本发明提供了一种NEB二代建库试剂盒的简单使用方法和浅层测序文库的构建方法,属于基因测序技术领域,包括:采用NEB二代建库试剂盒对样品的DNA进行末端修饰;将末端修饰DNA与NEB二代建库试剂盒中的NEB Next Ultra II Ligation Master Mix、NEB Next Ligation Enhancer、NEB Next Adaptor和USER Enzyme混合,将混合物进行离心,得到离心产物。采用本发明提供的使用方法,简化了NEB二代建库试剂盒在构建浅层测序文库时的步骤,具有缩短时间、节约仪器、降低成本的作用。