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[发明专利]一种羌活种子组培繁育方法-CN202111634123.7有效
发明人：丰先红;张利;苏娜;杨瑞武;姜媛媛;倪甦;廖进秋;王龙;雷高;赵艳妮 -专利权人：甘孜藏族自治州农业科学研究所;四川农业大学
申请日： 2021-12-29 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于羌活种子组培繁育的培养基及羌活种子组培繁育方法。经试验验证，通过本发明羌活种子组培繁育方法得到的组培苗，移栽后的成活率达到了90％以上，为羌活的大量扩繁打下了坚实的基础，具备推广应用价值。
一种羌活种子繁育方法

[发明专利]一种大花红景天快速繁殖的方法-CN202211362068.5有效
发明人：程康;张金家;尹雅婷;吕智;赵淑娟;刘睿敏 -专利权人：上海相宜本草化妆品股份有限公司
申请日： 2022-11-02 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速培养大花红景天温室苗的方法。该方法包括以下步骤：(1)种子萌发获得大花红景天无菌苗；(2)进行种子萌发的无菌苗培养；(3)无菌苗叶片外植体再生成完整小植株；(4)再生小植株移栽到温室；(5)温室苗培育；(6)温室苗茎段再生成完整植株。本发明还提供了一种用于快速培养大花红景的联合用培养基。本发明克服了现有大花红景天组织培养依赖种子萌发的繁殖周期长、难以由愈伤组织再生成苗、繁殖率低等缺点和不足。
一种花红景天快速繁殖方法

[发明专利]一种罗汉果悬浮细胞放大培养的方法-CN201810735585.X有效
发明人：郭美锦;宋云飞;李佳瑞;王泽建;庄英萍;杨文国;蒋治舟 -专利权人：华东理工大学;桂林莱茵生物科技股份有限公司
申请日： 2018-07-06 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供一种罗汉果悬浮细胞放大培养的方法，所述方法在罗汉果悬浮细胞放大培养的过程中，加入苯丙氨酸、茉莉酮酸甲酯和甜菜碱中的两种或两种以上。本发明克服了现有的罗汉果悬浮培养停留在摇瓶水平，细胞产量较低，无法进行规模化培养的缺点，并筛选得到了最优化的促进产物合成的优化培养基和添加工艺，大幅度提升了罗汉果甜苷V的合成速率，为之后更大规模的罗汉果细胞悬浮培养提供一定的技术方法和基础。
一种罗汉果悬浮细胞放大培养方法

[发明专利]一种莲叶片原生质体的制备方法及试剂盒-CN202310187465.1在审
发明人：杨星宇;梁玉婷;张思思;李娜;王宁迪;曾宪沂;李苗;刘淑超;王建强;章晓琴;康凯丽;于静亚 -专利权人：武汉市园林科学研究院
申请日： 2023-02-28 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种莲叶原生质体的制备方法及试剂盒。以莲刚展开的幼嫩针叶作为材料，通过调节酶解体系、洗涤体系和纯化方法，建立莲叶原生质体制备体系。酶解液体系中1％纤维素酶、0.5％果胶酶、0.5％离析酶复配的酶解效果好；MES、山梨醇和KCl复配，可保证原生质体游离出来时外部介质与细胞本身的渗透势相同，维持原生质体的活力；CaCl2和BSA复配，能够维持原生质体膜的完整性，防止原生质体受到酶解液中蛋白水解酶的破坏，采用26％蔗糖溶液能维持原生质体渗透压稳定。该方法制备得到的原生质体数量多，活性高，且背景纯净。可以直接用于单细胞测序，为探究莲异形叶分子细胞生物学研究和发育的分子机制提供了重要基础。
一种莲叶原生质体制备方法试剂盒

[发明专利]月季细胞的快速悬浮培养方法和高效遗传转化方法-CN202211026025.X在审
发明人：马男;王成鹏;周晓锋;高俊平;程晨霞;李扬;王娜;俞芹 -专利权人：中国农业大学;山东省农业科学院
申请日： 2022-08-25 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种月季细胞的快速悬浮培养方法和高效遗传转化方法，月季细胞的快速悬浮培养方法包括(1)愈伤组织的诱导；(2)悬浮细胞的制备；(3)悬浮细胞的继代培养与保存；一种月季细胞的高效遗传转化方法包括(1)使用月季细胞的快速悬浮培养方法获得的月季悬浮细胞；(2)载体转化农杆菌；(3)农杆菌侵染月季悬浮细胞；(4)对已转染的悬浮细胞进行共培养和筛选培养；(5)遗传转化结果检测。本发明解决了现有技术尚未建立月季悬浮细胞遗传转化体系的问题，能在短时间快速培养大量的月季悬浮细胞，高效遗传转化月季悬浮细胞，快速实现在月季本体进行基因功能验证、亚细胞定位、蛋白表达、合成生物学研究等。
月季细胞快速悬浮培养方法高效遗传转化

