省;桑亚林 -专利权人：山东大丰园农业有限公司;山东农业大学
申请日： 2022-01-30 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于银杏再生的培养基组合，包括银杏叶片诱导愈伤培养基、银杏不定芽伸长培养基和银杏生根培养基；银杏叶片诱导愈伤培养基包括MS培养基、4‑8g/L琼脂、25‑32g/L蔗糖、0.08‑0.15mg/L IAA和0.06‑0.10mg/L IBA；银杏不定芽伸长培养基包括MS培养基、4‑8g/L琼脂、25‑32g/L蔗糖、0.25‑0.40mg/L IBA和0.06‑0.12mg/L玉米素；银杏生根培养基包括1/2MS培养基、4‑8g/L琼脂、25‑32蔗糖、0.20‑0.30mg/L IBA和0.2‑0.4mg/L NAA。本发明还公开了使用前述培养基组合的银杏再生的方法。
一种基于叶片诱导银杏再生方法

[实用新型]一种植物组织培养苗炼苗装置-CN202220245944.5有效
发明人：周扬颜;王杰;张宪省;桑亚林 -专利权人：山东大丰园农业有限公司;山东农业大学
申请日： 2022-01-30 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本实用新型提供了一种植物组织培养苗炼苗装置，包括培养瓶和干燥瓶，培养瓶用于容置植物组织培养苗，干燥瓶内部容纳有干燥剂，培养瓶和干燥瓶之间连接有第一通气管和第二通气管，培养瓶、第一通气管、干燥瓶、第二通气管和培养瓶依次连通并形成用于气体循环的通路。培养瓶中加水可以增加培养瓶中的湿度，干燥瓶中的干燥剂能够降低培养瓶中的湿度，该炼苗装置能够有效地用于植物组织培养苗炼苗，特别是调节培养瓶中的湿度。
一种植物组织培养苗炼苗装置

[发明专利]树木的通用分子标记引物及其联合开发方法和应用-CN201710614076.7有效
发明人：杨龙;桑亚林;夏信瑶;栾琳琳 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2017-07-25 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种树木的通用分子标记引物及其联合开发方法和应用，其中，本发明采用三种分子标记联合开发的方法，规避了单一分子标记的局限性，如SSR序列两侧序列种间保守性较低，这大大限制了SSR标记在其他物种中的利用，ILP标记和IP仅存于染色体基因区段，对于其他非编码区间则不能使用该方法，多种分子标记方法的联合使用将每种标记的优势相结合，结果更加客观；采用本发明的方法获得的树木的SSR、ILP和PIP通用分子标记引物，不仅克服了目前树木分子标记较少、标记通用性较低、树木品种难以区分的问题，而且还可以提高树木品种鉴定结果的准确性。
树木通用分子标记引物及其联合开发方法应用

[发明专利]一种美洲黑杨鲁林1号的组培快繁方法-CN202010146771.7在审
发明人：李际红;邢世岩;桑亚林;王锦楠;国浩平;侯丽丽;王如月 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2020-03-05 - 公布日： 2020-05-26 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种美洲黑杨鲁林1号的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)取美洲黑杨鲁林1号的枝条进行水培，以萌发的新茎段作为外植体，接种于茎段不定芽诱导培养基中；(2)待外植体长出不定芽后，将其接种至不定芽继代增殖培养基中，诱导不定芽的继代增殖；(3)以不定芽继代增殖所产生的不定芽叶片为材料，接种到叶片再生不定芽培养基中，进行不定芽的诱导；(4)待不定芽长到2.5‑3.5cm时，接种至生根培养基中；(5)将生根苗进行炼苗、移栽。利用本发明的方法繁殖美洲黑杨鲁林1号，可以降低污染率，提高美洲黑杨的生物产量，并且具有很强的工厂化生产能力，可在短时间内为美洲黑杨鲁林1号的遗传转化实验提供大量优质的实验材料。
一种美洲黑杨鲁林组培快繁方法

