本发明公开了一种抑肝癌增殖蛋白表达载体的构建及其抑制肝癌细胞增殖的应用;其中,一种抑肝癌增殖蛋白的构建的序列,其包括,蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1;cDNA,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2;一种抑肝癌增殖蛋白的表达方法,其包括,提取编码核酸序列的合成,以限制性内切酶酶切与pcDNA3.1‑Flag真核表达载体经T4连接酶作用下重组,获得重组表达质粒;将所述重组表达质粒脂质体导入人肝癌细胞系,即可。本发明利用多种功能手段分析其对人肝癌细胞增殖的拮抗作用。在细胞生物学层面证明了此蛋白具有抑制肝癌细胞增殖的重要功能。