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[发明专利]一种细胞免污染培养方法-CN202111110793.9在审
发明人：周溪桥 -专利权人：周溪桥
申请日： 2021-09-23 - 公布日： 2021-12-24 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及细胞培养领域，更具体的说是一种细胞免污染培养方法。包括以下步骤：S1：将细胞培养装置中的培养皿周围放置酒精灯；S2：将酒精灯点燃，并且使酒精灯以弧形轨迹绕着培养皿往复移动；S3：将细胞放入培养皿，使用PBS缓冲液冲洗细胞，使得细胞分散；S4：在培养皿中加入培养基培养细胞。本发明在培养细胞时可以免污染。所述细胞培养装置包括半圆轨、托座和滑座，托座的下侧设置有滑座，滑座上放置有酒精灯，滑座滑动连接在半圆轨。所述细胞培养装置还包括电机和摩擦轮，滑座上固定连接有电机，电机的输出轴上固定连接有摩擦轮，摩擦轮与半圆轨摩擦传动。
一种细胞污染培养方法

[发明专利]基于数控激光辐射的非入侵式的细胞成图案方法及系统-CN202010223462.5有效
发明人：胡文治;张翠萍;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院第四医学中心
申请日： 2020-03-26 - 公布日： 2021-12-24 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于数控激光辐射的非入侵式的细胞成图案方法及系统。该方法包括：通过在无血清培养基添加低密度脂蛋白进行细胞培养，得到体外培养细胞；利用调节后的数控激光辐射所述体外培养细胞，得到辐射后细胞；利用胰蛋白酶消化洗脱所述辐射后细胞，继续培养体外培养细胞，得到体外成图案的图像；采集所述体外成图案的图像。本发明能够有效避免外界环境的污染，减轻对细胞的损伤，提高成图案精度。
基于数控激光辐射入侵细胞图案方法系统

[发明专利]一种从牛、驴皮肤中提取基质凝胶的方法-CN202110969176.8在审
发明人：张志平;贺来增;张君涛;邓立新;赵英博;石亚珂;王新卫;董海聚 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2021-08-23 - 公布日： 2021-12-21 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开一种从牛、驴皮肤中提取基质凝胶的方法，涉及生物材料技术领域。基质凝胶是从细胞外基质中提取的一种可溶性基底膜基质，可作为细胞三维培养的生物支架材料，用于细胞三维培养的基质凝胶能够更好的模拟细胞的体内生长环境，使细胞更好的发挥其功能和特性。基质凝胶的特点是在4℃为水溶液，在37℃为凝胶。本发明属于生物技术领域，试验以3‑6月龄胎牛的皮肤为研究对象，从中提取基质凝胶，目的是为了建立并验证所提凝胶在细胞三维培养方面的作用，为细胞和类器官的三维培养筛选出更为优良的生物材料。
一种皮肤提取基质凝胶方法

[发明专利]一种自供能的人造细胞模型的制备方法-CN202111234161.3在审
发明人：韩晓军;李超 -专利权人：哈尔滨工业大学
申请日： 2021-10-22 - 公布日： 2021-12-21 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：一种自供能的人造细胞模型的制备方法，属于细胞模型制备技术领域。本发明主要是采用乳液法把从细胞中提取出的线粒体包裹磷脂囊泡中，使用蜂毒素在磷脂膜表面打孔后，外加的丙酮酸进入到囊泡内部，刺激线粒体产生三磷酸腺苷(ATP)。该方法制备的细胞模型可以利用荧光显微镜表征，产生的ATP可用酶标仪检测。该模型可用于研究细胞内部的工作机制及为复杂细胞模型的构建提供新的思路。
一种自供人造细胞模型制备方法

[发明专利]提升线粒体功能的培养方法及其使用的组合物-CN202010548635.0在审
发明人：许智凯;刘思廷;凃启堂;郑汉中 -专利权人：台湾粒线体应用技术股份有限公司
申请日： 2020-06-16 - 公布日： 2021-12-17 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明揭露一种提升线粒体功能的培养方法及其使用的组合物，其能够用于调控细胞内线粒体的能量转换及消耗的路径，而具有提升细胞能量转换效率的用途。更进一步来说，通过本发明所揭组合物培养已分离的细胞，能够有效地维持或提升已分离的细胞中的线粒体活性，以达到提升调控细胞能量转换的效率。
提升线粒体功能培养方法及其使用组合

[发明专利]调节重组蛋白生产样态的方法-CN201680042092.7有效
发明人： A·穆尔;D·布鲁尔曼;M·乔丹;H·布罗利;M·斯泰特勒 -专利权人：阿雷斯贸易股份有限公司
申请日： 2016-07-07 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养领域。具体地说，本发明涉及培养表达重组蛋白的宿主细胞的方法，所述宿主细胞培养在含有或补加有效量4,4’‑二异硫氰芪‑2,2’‑二磺酸(DIDS)的细胞培养基中，所述蛋白质的生产因此高于不含DIDS条件下培养的细胞。
调节重组蛋白生产方法

