本发明提供了一种融合蛋白,其从N端到C端依次包括:SEC2或其突变体、连接短肽和iRGD,所述突变包括1~5个氨基酸的缺失、插入和/或取代,所述SEC2的氨基酸序列如SEQ ID NO:31所示,所述连接短肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:29所述,所述iRGD的氨基酸序列如SEQ ID NO:30所示。本发明还提供了该融合蛋白的制备方法和应用。本发明的靶向性融合蛋白可特异性靶向并浸润到肿瘤组织微环境,大幅度提升了超抗原的肿瘤特异性和血管通透性,提高了对肿瘤的杀伤效率,从而用于治疗患者时可有效提高患者的存活能力,具有良好的临床应用价值。