本发明涉及分子生物学技术领域，公开了一种突变型DNA聚合酶及其制备方法与应用，该突变型DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，该氨基酸序列是在野生型FWT聚合酶的基础上突变得到，其突变位点包括：第80位的丙氨酸突变为精氨酸、第107位的天冬酰胺突变为天冬氨酸、第172位的谷氨酸突变为精氨酸、第325位的天冬酰胺突变为天冬氨酸、第423位的天冬氨酸突变为丙氨酸、第490位的丝氨酸突变为丙氨酸、第491位的苯丙氨酸突变为丙氨酸。该突变型DNA聚合酶在室温条件下具有相比于野生型更好的持续合成、链置换以及耐高盐能力，是滚环扩增和多重置换扩增的理想工具。
本发明公开了突变型PWT聚合酶及其制备方法与应用，涉及生物技术领域。该突变型PWT聚合酶具有A1)至A2)中的任一种：A1)、如SEQ ID NO.1的第407至986位氨基酸所示的氨基酸序列；A2)、在A1)所示的氨基酸序列的N端或/和C端连接标签得到的氨基酸序列。其可以在室温条件下进行明显的等温扩增并且能够耐受较高的盐浓度，它有望成为滚环扩增和多重置换扩增的理想工具。