[发明专利]一种基于顶端分生组织转分化的林木芽再生方法-CN201910101703.6有效
发明人： 桑亚林;张宪省;程志娟;费芳芳;左芸;孟文静 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2019-01-31 - 公布日： 2019-10-29 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于顶端分生组织转分化的林木芽再生方法，包括以下步骤：(1)取林木组培苗的根为外植体，将外植体在含有生长素NAA的B5培养基中培养20‑26h；(2)将步骤(1)培养后的外植体转入含有细胞分裂素2‑IP的B5培养基中培养10‑14天；(3)将步骤(2)培养后的外植体转入含有细胞分裂素6‑BA的MS培养基中培养14‑18天，获得再生芽。本发明的林木芽再生方法不经过愈伤组织阶段直接形成茎端分生组织，从而产生再生芽，因此适用于建立研究植物细胞命运决定、谱系转变等科学问题的实验体系，适用于难以形成具有再生能力愈伤组织的物种建立芽再生体系，进而进行离体快繁、遗传转化或其他生物技术操作。
外植体林木顶端分生组织细胞分裂素再生芽再生生长素转入愈伤组织阶段分化分生组织科学问题离体快繁实验体系细胞命运研究植物遗传转化愈伤组织再生能力再生体系直接形成组培苗生物技术物种

[发明专利]一种窄冠黑杨11号的组培快繁方法-CN201910646506.2在审
发明人：李际红;邢世岩;桑亚林;国浩平;侯丽丽;王宝锐;周文玲 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2019-07-17 - 公布日： 2019-09-27 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种窄冠黑杨11号的组培快繁方法，采用窄冠黑杨11号春枝温室水培得到外植体，在添加6‑BA 0.5‑1.5mg/L、NAA 0.02‑0.1mg/L的MS培养基中，通过器官再生方式获得窄冠黑杨11号无菌瓶苗。取瓶苗叶片在添加6‑BA 0.2‑0.3mg/L、NAA 0.03‑0.07mg/L、GA 0.1mg/L的MS培养基中诱导叶片分化，在添加6‑BA 0.1‑0.5mg/L、NAA 0.07‑0.35mg/L、GA 0.5‑1.0mg/L的MS培养基中诱导不定芽增殖，无根苗在添加NAA 0‑0.3mg/L、IBA 0‑0.3mg/L的1/2MS培养基中完成不定根的诱导。
冠黑诱导组培快繁叶片不定芽增殖器官再生培养基不定根外植体无菌瓶瓶苗水培分化温室

[发明专利]一种集水洗盐保水提高滨海盐碱地速生树种造林成活率的方法-CN201511035397.9有效
发明人：秦光华;宋玉民;乔玉玲;姜岳忠;桑亚林;马风云;康智;董玉峰;王卫东;韩跃;于振旭;盖文杰;边清福 -专利权人：山东省林业科学研究院
申请日： 2015-12-30 - 公布日： 2018-11-06 - 主分类号： A01G17/00 文献下载
摘要：本发明为一种集水洗盐保水提高滨海盐碱地速生树种造林成活率的方法，包括步骤一、台田修筑：在造林头一年雨季前将拟造林地段进行挖土垫高形成东西向的台田和排水沟，台田长为50‑100m，宽20‑50m，高于地表面1‑1.5m，排水沟低于地表面1‑1.5m，四周修筑围堰，围堰高0.8‑1.2m，宽0.5‑1.0m。本发明的有益效果是：由于台田较小，便于施工，通过集水在半年到一年内就能迅速降低土壤盐分含量，洗盐速度快。全面覆膜可以有效降低土壤水分蒸发，防止盐分上升，保证洗掉的盐分不会再上升到地表层中，同时能够保水和抑制杂草生长，对于耐盐能力较差、需水量较大的黑杨、柳树和榆树苗木的成活效果显著，能够显著解决盐碱地区黑杨、柳树、榆树造林难的问题。
一种集水洗盐保水提高滨海盐碱地速生树种造林成活率方法

