本发明公开了一种高产异戊醇的基因工程菌及其构建方法和应用。其是在谷氨酸棒杆菌中表达α‑酮异戊酸脱羧酶基因kivd和醇脱氢酶基因adh3,而获得高产异戊醇的基因工程菌,所述的α‑酮异戊酸脱羧酶基因kivd的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述的醇脱氢酶基因adh3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的重组菌经发酵培养12h,异戊醇的产量可高达497mg/L,是目前已报道基因工程菌合成异戊醇能力最高的重组菌。
一种信号肽及其在利用淀粉产L‑精氨酸重组菌中的应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明通过分子克隆技术和基因工程技术将来源Streptomyces kathirae CCTCC M 2012432不带自身信号肽的α‑淀粉酶与不同微生物来源的Sec和Tat两个主要分泌途径的十二条信号肽分别融合,在高产L‑精氨酸菌种中表达,筛选出一条高效分泌α‑淀粉酶的信号肽SEQ ID N0.1。首次报道,以该信号肽介导分泌α‑淀粉酶的重组钝齿棒状杆菌CGMCC No.0890/pMSPamy能利用廉价淀粉发酵生产L‑精氨酸,最优碳源添加条件下5L发酵罐上产量为48g/L。
一种信号肽及其在利用魔芋粉产L-谷氨酸重组菌中的应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明通过分子克隆技术和基因工程技术将经筛选和密码子优化后的信号肽即SEQ ID N0.1与来源B.subtilis CCTCC M 209200的β-甘露聚糖酶融合构建表达载体,在高产L-谷氨酸的菌种中表达。首次报道,以该信号肽介导分泌β-甘露聚糖酶的重组菌天津短杆菌SW07-1/pMSPman能利用廉价魔芋粉发酵生产L-谷氨酸,最优碳源添加条件下5L发酵罐上产量为65g/L。