[发明专利]一种咖啡体胚培养基-CN202210365160.0有效
发明人：张连娟;林亮;万阳;袁万立;张方圆 -专利权人：云南龙藏生物科技有限公司
申请日： 2022-04-08 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种咖啡体胚培养基。所述咖啡体胚培养基包括分化成熟培养基、萌发培养基；所述的分化成熟培养基以每升计算，其制备方法为：在WPM培养基母液加入2.26～4.52μmol的NAA、7.76～9.84μmol的6‑BA、1.33～4.65μmol的GA3和30～90g的蔗糖后用水定容至于一升，调节PH值为5.8～6.0后加入3～9g的卡拉胶；所述萌发培养基以每升计算，其制备方法为在WPM培养基母液加入4.92～12.76μmol的KT和30g的蔗糖后用水定容至于一升，调节PH值为5.8～6.0后加入0～3g的活性炭和3g的卡拉胶。本发明所述的咖啡体胚培养基具有在咖啡体胚培养再生过程中降低体胚畸形率、提高体胚成熟率和萌发成苗率的优点。
一种咖啡培养基

[发明专利]牡丹干细胞在皮肤修复以及抗衰老护肤品中的应用-CN202210784081.3在审
发明人：朱源源 -专利权人：广州金天芳颜化妆品有限公司
申请日： 2022-07-05 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本申请公开了牡丹干细胞在皮肤修复以及抗衰老护肤品中的应用，并公开了一种包含牡丹干细胞以及冻存液的牡丹干细胞冻存液。该所述冻存液包含8～15wt％植物白蛋白、2～2.5wt％甘露醇和1～10wt％二甲基亚砜的植物干细胞完全液体培养基。本申请还通过对分离的牡丹干细胞进行多次继代培养和添加不同的独特培养基以补充干细胞所需营养的技术，使得得到的牡丹干细胞具有表达SOD、CAT和PRX相关的性能，使其具有促进角质形成细胞的迁移和角质形成细胞分化相关基因表达，拓展了其在治疗或保健与皮肤疾病及伤口愈合、以及抗衰老应用中具有潜在的应用价值。
牡丹干细胞皮肤修复以及衰老护肤品中的应用

[发明专利]一种柔毛淫羊藿愈伤组织悬浮培养方法-CN202210459876.7有效
发明人：张连娟;林亮;万阳;袁万立;张权;张方圆 -专利权人：云南龙藏生物科技有限公司
申请日： 2022-04-28 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种柔毛淫羊藿愈伤组织悬浮培养方法，其以柔毛淫羊藿叶片为外植体，经过诱导脱分化得到胚性愈伤组织并对其增殖培养得到柔毛淫羊藿胚性细胞团后，对所述胚性细胞团进行悬浮培养，并在悬浮培养过程中添加浓度为0.4～1.0g/L的酵母提取物。本发明具有生产周期短、培养产物生物量大且总黄酮含量高的优点。
一种柔毛淫羊藿组织悬浮培养方法

[发明专利]甘蔗幼叶不同发育时期原生质体分离及提取方法-CN202110953590.X有效
发明人：李素丽;罗培四;朱水芳;韩世健 -专利权人：广西大学
申请日： 2021-08-16 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供甘蔗幼叶不同发育时期原生质体分离及提取方法，属于植物组织和细胞培养技术领域。本发明的方法包括预处理、酶解和分离纯化的步骤，其中酶解分两次进行，第一次酶解后过筛，对沉淀进行洗涤、悬浮得到纯化后的分化初期细胞，第一次悬浮取完环形原生质体带后，将离心管中的沉淀再次洗涤、悬浮得到纯化后的分生细胞，第一次酶解后的上部酶解液对筛网上的幼叶残渣进行第二次酶解，过筛后对沉淀进行洗涤、悬浮得到纯化后的成熟期细胞。本发明可以获取不同类型细胞的原生质体，各种类型的细胞之间差异较大，而同种类型的细胞之间的同质性良好，可用于进一步探索不同类型细胞相应的培养条件，避免了各类细胞统一培养存在的弊端。
甘蔗不同发育时期原生质体分离提取方法

[发明专利]枸杞细胞外囊泡制备方法及其应用-CN202211726005.3在审
发明人：陈海佳;张敏;岳坤;姜交华;陈伟霖;张兆清 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司;广州赛莱拉生物基因工程有限公司;广东省赛莱拉干细胞研究院
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及生物工程领域，尤其涉及枸杞细胞外囊泡制备方法及其应用。本发明提供了枸杞细胞外囊泡制备方法及其应用，该方法包括匀浆、过滤、离心分离上清液和浓缩的步骤。本发明提供的制备枸杞细胞外囊泡的方法操作流程简单，纯度高，整体形态良好，且具有良好的生理功能。
枸杞细胞泡制方法及其应用