[发明专利]一种节水灌溉提高裸根苗造林成活率的栽植方法-CN201511035396.4有效
发明人：秦光华;乔玉玲;宋玉民;姜岳忠;桑亚林;刘风栾;康智;董玉峰;王卫东;韩跃;于振旭 -专利权人：山东省林业科学研究院
申请日： 2015-12-30 - 公布日： 2018-09-28 - 主分类号： A01G17/00 文献下载
摘要：本发明一种节水灌溉提高裸根苗造林成活率的栽植方法，包括以下步骤，步骤一、树种选择：选择树种：黑松、侧柏、榆树、刺槐、黄栌、白蜡任一种均可；步骤二、挖栽植穴：根据造林地类型和苗木规格确定栽植穴形状和规格，平原地区一般为圆台形，非盐碱地区规格适当大些，上面直径为60cm‑80cm，下面直径为40cm‑60cm，深度60cm‑80cm；平原盐碱地区规格：上面直径50cm‑60cm，下面直径40cm‑50cm，深度为50cm‑60cm；本发明保证有限的水分集中于苗木根系周围，并且不易蒸发散失，帮助解决苗木成活关键期间的根系水分供应，同时减少了杂草对土壤水分和养分的竞争，为苗木根系的成活和生长提供了理想的小环境，保证造林成活率，解决缺水地区造林灌溉成本高、造林成活率低的问题。
一种节水灌溉提高根苗造林成活率栽植方法

[发明专利]一种改进柳树切枝人工杂交的方法-CN201511035395.X有效
发明人：乔玉玲;秦光华;宋玉民;姜岳忠;康智;桑亚林;韩跃;于振旭;刘凤栾 -专利权人：山东省林业科学研究院
申请日： 2015-12-30 - 公布日： 2018-06-22 - 主分类号： A01G31/00 文献下载
摘要：本发明提供一种改进柳树切枝人工杂交的方法，包括下列步骤：(1)花枝的采集与处理：选择生长健壮、无病虫害、壮龄期的优良单株作为亲本，于2月初花芽开始膨大前，在已选好的母树上，从树冠中上部剪取直径1‑2.5cm、长1m带有花芽的枝条；枝条采下后，雄花枝进行温室内水培；雌花枝置于阴凉处水培，室内温度在8‑11℃，相对湿度40‑50％，3‑5天后移入温室与雄花枝同时水培。本发明方法切枝水培诱导生根后土培法，是在水培出现根原基后移入带营养土的花盆中，土培生根的花枝只是在需要时给花盆浇少量水，可减少水培的修剪、清洗和换水等工作，省工省时。
水培花枝切枝花芽人工杂交花盆枝条后移柳树阴凉温室选择生长优良单株诱导生根雌花枝根原基营养土换水剪取龄期膨大亲本省工省时土培树冠修剪病虫害改进清洗生根采集室内

[发明专利]一种利用苗木侧枝提高扦插繁殖系数的方法-CN201511035394.5在审
发明人：秦光华;乔玉玲;宋玉民;姜岳忠;桑亚林;刘凤栾;康智;董玉峰;王卫东;韩跃;于振旭 -专利权人：山东省林业科学研究院
申请日： 2015-12-30 - 公布日： 2016-04-20 - 主分类号： A01G17/00 文献下载
摘要：本发明一种利用苗木侧枝提高扦插繁殖系数的方法，步骤一、树种选择：选择侧枝较多、扦插繁殖容易的树种如杨树、柳树、榆树、白蜡；步骤二、插穗制取和处理：选择1-2年生的上述树种的健壮苗木上直径0.3-1.5cm已经木质化的侧枝枝段，截取制成6-12cm长的插穗，每个插穗顶部保留至少1个叶芽；将截取好的插穗置于400-500mg.kg^-1的GGR6溶液中浸泡1-2小时；本发明保证有限的水分集中于苗木根系周围，并且不易蒸发散失，解决苗木成活关键期间的根系水分供应，同时减少杂草对土壤水分和养分的竞争，为苗木根系的成活和生长提供了理想环境，保证造林成活率，解决缺水地区造林灌溉成本高、造林成活率低的问题。
一种利用苗木侧枝提高扦插繁殖系数方法

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