[发明专利]一种外泌体的提取方法及其应用-CN202110951789.9在审
发明人：付洁;王伊;李华柏;李雪洁 -专利权人：光武惠文生物科技（北京）有限公司;广西金则医学科技发展有限公司
申请日： 2021-08-14 - 公布日： 2021-12-10 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种外泌体的提取方法，主要包括将血清/血浆(枸橼酸钠采血管)过LDLR亲和层析柱以及对收集液采用氧化物进行富集浓缩的操作步骤。本发明采用LDLR亲和层析首先除去血清/血浆中的低密度脂蛋白，并采用氧化物对收集的缓冲液进行了浓缩，建立了一种从血清中纯化外泌体的方法。纳米流式检测颗粒数、蛋白质免疫印迹检测外泌体表面标志物、透射电子显微镜检测表明提取的外泌体得率高，本发明所提取的外泌体进一步结合裂解方法，将外泌体内部物质释放出来，核酸与蛋白层面均可以做后续研究。本发明具有操作步骤简单、提取时间短，制备获得的外泌体纯度高、并且适用于小量样本以及性价比高的优点，适合在体外诊断领域推广应用。
一种外泌体提取方法及其应用

[发明专利]具有细胞黏附反差特性的单层平行纤维图案及其制备方法-CN202110987744.7在审
发明人：姚响;顾张弘;张耀鹏;牛欠欠;欧阳秦君 -专利权人：东华大学
申请日： 2021-08-26 - 公布日： 2021-12-10 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种具有细胞黏附反差特性的单层平行纤维图案及其制备方法，纤维图案包括基底和固定在基底上的单层平行排列的纤维，纤维的两端通过粘合剂固定在所述基底；所述基底的表面经过抗细胞黏附接枝试剂接枝修饰；制备方法为：(1)采用所述抗细胞黏附接枝试剂接枝修饰基底后，通过静电纺丝、干法纺丝、湿法纺丝或3D打印的方法在基底表面制备单层平行排列的纤维；(2)将粘合剂涂覆于步骤(1)制得的单层平行排列的纤维两端与基底结合的部位，通过加热固化或光照固化的方式使粘合剂交联固化。本发明制得的纤维图案能够有效排除各类“背景黏附”的干扰，为准确揭示纤维自身直径、材质、疏密排布等特征对细胞行为影响提供了有效的材料平台。
具有细胞黏附反差特性单层平行纤维图案及其制备方法

[发明专利]高耐久性可渗透性含氟聚合物细胞培养袋-CN202080031071.1在审
发明人： M·A·约翰逊;S·R·安纳彻 -专利权人： W.L.戈尔及同仁股份有限公司
申请日： 2020-04-24 - 公布日： 2021-12-07 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：一种细胞培养袋，其包括由包含第一含氟聚合物和第二含氟聚合物的复合膜形成的主体。主体限定了构造成容纳细胞培养物的细胞培养隔室。第一含氟聚合物具有第一厚度，第二含氟聚合物至少部分浸渍第一含氟聚合物的第一厚度。复合膜的第二厚度为0.01毫米至0.059毫米，沿一个方向的拉伸强度为10,000psi至92,000psi。复合膜还具有2,000厘米3/米2/大气压/天至20,000厘米3/米2/大气压/天的O2通量，并且总透射率为70％至100％。细胞培养组件包括多个串联连接的细胞培养袋。细胞培养容器包括：细胞培养隔室和连接至细胞培养隔室的复合膜，所述复合膜包含第一含氟聚合物和第二含氟聚合物。
耐久性渗透性聚合物细胞培养

[发明专利]胚胎癌性细胞在制备3D细胞培养基质中的应用、制备方法及3D细胞培养基质-CN202111187431.X在审
发明人：徐海 -专利权人：徐海
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2021-12-07 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种胚胎癌性细胞在制备3D细胞培养基质中的应用、制备方法及3D细胞培养基质，涉及生物技术领域，本发明的发明人通过实验发现，胚胎癌性细胞在分化过程中会分泌高含量的可溶性基底膜混合物，该基底膜混合物在室温下，可自动聚集产生类似于哺乳动物细胞基底膜的生物活性基质材料，从而用于制备可满足不同需求的3D细胞培养基质。并且，可以根据后续培养需求选择同源的胚胎癌性细胞制备3D细胞培养基质，有效避免因动物异源蛋白和病原体污染造成的细胞生长抑制，制作繁琐等问题。
胚胎细胞制备细胞培养基质中的应用方法