[发明专利]马尾松胚性细胞培养基及细胞成熟培养方法-CN202310148685.3在审
发明人：姚瑞玲;王胤 -专利权人：广西壮族自治区林业科学研究院
申请日： 2023-02-22 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及生物领域，马尾松胚性细胞培养基及细胞成熟培养方法，本申请根据继代次数和增殖系数的研究实验，精确选取适合进行组织培养的马尾松胚性细胞；将马尾松的组织培养分成预培养、成熟培养和后熟培养三个步骤，然后通过筛选和优化，获取能有效还原清除ROS的还原剂，通过组分优化获得适合马尾松胚性细胞生长的预培养培养基、成熟培养基和后熟培养基，使得马尾松胚性细胞成熟效果显著改善形成了一套高效的马尾松体胚育苗技术体系。
马尾松细胞培养基成熟培养方法

[发明专利]一种快速提取高纯度大白菜原生质体的方法-CN202211700831.0在审
发明人：孙晓雪;卢银;秦瑞鑫;赵建军 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2022-12-28 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种快速提取高纯度大白菜原生质体的方法，属于植物细胞技术领域，包括以下步骤：将大白菜叶片经酶解液酶解，得到原生质体悬浮液；将原生质体悬浮液过滤、离心，得到原生质体；将原生质体经CPW溶液悬浮，得到悬浮液，将所述悬浮液添加到蔗糖溶液上部后离心，获取绿色中间层；所述蔗糖溶液中蔗糖的质量百分含量为20％；将绿色中间层经CPW溶液悬浮、离心，得到原生质体，将得到的原生质体重悬于CPW溶液，得到高纯度大白菜原生质体。采用本发明提供的蔗糖浓度能有效减少原生质体混合物中的杂质和细胞碎片，从而获得高纯度的原生质体，为后续开展原生质体再生、培养、测序等后续相关试验提供良好基础。
一种快速提取纯度大白菜原生质体方法

[发明专利]一种含氨基酸复合液用于荔枝离体再生的产品及方法与应用-CN202111336689.1有效
发明人：王果;王家保;刘耀婷;李焕苓;王树军;李芳;高兆银 -专利权人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
申请日： 2021-11-12 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种含氨基酸复合液用于荔枝离体再生的产品及方法与应用。本发明荔枝离体再生的方法，包括下述步骤：以荔枝花药为外植体，经愈伤组织诱导、增殖培养、体胚诱导培养、成熟培养萌发培养，得到再生荔枝植株；其中，增殖培养、体胚诱导培养分别采用含有氨基酸复合液AMO1的愈伤组织增殖培养基和含有氨基酸复合液AMO2的体胚诱导培养基。本发明提供荔枝离体再生的方法通过添加氨基酸复合液优化了愈伤组织增殖培养基和体胚诱导培养基的组分，特别是氨基酸种类及含量，从而优化体胚质量，提高愈伤组织增殖率、体胚诱导率，促进体胚萌发。
一种氨基酸复合用于荔枝再生产品方法应用

[发明专利]一种生姜外泌体的制备方法-CN202310068158.1在审
发明人：郑磊;操雅棋;颜玲;殷李芬;刘长虹 -专利权人：合肥工业大学
申请日： 2023-02-06 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种生姜外泌体的制备方法及应用，属于生物技术领域。制备操作如下：（1）将生姜去皮洗净，切成小块状，榨汁并将汁液分离；（2）采用差速高速离心法，将收集的汁液在4℃下差速高速离心分离，去除沉淀；结合聚乙二醇沉淀法，将上清液加入相应量的聚乙二醇溶液，旋涡混匀，在4℃下孵育、离心、沉淀纳米颗粒；（3）将纳米颗粒悬浮，过滤，纯化柱纯化，收集纯化液，即得到生姜外泌体。生姜外泌体的粒径为120～192 nm，生姜外泌体的表面负电荷为‑31.6～‑21.6 mV，生姜外泌体的蛋白浓度为2391.43±750 ng/μL。生姜外泌体在肠细胞中的有效内化作用主要与巨胞饮和小窝蛋白介导的内吞作用相关，有效抑制LPS诱导的肠细胞中NF‑κB和炎症细胞因子的过度表达，有望抑制或缓解肠道炎症。
一种生姜外泌体制备方法

[发明专利]一种利用石斛悬浮原球茎生产石斛酚的方法-CN202211714635.9在审
发明人：颜沛沛;叶炜;江金兰;王培育 -专利权人：三明市农业科学研究院
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用石斛悬浮原球茎生产石斛酚的方法，其是通过筛选获得高石斛酚含量的石斛悬浮原球茎，然后将其经诱导、继代与增殖、生物反应器连续培养后，收集培养产物并进行石斛酚的提取。本发明可以实现石斛酚的工厂化生产，其具有生物产量大、石斛酚含量稳定可控、节省人工、不受时空季节影响的特点，同时，通过优化的培养基，可有效提高石斛鲜品中石斛酚的含量。
一种利用石斛悬浮球茎生产方法