[发明专利]一种控制细胞黏附和脱离的细胞培养材料及制备方法-CN201911010567.6有效
发明人：张天柱;王发明;任鹏飞;付一夫 -专利权人：东南大学
申请日： 2019-10-23 - 公布日： 2021-12-07 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种控制细胞黏附和脱离的细胞培养材料及制备方法，该材料以2‑正丙基‑2‑噁唑啉为原料，经单体开环聚合、侧链水解与修饰制得，通过简单酰胺化接枝到基底表面能够用于大规模细胞培养。本发明采用的原料，合成简单，价格低廉，所得材料无毒无害，且生物相容性好，在接枝过的基底上培养细胞时，能够仅通过降低培养基温度就可促使细胞从基底上自动脱落，避免使用胰酶，减少细胞损伤，最大限度保留了细胞活力，在大型细胞生产、组织修复以及干细胞收获过程中有重大应用价值。
一种控制细胞黏附脱离细胞培养材料制备方法

[发明专利]用于纺织品和纤维的人细胞沉积的细胞外基质涂层-CN202080027287.0在审
发明人：布莱恩·吉恩;彼得·D·加布里埃尔;杰里米·J·哈里斯 -专利权人：赛康特集团有限责任公司
申请日： 2020-04-03 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：一种形成涂覆的纺织品的方法，包括在纺织品的纤维上培养人细胞，使得人细胞在纺织品上产生并沉积人细胞外基质(hECM)。该方法还包括从hECM中去除人细胞，以提供纺织品和涂层的涂覆的纺织品，所述涂层包含在培养过程中由人细胞在纺织品上产生并沉积的hECM的残余物。涂覆的纺织品包括纺织品和纺织品上的涂层。涂层包括在涂层中的处于细胞沉积状态的hECM。一种固态生物反应器组合物，包括聚癸二酸甘油酯(PGS)加合物。PGS加合物包括PGS和促进因子或促进因子前体。另一种方法包括将涂覆的纺织品植入人体。该涂覆的纺织品是自体移植物。该涂层包括由来自人体的人细胞沉积的hECM。
用于纺织品纤维细胞沉积基质涂层

[发明专利]细胞外囊泡的保存稳定化剂及保存稳定化方法-CN202080029711.5在审
发明人：山根昌之;今若直子;中川祐二;笹本宏大 -专利权人：富士胶片和光纯药株式会社
申请日： 2020-04-16 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明的课题在于提供可将细胞外囊泡稳定地保存的手段。本发明涉及包含含有源自乙烯基吡咯烷酮的单体单元及源自乙酸乙烯酯的单体单元的共聚物或聚乙烯吡咯烷酮等、具有源自乙烯基吡咯烷酮的单体单元的聚合物而成的细胞外囊泡的保存稳定化剂，以及包含在该聚合物的存在下冷冻保存细胞外囊泡的步骤而成的细胞外囊泡的保存稳定化方法。
细胞外囊泡保存稳定方法

[发明专利]一种三维类器官的液滴培养方法-CN201810252385.9有效
发明人：王炳权;彭徐齐;张策 -专利权人：西北大学
申请日： 2018-03-26 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术和细胞培养技术领域，尤其涉及一种三维类器官的液滴培养方法以及其在生物医学中的应用。本发明将移液枪头与常规细胞培养方法相结合，利用移液枪头形成球形构象的液滴作为培养载体，在其中培养制备毫米级的三维类器官组织。本发明通过对移液枪头剪截位置、注入液体体积、液滴与截面间的接触角角度等因素的筛选分析，获得了比较理想的类器官液滴培养条件。同时，本发明可以通过对上述条件的适时调整，对三维类器官的形态(形状和大小)进行灵活有效的控制。此外，本发明方法还具有操作简便、培养成本低廉、培养效率高等优点。本发明方法培养制备的毫米级三维类器官组织可满足在个性化治疗早期进行体外药物筛选的需要。
一种三维器官培养方法

[发明专利]一种双响应型纳米仿生界面的制备及其在细胞捕获与应需无损释放中的应用-CN201810409599.2有效
发明人：刘定斌;高霞 -专利权人：南开大学
申请日： 2018-05-02 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：一种双响应型纳米仿生界面的制备及其在细胞捕获与应需无损释放中的应用。该纳米仿生界面，包括：纳米基底和修饰于其上的双响应型ATP aptamer自组装层；所述纳米基底为粗糙基底且具有近红外效应；所述ATP aptamer自组装层由包含ATP aptamer序列的DNA序列及其互补序列(c‑DNA)杂交而成的双链DNA(ds‑DNA)组成；所述ds‑DNA可在ATP刺激和温度(T)刺激下发生解离；所述纳米基底与c‑DNA之间可通过共价方式结合。所述纳米仿生界面修饰靶向基团后，可对复杂体系中的靶细胞进行分离纯化，并通过后续的ATP刺激和NIR刺激，实现捕获靶细胞的整体释放或区域性释放，甚至是单细胞释放。
一种双响纳米仿生界面制备及其细胞捕获无损释放中的应用